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當期目錄

    2010年 第43卷 第6期 刊出日期:2010-03-15
      
    作物遺傳育種·種質資源·分子遺傳學
    Cre/loxP位點特異性重組系統在植物中應用的研究進展
    孫家利,閆曉紅,王力軍,魏文輝
    中國農業科學. 2010, 43(6):  1099-1107 .  doi:10.3864/j.issn.0578-1752.2010.06.001
    摘要 ( 796 )   PDF (359KB) ( 1550 )   收藏
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    Cre/loxP位點特異性重組系統自發現以來,在植物基因重組領域得到了廣泛應用,已成為提高轉基因植物安全性的有效方法。本文介紹了該系統的基本概況及其在轉基因植物表達載體構建方面的應用,尤其是在基因刪除、定點整合、多基因表達以及雜種優勢利用等方面的應用做了重點闡述。

    小麥puroindoline及其相關基因分子遺傳基礎研究進展
    陳鋒,董中東,程西永,詹克慧,許海霞,崔黨群
    中國農業科學. 2010, 43(6):  1108-1116 .  doi:10.3864/j.issn.0578-1752.2010.06.002
    摘要 ( 795 )   PDF (363KB) ( 710 )   收藏
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    籽粒硬度是重要的小麥品質性狀之一,對小麥的磨粉品質和加工品質有重要影響。控制籽粒硬度的 主效基因puroindoline位于5D染色體的短臂上,可分為Pina和Pinb 2種類型。Pina和Pinb緊密連鎖,編 碼區均為447個堿基,沒有內含子,共同形成小麥籽粒硬度的分子遺傳基礎。目前,普通小麥和山羊草中均已發現多種puroindoline變異類型,其中引起小麥籽粒硬度大幅度升高的Pina-D1b類型的分子機制為從編碼區第23個堿基開始缺失15 380個堿基。Puroindoline除了對小麥籽粒硬度有重要影響之外,對其它品質性狀也有重要影響,不同puroindoline變異類型之間小麥品質具有一定差異。另外,與puroindoline緊密連鎖的Gsp-1基因變異類型更為豐富,但對籽粒硬度沒有明顯的調節作用。最近發現的與puroindoline b高度同源的基因Pinb-2v具有4種類型,分別位于小麥7A、7B和7D染色體上,可能對籽粒硬度具有微效的調節作用。本文通過對puroindoline的分子特征和突變類型以及相關功能進行分析和總結,旨在為中國小麥品質的基因工程改良提供參考。

    棉花咖啡酸-O-甲基轉移酶基因的克隆及特征分析
    倪志勇,呂萌,李波,王娟,白巖,范玲
    中國農業科學. 2010, 43(6):  1117-1126 .  doi:10.3864/j.issn.0578-1752.2010.06.003
    摘要 ( 793 )   PDF (1337KB) ( 702 )   收藏
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    【目的】克隆棉花木質素合成關鍵酶基因GhCOMT1、GhCOMT2和GhCOMT3全長cDNA序列,分析其在不同組織部位的表達情況并進行原核表達研究。【方法】根據棉花纖維特異表達cDNA文庫分析得到的EST序列設計引物,采用RT-PCR技術克隆基因,用生物信息學方法對獲得的cDNA序列及推定的氨基酸序列進行分析。采用半定量RT-PCR方法研究GhCOMT1、GhCOMT2和GhCOMT3在不同組織中的表達。構建了基因的原核表達載體,經酶切鑒定后轉化到大腸桿菌BL21(DE3)中并誘導表達。【結果】從發育的棉花纖維中克隆了3個COMT基因cDNAs, GhCOMT1(GenBank登錄號為FJ479708)、GhCOMT2(GenBank登錄號為FJ479709)和GhCOMT3(GenBank 登錄號為FJ848869)分別具有1 101 bp、1 098 bp、1 071 bp的開放閱讀框,各自編碼366、365和356個氨基酸。GhCOMT1、GhCOMT2和GhCOMT3在棉花各個組織中都有表達,GhCOMT1和GhCOMT2在根部的表達量最高,GhCOMT3在莖中表達量最高。SDS-PAGE電泳分析表明,3個蛋白的最佳誘導表達條件均為0.2 mmol•L-1IPTG在37℃下誘導6 h。【結論】從棉花中克隆了3個木質素合成關鍵酶基因GhCOMT1、GhCOMT2和GhCOMT3,為進一步的生物學功能研究及其應用奠定了基礎。

    耕作栽培·生理生化
    不同類型水稻材料成熟胚組織培養力的比較
    閻麗娜,李霞,吳丹
    中國農業科學. 2010, 43(6):  1127-1135 .  doi:10.3864/j.issn.0578-1752.2010.06.004
    摘要 ( 1076 )   PDF (246KB) ( 1010 )   收藏
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    【目的】研制適應性廣的不同類型水稻成熟胚再生技術。【方法】采用生產上應用價值高的不同類型水稻品種成熟胚為外植體材料,比較研究9個粳稻、9個秈稻和11個新近培育的超級雜交稻(兩系或三系)或優勢組合在不同培養基中的出愈、分化和再生等組織培養力表現。【結果】以M8為基本培養基,在添加30 g•L-1蔗糖、8 g•L-1瓊脂和2 mg•L-1 2,4-D(2,4-苯氧乙酸)相同成分的基礎上,供試粳稻材料單獨添加較低濃度的細胞分裂素,即0.3 mg•L-1 6-BA(6-芐基嘌呤)可獲得較高的出愈率,出愈率在89.2%-61.7%之間;而供試秈稻材料則需在添加2 mg•L-1 6-BA和0.5 mg•L-1 KT(激動素)兩種細胞分裂素的基礎上,再添加1 mg•L-1 NAA(萘乙酸)生長素類激素,可明顯提高出愈率,出愈率在100%-9.1%之間;而11個偏秈型超級雜交稻則表現在添加1 mg•L-1 6-BA和1 mg•L-1 KT(激動素)兩種細胞分裂素,即可獲得較高的出愈率,出愈率在86.3%-40%之間。在此基礎上,在添加了0.5 mg•L-1 2,4-D和1 mg•L-1 6-BA的MS分化培養基(粳稻)以及0.2 mg•L-1 2,4-D和0.5 mg•L-1 6-BA(秈稻和超級雜交稻)的分化培養基上,可分別獲得59.5%-9.2%(粳稻)、87.5%-3.6%(秈稻)和43.2%-17.2%(雜交稻)的植株再生率。【結論】初步建立了適合相同水稻類型成熟胚高頻再生技術。

    玉米生產限制因素評估與技術優先序
    王崇桃,李少昆
    中國農業科學. 2010, 43(6):  1136-1146 .  doi:10.3864/j.issn.0578-1752.2010.06.005
    摘要 ( 862 )   PDF (282KB) ( 791 )   收藏
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    【目的】明確中國玉米生產的主要限制因素和技術發展優先領域。【方法】采用參與式方法,對中國主產省和東北春玉米、黃淮海春、夏播玉米和西南山地玉米三大主產區生產限制因素進行評估,并基于限制因素影響程度、解決的可能性評估,建立玉米生產技術優先序。【結果】當前限制中國玉米產量潛力實現的主要因素:一是以耕作栽培管理粗放、施肥方法不科學、技術到位率低等為主的栽培管理技術問題,在不同生態區玉米產量損失占28.8%—57.7%;二是以干旱為主的自然逆境因素,產量損失占9.3%—35.1%;三是玉米品種遺傳基礎狹窄,品種“多、亂、雜”、缺乏高產穩產的區域主導品種,良種良法配套差以及種子質量問題,產量損失占11.4%—19.8%;四是水土流失、耕層淺、土壤瘠薄等土壤障礙因素,產量損失占4.8%—20.2%;五是病、蟲、草、鼠等生物逆境危害,產量損失占4.5%—11.0%。【結論】加強“輕、簡、化”栽培技術研究;選育耐密、抗逆、廣適高產優質品種,并篩選確立區域主導品種;推進科技入戶和玉米生產機械化,提高技術到位率是近期政府制定相關玉米生產政策時應考慮的重要領域。

    植物保護
    美國西北部59個小麥品種(系)抗條銹病基因分子檢測及對中國條銹菌系抗性鑒定#br#
    白玉路,孫權,張春宇,崔娜,林鳳,徐世昌,章振羽,高陽,徐曉丹
    中國農業科學. 2010, 43(6):  1147-1155 .  doi:10.3864/j.issn.0578-1752.2010.06.006
    摘要 ( 922 )   PDF (403KB) ( 600 )   收藏
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    【目的】了解59份美國西北部小麥品種(系)對中國當前條銹菌流行小種的抗性水平,分析其抗病基因的存在情況,為培育中國抗條銹病新品種提供資源和依據。【方法】選用中國小麥條銹菌優勢小種條中31號、條中32號和條中33號對大部分具有高溫成株抗性的美國59份小麥品種(系)苗期及成株期進行抗性接種鑒定,利用與當前有效的全生育期抗性基因Yr10、Yr15、成株抗性基因Yr18、高溫成株抗性基因Yr39緊密連鎖的分子標記對供試材料進行分子檢測。【結果】抗性鑒定表明,Expresso、02W50076、ACS52610、WA008012、WA008018等5份材料苗期與成株期對條中31號、條中32號和條中33號混合菌均表現為抗病,屬于全生育期抗病品種。 33份材料苗期表現感病而成株期表現抗病,屬于成株期抗病品種。分子檢測發現59份材料均不含有Yr10;含有Yr15、Yr18和Yr39的材料分別為12、33和29份,占20%、56%和49%。【結論】Yr18、Yr39在美國西北部小麥品(系)中的分布較普遍,并且大部分可以抵抗中國當前流行的條銹菌生理小種,可應用這些抗性材料配制中國小麥抗條銹病新品種。

    小麥條銹菌一個產孢相關基因PsCon1的克隆及表達特征分析
    陳玥穎,郭軍,代西維,段迎輝,魏國榮,黃麗麗,康振生
    中國農業科學. 2010, 43(6):  1156-1163 .  doi:10.3864/j.issn.0578-1752.2010.06.007
    摘要 ( 900 )   PDF (564KB) ( 787 )   收藏
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    【目的】克隆小麥條銹菌產孢相關基因PsCon1,分析其在病菌不同發育時期的表達水平。【方法】利用RT-PCR和PCR技術克隆PsCon1的cDNA序列和基因組序列,采用生物信息學技術預測分析該基因的DNA序列結構及其編碼蛋白的保守域等基本特性,運用實時熒光定量RT-PCR技術分析PsCon1在夏孢子,芽管以及不同侵染時間的表達水平。【結果】PsCon1由3個外顯子和2個內含子構成,開放閱讀框長為252 bp,編碼83個氨基酸;編碼的蛋白PSCON1不含跨膜區,無信號肽,定位在細胞質,具有2個conidiation-specific protein 6保守結構域。PsCon1與小麥稈銹菌核苷酸序列的一致性在外顯子區為78%,內含子區為43%,與小麥稈銹菌(Puccinia graminis)的親緣關系最近,與煙曲霉(Aspergillus fumigatus)和費氏新薩托(Neosartorya fischeri)的親緣關系次之。PsCon1在小麥條銹菌萌發夏孢子時期基因表達量為新鮮夏孢子中的1.69倍。在親和組合中,PsCon1在小麥條銹菌接種小麥后6 h和24 h表達量最高,分別為在新鮮夏孢子中表達量的3.21倍和2.91倍;在接種后24 h至168 h,基因表達基本呈下調趨勢,在接種后168 h的表達量最低,僅為夏孢子時期的0.0004倍,在接種后216 h和264 h,表達量有所增加,表達量約為接種后168 h的15倍。在非親和組合中,PsCon1在小麥條銹菌接種小麥后36 h表達量最高,但僅為新鮮夏孢子基因表達量的0.13倍,基因表達總體呈下調趨勢。【結論】PsCon1參與了小麥條銹菌對小麥的侵染,可能作為一個致病相關基因影響了條銹菌芽管和吸器的形成,同時促進了條銹菌在侵染過程中的產孢。PsCon1的克隆為進一步研究該基因在小麥與條銹菌互作過程中的功能奠定了基礎。

    土壤肥料·節水灌溉·農業生態環境
    好氣和淹水處理間蘇南水稻土有機碳礦化量差異的變化特征#br#
    郝瑞軍,李忠佩,車玉萍
    中國農業科學. 2010, 43(6):  1164-1172 .  doi:10.3864/j.issn.0578-1752.2010.06.008
    摘要 ( 810 )   PDF (298KB) ( 546 )   收藏
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    【目的】探討好氣與淹水處理間水稻土有機碳礦化量差異的變化特征。【方法】采集江蘇省常熟市全市范圍的代表性水稻土樣品并布置室內好氣與淹水處理的恒溫培育試驗,觀測土壤有機碳礦化的動態過程及礦化量變化,比較分析不同水分狀況處理的土壤有機碳礦化量差異及形成機制。【結果】培養過程中不同水分狀況處理下土壤有機碳日均礦化量變化趨勢有顯著差異,好氣處理下培養前期迅速下降,而淹水處理下則迅速升高,并均在培養10 d后趨于穩定;好氣與淹水處理間有機碳日均礦化量差異主要表現在培養前期,隨培養時間延長而不斷減小,以致培養后期差異不明顯。好氣處理下土壤的基礎呼吸強度、有機碳日均礦化量和累計礦化量分別是淹水處理的2.26—19.11、0.96—2.41、0.96—2.41倍。統計分析表明,土壤中微生物生物量碳、氮含量越高則好氣與淹水處理間呼吸強度差異越大,而若土壤中微生物生物量氮、水溶性有機碳含量越高則好氣與淹水處理間土壤有機碳日均礦化量差異越大。【結論】淹水處理造成土壤微生物活性降低是導致土壤呼吸強度下降的主要原因,而在整個培養過程中土壤有機碳礦化量的變化還與水溶性有機碳含量有關。

    長期不同培肥處理對土壤有機氮組分及氮素礦化特性的影響
    王媛,周建斌,楊學云
    中國農業科學. 2010, 43(6):  1173-1180 .  doi:10.3864/j.issn.0578-1752.2010.06.009
    摘要 ( 806 )   PDF (265KB) ( 856 )   收藏
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    【目的】揭示長期不同培肥處理對黃土高原南部土墊旱耕人為土( 土)土壤有機氮組分、氮素礦化的影響以及有機氮組分對氮素礦化潛力的貢獻。【方法】采用Stanford和Smith間歇淋洗好氣培養法測定了 土19年長期不同施肥處理土壤礦化氮的數量,并采用Bremner法測定了培養前、后土壤有機氮各組分含量的變化。【結果】各處理土壤有機氮各組分含量高低順序為:氨基酸氮>非酸解氮>酸解未知氮>氨態氮>氨基糖態氮。與不施肥對照相比,長期單施化肥處理土壤有機氮各組分含量有不同程度的增加,但幅度有限;化肥配施秸稈或有機肥處理顯著提高了各有機氮組分含量,其中以氨基酸氮含量增加幅度最大;化肥配施秸稈或有機肥處理降低了酸解有機氮占全氮的比例。化肥長期配施有機肥或秸稈,顯著提高了土壤氮素礦化勢(N0)以及礦化率,其中化肥配施有機肥土壤N0大于化肥配施秸稈處理。相關分析表明,土壤氮素礦化勢N0與培養前后土壤氨基酸氮變化量間呈顯著負相關關系(P<0.05),與土壤酸解未知態氮和非酸解氮的變化量間的負相關關系未達顯著水平(P>0.05)。【結論】化肥配施有機肥或秸稈,是提高土壤供氮潛力的有效手段;氨基酸氮是土壤可礦化態氮的主要貢獻者。

    園藝
    外源鈣施用時期對緩解鹽脅迫番茄幼苗傷害的作用
    楊鳳軍,李天來,臧忠婧,魯少尉
    中國農業科學. 2010, 43(6):  1181-1188 .  doi:10.3864/j.issn.0578-1752.2010.06.010
    摘要 ( 794 )   PDF (346KB) ( 1150 )   收藏
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    【目的】探討鈣施用時期對提高番茄耐鹽性的作用。【方法】以番茄遼園多麗為材料,研究不同時期(提前3 d、同時、延后3 d)營養液增施Ca2+(10 mmol•L-1)對NaCl(100 mmol•L-1 )脅迫下番茄幼苗的生物量、外滲電導率、相對含水量、脯氨酸含量、可溶性糖含量、丙二醛含量、Ca2+-ATPase活性的影響,探討Ca2+對鹽脅迫傷害的緩解作用。【結果】在各處理中,100 mmol•L-1NaCl(T2)脅迫條件下,番茄幼苗的生長較對照(T1)顯著受到抑制,上述相關生理代謝受到影響;提前3 d(T5)營養液增施鈣,在NaCl脅迫時停止增施鈣,結果對緩解鹽脅迫傷害無顯著作用;在NaCl脅迫情況下同時增施10 mmol•L-1CaCl2(T3),顯著緩解了鹽脅迫對番茄幼苗的傷害,但提前3 d增施鈣處理(T4),未能進一步顯著增強這種緩解作用。【結論】鹽脅迫同時增施外源Ca2+具有顯著緩解NaCl鹽脅迫對番茄幼苗傷害的作用,但鹽脅迫之前增施外源Ca2+不具備這種作用,可見外源鈣提高番茄耐鹽性不是誘導效應,而主要是與Na+共存的離子競爭效應。

    蘋果葉片的高光譜特征及其色素含量監測
    朱西存,趙庚星,王瑞燕,董芳,王凌,雷彤
    中國農業科學. 2010, 43(6):  1189-1197 .  doi:10.3864/j.issn.0578-1752.2010.06.011
    摘要 ( 787 )   PDF (424KB) ( 742 )   收藏
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    【目的】分析蘋果葉片的高光譜特征,探索建立蘋果葉片色素含量的高光譜監測模型,以促進高光譜技術在蘋果長勢監測中的應用。【方法】通過方差分析方法,分析蘋果春梢和秋梢停止生長兩個時期功能葉片的不同部位、不同含水率、不同品種的高光譜特征。利用相關分析方法,研究高光譜參數與葉片色素含量間的關系,并建立基于光譜參數的葉片色素含量監測模型。【結果】在760—1 300 nm的近紅外波段,葉片光譜反射率后部低、前部高、中部居于二者之間;隨著葉片含水率降低,光譜反射率逐漸增大;不同品種的葉片,光譜反射率差異顯著。光譜參數R800/R550、紅邊面積Sr和綠峰反射率Rg與葉片色素含量之間有較好的相關性,并分別建立了色素含量監測模型。其中以Sr建立的Chl a、Chl(a+b)、Car含量監測模型和以R800/R550建立的Chl b含量監測模型為最佳。經均方根誤差(RMSE)和相對誤差(RE%)指標測試表明,模型能較好地監測蘋果葉片色素含量。【結論】用紅邊面積Sr和波段組合R800/R550來監測蘋果葉片色素含量效果較好,為蘋果長勢遙感監測提供了理論依據。

    云南省主要野生食用菌中重金屬調查
    黃晨陽,陳強,趙永昌,張金霞
    中國農業科學. 2010, 43(6):  1198-1203 .  doi:10.3864/j.issn.0578-1752.2010.06.012
    摘要 ( 977 )   PDF (328KB) ( 787 )   收藏
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    【目的】調查云南主要野生食用菌中砷(As)、鎘(Cd)、汞(Hg)、鉛(Pb)的背景值,研究不同種類野生食用菌的重金屬富集規律,為野生食用菌食品安全評估提供科學依據。【方法】在云南省25個縣采集茶褐牛肝菌(Boletus brunneissimus)、皺皮疣柄牛肝菌(Boletus duriusculus)、美味牛肝菌(Boletus edulis)、白牛肝菌(Boletus granulatus)、灰褐牛肝菌(Boletus griseus)、華麗牛肝菌(Boletus magnificus)、雞油菌(Cantharellus cibarius)、梭柄松苞菇(Catathelasma ventricosum)、變綠紅菇(Russula virescens)、雞 菌(Termitomyces albuminosus)、干巴菌(Thelephora ganbajun)、松茸(Tricholoma matsutake)等12種野生食用菌共165個鮮樣,分別采用硝酸-高氯酸濕式消解法和高壓消解法對As、Cd、Hg、Pb含量進行測定。【結果】不同種類的野生食用菌中As、Cd、Hg、Pb含量存在差異。其中,As平均含量為0.055—0.515 mg•kg-1,最高的是松茸,最低的是華麗牛肝菌;Cd平均含量為0.039—1.280 mg•kg-1,最高的是雞 菌,最低的是茶褐牛肝菌;Hg平均含量為0.015—0.608 mg•kg-1,最高的是美味牛肝菌,最低的是干巴菌;Pb平均含量為0.272—1.782 mg•kg-1,最高的是雞 菌,最低的是白牛肝菌。【結論】在這12種食用菌中,不同種類的野生食用菌As、Cd、Hg和Pb含量存在顯著差異。

    貯藏·保鮮·加工
    面粉品質與餃子皮品質性狀間的關系
    蘭靜,傅賓孝,Esey Assefaw,王樂凱,李輝,戴常軍, 趙琳,李宛,趙乃新,李哲濱,蘇萍
    中國農業科學. 2010, 43(6):  1204-1211 .  doi:10.3864/j.issn.0578-1752.2010.06.013
    摘要 ( 870 )   PDF (224KB) ( 886 )   收藏
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    【目的】明確面粉特性對餃子皮品質的影響,為改良餃子皮品質提供理論依據。【方法】選用中國和加拿大小麥品種及澳大利亞和美國商業小麥及中國商業面粉共計15份樣品,進行面粉理化指標、直鏈淀粉含量、快速黏度儀(RVA)等參數測定,并對餃子皮品質進行感官評價。【結果】形成時間、穩定時間、拉伸面積等參數與生餃子皮色澤呈顯著正相關(r分別為0.60、0.55、0.47,P<0.05),與熟餃子皮彈性呈顯著負相關(r分別為-0.55、-0.59、-0.48,P<0.05);最大拉伸阻力與生餃子皮色澤、熟餃子皮表觀和黏性呈極顯著正相關(r分別為0.64、0.72、0.67,P<0.01),與熟餃子皮彈性和硬度評分呈極顯著負相關(r分別為-0.81和-0.72,P<0.01)。淀粉含量與餃子皮的黏性呈極顯著負相關(r=-0.68,P<0.01),直鏈淀粉含量與餃子皮的彈性呈顯著負相關(r=-0.60,P<0.05),最低黏度、最終黏度及峰值時間顯著影響餃子皮黏性(r分別為0.61、0.54、0.53,P<0.05),稀懈值顯著影響餃子皮的硬度(r=0.58,P<0.05)。【結論】面團強度指標對餃子皮彈性和硬度評分具有負向作用,對餃子皮外觀起正向作用。高淀粉含量能降低餃子皮硬度和黏性,直鏈淀粉含量越低,餃子皮彈性越好。

    1-MCP和DPA對碭山酥梨黑皮病的抑制效果
    惠偉,牛瑞雪,宋要強,李德英
    中國農業科學. 2010, 43(6):  1212-1219 .  doi:10.3864/j.issn.0578-1752.2010.06.014
    摘要 ( 911 )   PDF (362KB) ( 751 )   收藏
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    【目的】探討1-MCP和DPA對碭山酥梨黑皮病的抑制效果及其可能的機理,為梨的黑皮病控制提供技術參考和理論依據。【方法】以碭山酥梨為材料,在果實冷藏(2±0.5℃)前,分別采用1 000μL•L-1、2 000μL•L-1的DPA溶液浸泡1 min和0.5μL•L-1的l-MCP氣體處理12 h,定期對果實部分采后生理指標進行測定,并在貯藏末期對其黑皮病發病情況進行觀察統計。【結果】1 000μL•L-1、2 000μL•L-1的DPA溶液和0.5μL•L-1 1-MCP處理,顯著地抑制了果皮α-法尼烯、共軛三烯、總酚、MDA的含量、細胞膜透性的增加和PPO活性的升高,并極其顯著地抑制了果實在貯藏期黑皮病的發生,延遲了其在貨架期的發病。【結論】采后適宜濃度的1-MCP和DPA處理,均能顯著地抑制和延緩碭山酥梨冷藏期和貨架期黑皮病的發生,但二者的作用機理可能不同。

    伽師瓜采后生理、貯期病害及貯藏保鮮技術
    張有林,張潤光,孫剛,陳婷
    中國農業科學. 2010, 43(6):  1220-1228 .  doi:10.3864/j.issn.0578-1752.2010.06.015
    摘要 ( 737 )   PDF (387KB) ( 657 )   收藏
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    【目的】研究伽師瓜采后生理和貯期病害,探討貯藏保鮮技術。【方法】以新疆伽師瓜為試材,研究采后呼吸類型和貯期主要病害,探討貯藏溫度、pH、噻苯咪唑(TBZ)熏蒸、殼聚糖涂膜對伽師瓜貯期品質和主要病害黑斑病的影響,測定TBZ和殼聚糖處理后伽師瓜多酚氧化酶(PPO)、過氧化物酶(POD)、果膠酶(PE)和過氧化氫酶(CAT)的活性變化。【結果】伽師瓜為呼吸躍變型果實,貯期病害黑斑病病原菌為叢梗孢科(Moniliaceae)青霉屬(Penicillium LK, ex Fries)鮮綠青霉(P. viridicatum Westling),TBZ熏蒸和殼聚糖涂膜對PPO、POD、PE酶活性和病原菌抑制作用顯著。伽師瓜采后先用TBZ熏蒸,再用pH 5.0、濃度為5mg•mL-1的殼聚糖溶液涂膜,在0.5—1.5℃的溫度下貯藏105 d,腐爛指數0.15,商品果率95%。【結論】TBZ和殼聚糖是伽師瓜良好的保鮮劑,結合適宜的pH和貯藏溫度保鮮效果理想。

    畜牧·資源昆蟲
    母豬哺乳期蛋白限飼對子代血脂水平、肌內脂肪含量及H-FABP基因表達的影響
    張宏宇,單安山,徐林,李建平,程寶晶
    中國農業科學. 2010, 43(6):  1229-1234 .  doi:10.3864/j.issn.0578-1752.2010.06.016
    摘要 ( 940 )   PDF (415KB) ( 578 )   收藏
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    【目的】本試驗旨在研究哺乳期母豬蛋白限飼對子代血脂水平、肌內脂肪含量及H-FABP基因表達的影響。【方法】選取胎次、體重相近(180±5 kg)、經同期純種繁育的民豬及長白豬妊娠母豬12頭(民豬和長白豬各6頭)。將每個品種母豬隨機分為2組,每組3個重復,每個重復1頭母豬。供試母豬妊娠期營養水平相同,哺乳期對照組日糧蛋白水平為18%,限飼組蛋白水平為9%。在子代豬斷奶(28 d)和出欄(180 d)時測定血清中血脂水平、背最長肌中肌內脂肪含量及心臟脂肪酸結合蛋白(H-FABP)基因相對表達量。【結果】母豬哺乳期蛋白限飼顯著提高了長白豬子代28 d時血清總膽固醇(CHO)含量(P<0.05),對180 d子代影響不顯著;有提高長白豬子代28 d及180 d時血清甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白(LDL),降低高密度脂蛋白(HDL)含量的趨勢,但差異不顯著;民豬限飼組子代28 d及180 d時血清中CHO、TG和LDL含量高于對照組,HDL含量低于對照組,但差異均不顯著。母豬哺乳期蛋白限飼顯著提高了長白豬子代28 d時肌內脂肪含量及H-FABP mRNA 相對表達量 (P<0.05),對180 d子代也有一定程度的提高,且有提高民豬子代28 d和180 d肌內脂肪含量及H-FABP mRNA相對表達量的趨勢,但差異均不顯著。【結論】母豬哺乳期蛋白限飼可對子代早期脂肪沉積產生不同程度的母體效應,但這種影響隨著日齡的增加而減弱,存在補償效應,且豬種間表現出一定的差異。

    獸醫
    表達H3N2亞型豬流感病毒HA基因重組腺病毒對小鼠免疫原性的研究
    展小過,喬傳玲,楊煥良,陳艷,孔維,辛曉光,陳化蘭
    中國農業科學. 2010, 43(6):  1235-1241 .  doi:10.3864/j.issn.0578-1752.2010.06.017
    摘要 ( 823 )   PDF (390KB) ( 614 )   收藏
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    【目的】構建一株表達H3N2亞型豬流感病毒(SIV)HA基因的復制缺陷型重組腺病毒,并測定其對小鼠的免疫效力。【方法】以含有SIV A/Swine/Guangdong/9/2005(H3N2)HA基因的重組質粒pMD18-H3HA為模板,利用帶特定酶切位點的引物PCR擴增HA基因,將其亞克隆入質粒pIRES2-EGFP中,再次將含有H3HA及EGFP的基因片段克隆到腺病毒的穿梭質粒pDC315,構建重組穿梭質粒pDC315-H3HA-EGFP。利用脂質體轉染方法將穿梭質粒pDC315-H3HA-EGFP和腺病毒骨架質粒pBHGloxΔE1,E3Cre共轉染HEK293細胞,基于腺病毒感染后形成的典型細胞病變及EGFP基因在細胞中的表達篩選重組腺病毒rAd-H3HA- EGFP。將重組病毒rAd-H3HA-EGFP以108TCID50兩次接種6周齡的Balb/c小鼠,時間間隔為3周,通過檢測免疫小鼠的抗體水平及對病毒攻擊的保護情況評價該重組病毒的免疫原性。【結果】HA基因已被重組到腺病毒的基因組中,并能夠伴隨病毒的復制而表達,表達蛋白具有良好的生物性活性。重組腺病毒rAd-H3HA-EGFP經增殖、純化后其TCID50可達1.58×1010•mL-1,以108 TCID50的劑量免疫小鼠后,能夠誘導產生高水平的特異性抗體,并對H3亞型SIV的攻擊提供有效保護。【結論】構建了一株具有良好免疫原性的復制缺陷型重組腺病毒,為H3亞型SI活載體疫苗的研制奠定了基礎。

    以合成肽為抗原建立口蹄疫病毒非結構蛋白抗體檢測ELISA試劑盒#br#
    楊繼飛,楊蘇珍,楊艷艷,職愛民,趙東,郅玉寶,邢廣旭,鄧瑞廣,柴書軍,張改平
    中國農業科學. 2010, 43(6):  1242-1247 .  doi:10.3864/j.issn.0578-1752.2010.06.018
    摘要 ( 684 )   PDF (318KB) ( 609 )   收藏
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    【目的】建立合成多肽抗原檢測FMD NSP 抗體的 ELISA 方法。【方法】固相法合成特異性FMDV NSP B細胞表位肽,將其偶聯在BSA載體蛋白上,作為抗原包被在ELISA板上,制備檢測抗FMDV NSP抗體的ELISA 試劑盒,并對該試劑盒進行方法考核。【結果】抗原包被濃度選擇2.5μg•mL-1; 檢測199 份血清標本,與美國UBI商品試劑盒符合率達到96.48%,與國產3ABC ELISA比較,符合率為97.48%,顯示極好的一致性。【結論】該合成肽ELISA試劑盒可以用以檢測NSP抗體,從而鑒別FMD的自然感染與疫苗免疫,試劑盒特異性強,重復性好、穩定性高,操作簡便。

    復方益母生化散對奶牛子宮內膜細胞CYP450表達和免疫功能的影響
    杜金梁,秦建華,褚景生,徐麗娜,馬玉忠
    中國農業科學. 2010, 43(6):  1248-1254 .  doi:10.3864/j.issn.0578-1752.2010.06.019
    摘要 ( 757 )   PDF (376KB) ( 596 )   收藏
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    【目的】探討復方益母生化散對奶牛子宮內膜炎的作用機理。【方法】體外實驗:分離奶牛子宮內膜細胞,細菌脂多糖(LPS)誘導子宮內膜細胞炎癥模型,復方益母生化散處理子宮內膜炎癥細胞48 h、72 h,Western blotting法檢測CYP450的表達;體內實驗:復方益母生化散栓劑治療患有子宮內膜炎的奶牛,檢測血清中IgG、IgA含量的變化。【結果】復方益母生化散處理后,子宮內膜炎癥細胞CYP450的表達隨復方益母生化散劑量的增加而呈升高的趨勢,血清中IgG、IgA的含量與對照組相比明顯升高。【結論】2 000 µg•mL-1的復方益母生化散作用奶牛子宮內膜炎癥細胞48 h,CYP450的表達最明顯。

    雞白細胞介素-1β基因內含子1、2多態與部分免疫性狀的相關性分析#br#
    王存波,常國斌,周瓊,廖菁,龔琳琳,陳蓉,胡國順,雷黎麗,張海波,王克華,包文斌,陳國宏
    中國農業科學. 2010, 43(6):  1255-1264 .  doi:10.3864/j.issn.0578-1752.2010.06.020
    摘要 ( 723 )   PDF (488KB) ( 556 )   收藏
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    【目的】以白細胞介素-1β(Interleukin-1β,IL-1β)基因為候選基因,研究其單核苷酸多態性(single nucleotide polymorphism, SNP),及其與部分免疫性狀的關系。【方法】根據紅色原雞IL-1β基因序列設計引物一對,利用PCR-SSCP方法檢測了如皋雞、文昌雞以及安卡雞IL-1β基因內含子1、2的SNP,同時檢測了56日齡的血清IL-1濃度、異嗜性粒細胞/淋巴細胞(heterophil/lymphocyte,H/L)值、綿羊紅細胞(sheep red blood cell,SRBC)抗體滴度、新城疫(newcastle disease,ND)抗體滴度、禽流感(avian influenza,AI)抗體滴度5個免疫性狀, 并進一步分析了SNP位點與免疫性狀的關系。【結果】共檢測出6個SNP位點,分別為T107G突變、T130A突變、C143T突變、A208C突變、T241G突變及T274C突變。經關聯分析,發現107、208、241及274位點存在顯著的基因型效應(P<0.05或P<0.01),基因型組合對H/L值及ND抗體滴度兩個性狀上存在顯著效應(P<0.05)。【結論】241位點突變型個體3個免疫性狀均優于野生型,有望在雞的抗病育種中篩選為新的標記位點。利用基因型組合選擇效果優于對單個位點的選擇。
    研究簡報
    保水劑對烤煙光合特性日變化的影響
    趙銘欽,趙進恒,張迪,韓富根,張廣富,李元實,金洪石
    中國農業科學. 2010, 43(6):  1265-1273 .  doi:10.3864/j.issn.0578-1752.2010.06.021
    摘要 ( 944 )   PDF (297KB) ( 606 )   收藏
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    【目的】探討保水劑對烤煙光合特性的影響,在保水劑不同施用量條件下,對烤煙凈光合速率及其生理生態因子日變化進行研究。【方法】利用LI-6400便攜式光合測定系統測定烤煙光合指標日變化,并采用Excel2007和SPSS13.0對試驗數據進行方差分析、相關分析和通徑分析。【結果】4個處理的凈光合速率(Pn)、氣孔導度(Gs)和蒸騰速率(Tr)日變化均為單峰曲線,峰值多出現在9:00或11:00,沒有“午休現象”;隨保水劑施用量的增加,煙葉的光合能力總體上逐漸增強;未施保水劑的煙株凈光合速率主要受蒸騰速率和大氣相對濕度的影響,施用保水劑的煙株凈光合速率主要受氣孔導度和大氣相對濕度的影響。【結論】保水劑可以增強煙葉的光合能力;4個處理以保水劑施用量為45 kg•hm-2的光合能力最強;延邊雨季為土壤提供了充足的水分,這是烤煙成熟期沒有“午休”現象的主要原因;保水劑主要是通過調節煙葉的氣孔導度,進而影響其凈光合速率。

    提高超級雜交稻庫容量的施氮數量和時期運籌
    石麗紅,紀雄輝,朱校奇,李洪順,彭華,劉昭兵
    中國農業科學. 2010, 43(6):  1274-1281 .  doi:10.3864/j.issn.0578-1752.2010.06.022
    摘要 ( 825 )   PDF (295KB) ( 558 )   收藏
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    【目的】探索提高超級雜交稻庫容量的氮素優化措施,對于提高氮肥利用效率和實現超級雜交稻養分高產高效具有重要現實意義。【方法】以具有代表性的超級雜交稻品種Y兩優1號為材料,通過不同氮素施用量 (基、穗施氮比例80﹕20下施氮量為0-270 kg•hm-2)與施用時期運籌(施氮量180 kg•hm-2下基、蘗、穗、粒不同施氮比例)的田間試驗結合水稻主要生長性狀調查和數學回歸方法,分析構建超級稻最大庫容量的指標及其氮素優化措施。【結果】施氮量與超級雜交稻有效分蘗(穗)線性相關,與穗實粒數、總實粒數和產量二次拋物線相關;基、穗施氮比例80﹕20條件下超級雜交稻施氮量為215.6 kg•hm-2時,單位面積總實粒數最大;施氮量為245.9 kg•hm-2時,產量達到最高(11.42 t•hm-2)。基、穗兩時期施氮比例為60﹕40,以及進一步分配為基、蘗、穗、粒施氮比例10﹕50﹕25﹕15時,超級雜交稻的穗實粒數、總實粒數和產量顯著增加,在減少施氮65.9 kg•hm-2基礎上,可分別比基-穗施氮比例80﹕20條件下,施氮-產量模擬方程求得的最高產量增加2.01%、2.89%。【結論】通過減少基肥氮比例、增加蘗肥氮和穗粒肥氮比例等氮后移的優化措施,可提高分蘗數、增加成穗率和穗實粒數,從而顯著提高最大庫容量(總實粒數)和產量,充分發揮品種的產量潛力,并有效減少施氮量。

    大豆菌核病田間快速接種鑒定方法研究
    韓廣振,韓粉霞,孫君明,于紹軒,葛一楠,閆淑榮,楊華
    中國農業科學. 2010, 43(6):  1282-1287 .  doi:10.3864/j.issn.0578-1752.2010.06.023
    摘要 ( 715 )   PDF (285KB) ( 1016 )   收藏
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    【目的】在大田環境下建立快速有效的大豆菌核病田間接種鑒定方法,為大豆抗菌核病育種服務。【方法】采用收集不同地區和寄主來源的菌核病分離物,經PDA培養基再生培養,再接種麥粒形成麥粒接種體,利用微創結合錫箔紙捆綁麥粒接種體的方法建立大豆菌核病田間接種鑒定方法。【結果】不同大豆種質間的病情指數和病斑長度存在顯著差異,不同分離物間的病情指數和病斑長度也存在顯著差異,而重復間的病情指數和病斑長度差異不顯著,病斑長度與病情指數呈極顯著正相關(r = 0.8301,P<0.0001)。【結論】該大豆菌核病田間接種鑒定方法能夠有效地對大豆菌核病分離物的致病性和大豆植株抗性進行鑒定和篩選,可用于大豆抗菌核病育種。

    環介導等溫擴增技術檢測菊花中番茄不孕病毒
    劉佳,黃叢林,吳忠義,張秀海,王永勤
    中國農業科學. 2010, 43(6):  1288-1294 .  doi:10.3864/j.issn.0578-1752.2010.06.024
    摘要 ( 763 )   PDF (570KB) ( 611 )   收藏
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    摘要:[目的] 環介導等溫擴增(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)是一種特異、靈敏、快速的新型基因檢測技術。本研究擬用該新型技術建立菊花番茄不孕病毒的檢測方法。[方法]針對靶基因的6 個區域設計4 種特異引物,對LAMP反應的MgCl2、dNTPs、甜菜堿、內引物、外引物各個成分進行了優化;建立利用LAMP技術快速檢測菊花番茄不孕病毒的技術體系;比較LAMP和RT-PCR兩種不同方法的靈敏度,并用該方法檢測。 [結果] 建立了菊花番茄不孕病毒LAMP的檢測方法;LAMP與RT-PCR相比具有靈敏度高、快速、簡便等優點。 [結論] LAMP是在等溫條件下進行,具有時間少,成本低,特異性高,檢測方法多等優點;適于生產上推廣使用。
    雌雄同株黃瓜單性結實性遺傳分析
    閆立英,婁麗娜,李曉麗,婁群峰,馮志紅,陳勁楓
    中國農業科學. 2010, 43(6):  1295-1301 .  doi:10.3864/j.issn.0578-1752.2010.06.025
    摘要 ( 818 )   PDF (268KB) ( 490 )   收藏
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    【目的】分析雌雄同株黃瓜單性結實性的主基因+多基因混合遺傳特點,為選育強單性結實雌雄同株黃瓜品種提供理論依據。【方法】通過強單性結實雌雄同株黃瓜自交系‘6457’與非單性結實自交系‘6429’和‘6426’構建的6個世代群體,應用植物數量性狀主基因+多基因聯合分離分析方法,分析不同遺傳背景和季節雌雄同株黃瓜單性結實性遺傳表現。【結果】雌雄同株黃瓜單性結實性遺傳受2對主基因+多基因控制(E-1-0,E-1-2)。兩主基因的加性效應值均較大,B1、B2、F2主基因遺傳率分別為72.2%—88.8%、52.5%—93.1%、88.6%—95.4%,相應的多基因遺傳率分別為0—11.2%、0—43.1%、0—1.5%。【結論】強單性結實性雌雄同株黃瓜品種選育以雙親均為強單性結實為宜,常規雜交育種早期世代選擇有效。

    基于AFLP的菊屬、亞菊屬及其近緣屬的屬間關系
    趙宏波,繆恒彬,吳國盛,陳發棣,郭維明
    中國農業科學. 2010, 43(6):  1302-1313 .  doi:10.3864/j.issn.0578-1752.2010.06.026
    摘要 ( 731 )   PDF (839KB) ( 963 )   收藏
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    【目的】由于研究材料、地理分布等條件的限制,菊屬(Dendranthema)、亞菊屬(Ajania)及其近緣屬的屬間關系未得到很好解決。核糖體ITS區和葉綠體trnL/trnF間區等相關分子序列解析用于研究植物系統進化具有較大優勢,但在菊屬及其近緣屬等相關類群間存在信息位點低的問題,而AFLP標記以其高多態性的優點在親緣關系很近類群的系統演化研究中表現出一定的優勢,因此本研究利用AFLP技術對菊屬、亞菊屬及其近緣屬的屬間關系進行研究,旨在分析和探討菊屬、亞菊屬及其近緣屬的系統關系,同時為菊花(D. ×grandiflorum)等材料的遺傳育種提供參考。【方法】利用9對熒光標記引物對東亞蒿亞族菊屬、亞菊屬及其近緣類群共50個分類單元進行AFLP分析,同時分別利用SPSS 11.0軟件采用非加權平均數UPGMA 方法和PAUP* 4.0 b10軟件采用最大簡約法進行聚類分析。【結果】AFLP分析共獲得1 695個多態性條帶。根據相似性系數,無論是整個蒿亞族及其近緣類群內部,還是菊屬、亞菊屬內部,均表現出較高的遺傳多樣性,種間分化明顯。【結論】無論是UPGMA聚類分析結果還是構建的最大簡約樹,AFLP結果均將菊屬和Arctanthemum先聚為一亞分支,各自形成兩個種群,各自種群包含亞菊屬的個別類群;亞菊屬的大部分類群和太行菊屬(Opisthopappus)形成另一亞分支,與菊屬亞分支互為姐妹群形成菊屬-亞菊屬大分支。這說明菊屬和亞菊屬可能是由共同的祖先類群平行演化而來,其中亞菊屬的多花亞菊(A. myriantha)、鋪散亞菊(A. khartensis)等與菊屬親緣關系較近,而原產日本的磯菊(A. pacifica)、鹽菊(A. shiwogiku)等是亞菊屬中較進化類型;太行菊屬的系統地位可能更接近于蒿亞族;短舌菊屬(Brachanthemum)則被排除于菊屬群之外。柳葉亞菊(A. salicifolia)、異葉亞菊(A. variifolia)等應從亞菊屬中分離出來,支持單列成櫟葉菊屬(Phaeostigma)。

    溫湯處理種球對亞洲百合幼苗耐熱性的影響
    劉雪凝,楊利平,馬川,向地英
    中國農業科學. 2010, 43(6):  1314-1320 .  doi:10.3864/j.issn.0578-1752.2010.06.027
    摘要 ( 984 )   PDF (415KB) ( 552 )   收藏
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    【目的】研究溫湯處理種球對亞洲百合幼苗耐熱性的影響。【方法】以亞洲百合‘多安娜’(Pollyanna)為試材,研究種球在45℃下,經歷不同時間梯度(0、10、20、30、40、50 min)溫湯處理后,其幼苗抗性生理指標及電阻抗圖譜參數對38℃脅迫的反應。【結果】種球熱鍛煉20 min,植株SOD活性及可溶性糖含量分別高于對照51.41%(P<0.01)和23.45%(P<0.01),根系活力比對照增加57.11%(P<0.01),弛豫時間與對照無顯著性差異;處理30 min后,SOD活性及可溶性糖含量分別達到峰值,但與處理20 min差異不顯著,且根系活力下降至低于對照。【結論】種球溫湯處理20 min顯著提高亞洲百合‘多安娜’幼苗耐熱性。

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