Please wait a minute...
廣告服務

當期目錄

    2009年 第42卷 第8期 刊出日期:2009-08-10
      
    作物遺傳育種·種質資源·分子遺傳學
    廣西普通野生稻的遺傳多樣性及分布特征
    黃 娟,楊慶文,陳成斌,梁世春,張萬霞,喬偉華,王家祥
    中國農業科學. 2009, 42(8):  2633-2642 .  doi:10.3864/j.issn.0578-1752.2009.08.001
    摘要 ( 1119 )   PDF (439KB) ( 977 )   收藏
    相關文章 | 多維度評價

    【目的】對廣西境內普通野生稻居群遺傳多樣性進行研究,明確廣西普通野生稻遺傳多樣性分布與地理特征的關系。【方法】利用36對分布于水稻12條染色體上的微衛星引物對來自廣西14個區域(縣級行政區域)的27個居群690份普通野生稻材料進行遺傳多樣性分析。【結果】所有個體平均等位基因數A=9.86,有效等位基因數Ae=5.05,總遺傳多樣度Ht=0.74,基因分化系數Gst=0.49,說明廣西普通野生稻遺傳多樣性豐富,且居群內與居群間的多樣性對總遺傳多樣性的貢獻相當。通過不同區域遺傳多樣性檢測和聚類分析,在遺傳一致度為0.5處可把廣西普通野生稻分為3個類群。【結論】結合廣西的地形及野生稻居群的分布情況,3個類群的形成與山脈的阻隔、水系的分布以及地質結構等影響基因傳播途徑的特征關系密切。

    玉米亞硫酸氧化酶基因ZmSO的克隆及在二氧化硫脅迫下的表達分析
    夏宗良,武 軻,王永霞,周 朋,丁俊強,吳建宇
    中國農業科學. 2009, 42(8):  2643-2651 .  doi:10.3864/j.issn.0578-1752.2009.08.002
    摘要 ( 927 )   PDF (769KB) ( 817 )   收藏
    相關文章 | 多維度評價

    【目的】克隆玉米中的亞硫酸氧化酶(Sulfite Oxidase,SO)基因,明確其在SO2脅迫下的表達,為今后利用SO進行玉米抗環境污染(SO2、酸雨等)的遺傳改良奠定基礎。【方法】采用RT-PCR結合RACE技術克隆SO基因,并利用半定量RT-PCR技術分析其在SO2脅迫下的表達。【結果】從玉米自交系Q9中分離到SO基因的全長cDNA 序列(GenBank登錄號:FJ436404),命名為ZmSO。該基因的開放閱讀框為1 194 bp,編碼397個氨基酸。序列比對及結構預測分析表明,ZmSO編碼的氨基酸序列與擬南芥、番茄、水稻中的氨基酸序列的相似性分別達到72%、74%和89%,且包含1個鉬輔因子結合域、1個自身二聚化的結構域和1個過氧化物體靶信號序列。半定量RT-PCR分析顯示,高濃度SO2脅迫后,在高抗系中ZmSO表達水平顯著增高,而在高感系中無顯著變化。【結論】分離獲得的ZmSO與其它植物物種的SO具有較高的同源性,在高抗系中表達受SO2脅迫誘導增強,可能參與抗性系對SO2脅迫的響應和抗性反應過程。

    大豆異黃酮與脂肪、蛋白質含量基因定位分析
    梁慧珍,王樹峰,余永亮,練 云,王庭峰,位艷麗,鞏鵬濤,劉學義,方宣鈞
    中國農業科學. 2009, 42(8):  2652-2660 .  doi:10.3864/j.issn.0578-1752.2009.08.003
    摘要 ( 951 )   PDF (530KB) ( 889 )   收藏
    相關文章 | 多維度評價

    【目的】研究大豆異黃酮與脂肪、蛋白質含量基因定位及相關性,為大豆品質改良、分子育種及基因克隆等應用提供理論依據。【方法】利用SSR技術,對晉豆23號和灰布支雜交構建的F13代大豆重組自交系群體的474個家系進行了連鎖圖譜的構建。在此基礎上,利用 WinQTLCart2.0 軟件分析了影響大豆異黃酮含量、脂肪含量和蛋白質含量3個重要品質性狀的QTL,通過復合區間作圖分析,檢測QTL;同時,對異黃酮與脂肪、蛋白質的含量相關性分析。【結果】檢測到23個QTL,其中控制異黃酮含量QTL有6個,分別定位在J、N、D2和G染色體的連鎖群上;控制脂肪含量的QTL有11個,分別定位在第A1、A2、B2、C2和D2染色體的連鎖群上;控制蛋白質含量的QTL有6個,分別定位在B2、C2、G和H1染色體的連鎖群上。相關性分析結果表明:異黃酮與蛋白質含量呈極顯著負相關;蛋白質和脂肪含量呈極顯著負相關;蛋白質和蛋白質脂肪總量呈極顯著正相關。【結論】3個重要品質性狀的部分基因定位結果與其相關性分析是一致的,其結果對大豆品質育種應用有重要利用價值。

    利用SSR標記分析小豆種質資源的遺傳多樣性
    WANG Li-xia,CHENG Xu-zhen,WANG Su-hua,XU Ning,LIANG Hui,ZHAO Dan
    中國農業科學. 2009, 42(8):  2661-2666 .  doi:10.3864/j.issn.0578-1752.2009.08.004
    摘要 ( 1017 )   PDF (269KB) ( 941 )   收藏
    相關文章 | 多維度評價

    【目的】分析小豆起源國中國豐富的小豆種質資源的遺傳多樣性及群體結構,提高這些種質在育種中的利用效率。【方法】選用51對SSR引物對國內外145份小豆種質進行多樣性評價,并分析了中國小豆種質資源間的遺傳關系和遺傳結構。【結果】共檢測出222個等位變異,每SSR位點的等位變異數為2~13不等,平均為4.35個,其中分布頻率低于5%的等位變異數占35.9%。多態性信息含量(PIC值)為0.014~0.838,平均為0.472。不同種質間遺傳相似性系數為0.227~0.951,平均為0.482。比較分析發現,湖北、陜西等省小豆資源的遺傳變異最豐富,且遺傳背景與中國主產區小豆存在較大差異。基于NTSYS的聚類可以將145份小豆種質劃分為5組,根據組內種質的地理來源,可分別命名為東北組、華北Ⅰ組、華北Ⅱ組、華東組和混合組,其中混合組主要由湖北、陜西及國外種質組成。利用STRUCTURE對小豆種質資源的遺傳結構分析與NTSYS聚類結果基本一致,即種質的遺傳背景與地理來源有關。【結論】中國小豆種質資源遺傳變異豐富,不同地理來源小豆間存在遺傳分化,可以作為小豆生態區劃的重要參考依據。

    谷子抗旱相關性狀的主成分與模糊聚類分析
    孟慶立,關周博,馮佰利,柴 巖,胡銀崗
    中國農業科學. 2009, 42(8):  2667-2675 .  doi:10.3864/j.issn.0578-1752.2009.08.005
    摘要 ( 1019 )   PDF (271KB) ( 1267 )   收藏
    相關文章 | 多維度評價

    【目的】探討作物抗旱性分析評判的方法,對谷子主要農藝性狀和部分生理指標與抗旱性之間的關系進行綜合評價。【方法】采用主成分分析(Principal Components Analysis,PCA)和模糊聚類(Fuzzy Clustering, FC)分析,根據16個谷子品種在干旱脅迫和自然降水條件下的抗旱相關性狀對其抗旱性進行綜合評價。【結果】主成分分析結果表明,6個綜合主成分可代表谷子抗旱性90.71%的原始數據信息量。利用抗旱性度量值進行模糊聚類,可將16個谷子品種的抗旱性劃分為3類,聚類結果可以較好地反映這些谷子品種的選育和種植區域的干旱特點,其中冀谷18和豫谷1號抗旱性強且穩定性好。【結論】利用主成分分析,結合模糊聚類的方法進行谷子的抗旱性綜合評價,不僅可以避免單一指標的片面性和不穩定性,而且可以較好地揭示谷子抗旱相關性狀與其抗旱性的關系。

    甘蔗水分脅迫響應相關醛脫氫酶基因的克隆及其表達特征分析
    張積森,郭春芳,王冰梅,張木清,陳由強,陳如凱
    中國農業科學. 2009, 42(8):  2676-2685 .  doi:10.3864/j.issn.0578-1752.2009.08.006
    摘要 ( 933 )   PDF (876KB) ( 925 )   收藏
    相關文章 | 多維度評價

    【目的】篩選并克隆與水分脅迫相關的基因,通過對目的基因的表達分析進一步解析植物的抗旱機制,為甘蔗抗逆育種提供候選基因和理論依據。【方法】應用消減文庫技術結合cDNA芯片技術篩選水分脅迫誘導的基因的EST序列,根據篩選到感興趣的上調表達基因的EST序列,用RACE技術獲得SSADH的全長cDNA序列,并通過實時熒光RT-PCR技術對該基因的表達特征進行分析。【結果】通過消減文庫技術結合cDNA芯片技術篩選的EST中含有4個推測為基因SSADH 的EST,其在水分脅迫處理的斑茅中均明顯上調表達。通過RACE擴增獲得甘蔗SSADH全長cDNA序列為1 914 bp,其中5′端非編碼區25 bp,開放閱讀框為1 581 bp,3′端非編碼區306 bp,在1 749處有終止加A信號AATAA。克隆的甘蔗全長cDNA序列進行NCBI比對分析顯示,所克隆的甘蔗SSADH全長cDNA與擬南芥(NM_106592.3)的ALDH5F1同源性為73%,表明克隆的cDNA序列可以歸為甘蔗的醛脫氫酶家族基因ALDH5F1。通過熒光實時PCR分析SSADH表達表明,該基因參與干旱脅迫下的全程響應,并證明水分脅迫下該基因表達與Ca2+的存在調控關系。【結論】克隆了甘蔗基因SSADH,該基因為一個水分脅迫響應基因;SSADH的植物在體表達與Ca2+存在調控關系。克隆的基因SSADH可用于植物抗逆性調控研究。

    多性狀綜合評定的秩和測驗方法及其應用
    駱汝九,胡治球,宋 雯,徐辰武
    中國農業科學. 2009, 42(8):  2686-2694 .  doi:10.3864/j.issn.0578-1752.2009.08.007
    摘要 ( 862 )   PDF (520KB) ( 658 )   收藏
    相關文章 | 多維度評價

    【目的】秩和比較作為一種非參數方法,雖在作物品種評價方面得到一定的應用,但對多品種多性狀的綜合評定仍缺乏必要的統計測驗基礎。【方法】利用“H0:各品種在各性狀上的秩次隨機分布”假設。【結果】導出了多品種多性狀秩和的理論分布;并據之給出了進行品種間多性狀綜合評價秩和測驗的臨界值。通過定義任意長度整數C++運算律,解決了當品種數和性狀數較多時,因常用軟件內置數據類型有效位數不足所導致的計算誤差問題。最后,以糯玉米12個品種5個淀粉粘度性狀為例演示了分析程序。【結論】該方法操作簡便,評定結果具有一定參考意義。

    耕作栽培·生理生化
    一種新的估算水稻上部葉片蛋白氮含量的植被指數
    楊 杰,田永超,朱 艷,陳青春,姚 霞,曹衛星
    中國農業科學. 2009, 42(8):  2695-2705 .  doi:10.3864/j.issn.0578-1752.2009.08.008
    摘要 ( 917 )   PDF (563KB) ( 746 )   收藏
    相關文章 | 多維度評價

    【目的】闡明水稻頂部4張葉片蛋白氮含量和反射光譜特征的變化規律及其相互關系,建立快速、準確診斷水稻功能葉片蛋白氮含量的方法。【方法】通過3年不同施氮水平和不同品種類型的大田試驗,分生育期同步測定頂部4張葉片的光譜反射率及蛋白氮含量,系統分析葉片蛋白氮含量與多種高光譜參數的定量關系。【結果】水稻葉片蛋白氮含量和光譜反射率在不同施氮水平、不同生育期及不同葉位間均存在明顯差異,葉片蛋白氮含量的敏感波段主要存在于可見光綠光區530~580 nm及紅邊區域695~715 nm,其中紅邊區域表現最為顯著。紅邊區域700 nm附近波段與近紅外短波段的比值組合(SRs)可以有效地估算水稻上部功能葉片的蛋白氮含量,其次是綠光區587 nm左右的波段與近紅外短波段的比值組合。基于新提出的SR(770,700)及已報道的GM-2、SR705、RI-half光譜指數,線性回歸模型的擬合精度(R2)分別達到 0.874,0.873,0.871和0.867。經獨立資料的檢驗表明,這些回歸模型可以實時監測葉片蛋白氮含量變化,預測精度R2分別為0.810、0.806、0.804和0.800,相對誤差RE 分別為12.1%、12.4%、12.6%和12.9%。【結論】可以利用關鍵特征光譜指數來診斷水稻上部葉片的蛋白氮含量狀況,尤以SR(770,700)、GM-2、SR705和RI-half表現為較強的估測能力。

    密穗與疏穗型小麥強、弱勢籽粒淀粉積累及庫強度的比較
    閆素輝,尹燕枰,李文陽,李 勇,隋新霞,顧 峰,梁太波,張體彬,王 平,王振林
    中國農業科學. 2009, 42(8):  2706-2715 .  doi:10.3864/j.issn.0578-1752.2009.08.009
    摘要 ( 1050 )   PDF (404KB) ( 589 )   收藏
    相關文章 | 多維度評價

    【目的】研究小麥強、弱勢籽粒淀粉積累與庫容量、庫活性間的關系及不同穗型間的差異。【方法】以密穗型小麥品種魯麥21、濟麥20和疏穗型小麥品種山農1391、山農12為材料,對籽粒發育過程中強、弱勢粒淀粉積累、胚乳細胞數目及相關酶活性變化進行比較。【結果】兩種類型小麥強勢粒直、支鏈淀粉積累量均高于弱勢粒,密穗型小麥籽粒直、支鏈淀粉積累量在強、弱勢粒間的差異幅度高于疏穗型小麥。Logistic方程擬合籽粒淀粉積累進程表明,強勢粒淀粉積累量較弱勢粒高的原因是其積累啟動時間較早和淀粉積累速率較高;密穗型小麥強、弱勢粒淀粉積累速率的差異幅度較大,是造成其籽粒最終淀粉積累量在強、弱勢粒間的差異幅度大于疏穗型的原因之一。小麥強勢粒胚乳細胞數目顯著高于弱勢粒,與疏穗型小麥相比,密穗型小麥強、弱勢粒胚乳細胞數目的差異幅度較大。4個小麥品種弱勢粒蔗糖含量在灌漿期均高于強勢粒,說明籽粒蔗糖含量即淀粉合成底物的供給并不是造成強、弱勢粒淀粉積累存在差異的限制因子。小麥強勢粒蔗糖合酶(SS)、腺苷二磷酸葡萄糖焦磷酸化酶(AGPP)、可溶性淀粉合酶(SSS)和顆粒結合態淀粉合酶(GBSS)活性均高于弱勢粒,密穗型小麥強、弱勢粒上述酶活性差異幅度均較疏穗型大。【結論】小麥庫容量(胚乳細胞數目)和庫活性(淀粉合成相關酶活性)是制約強、弱勢粒淀粉積累的主要因素。密穗型小麥強、弱勢粒間的胚乳細胞數目和淀粉合成相關酶活性差異較大,這可能是造成密穗型小麥籽粒淀粉積累量在強、弱勢粒間的差異幅度大于疏穗型的原因。

    小麥葉層氮含量估測的最佳高光譜參數研究
    姚 霞,朱 艷,田永超,馮 偉,曹衛星
    中國農業科學. 2009, 42(8):  2716-2725 .  doi:10.3864/j.issn.0578-1752.2009.08.010
    摘要 ( 1213 )   PDF (470KB) ( 689 )   收藏
    相關文章 | 多維度評價

    【目的】作物體內氮素狀況是評價長勢和預測產量的重要指標。小麥植株氮素營養的快速監測和無損診斷對于精確氮素管理具有重要作用。本文旨在通過對高光譜信息的精細分析和信息提取,探索建立小麥葉片氮含量(LNC,leaf nitrogen content)估算的最佳波段、光譜參數及監測模型。【方法】利用連續4年的系統觀測資料,采用精細采樣法,詳細分析350~2 500 nm波段范圍內原始光譜反射率及其一階導數光譜的任意兩兩波段組合而成的主要高光譜指數與小麥冠層葉片氮含量的定量關系。【結果】發現小麥葉片氮含量的最佳波段為位于紅邊的690、691、700和711 nm以及近紅外波段的1 350 nm;基于歸一化光譜指數NDSI(R1350,R700)和NDSI(FD700,FD690)、比值光譜指數RSI(R700,R1350)和RSI(FD691,FD711)、土壤調節光譜指數SASI(R1350,R700)(L=0.09)和SASI(FD700,FD690)(L=-0.01)構建氮含量監測模型,決定系數(R2)分別為0.851和0.857、0.842和0.893、0.860和0.866。利用獨立試驗資料對模型檢驗的結果顯示,模型測試的精度(R2)均大于0.758,RRMSE均小于0.266,尤其是高光譜參數RSI(FD691,FD711)和SASI(FD700,FD690)表現最好。【結論】總體上,利用精細采樣法確定最佳波段,構建植被指數和氮含量監測模型,可顯著提高模型的精確度和可靠性,從而為快速無損診斷小麥葉層的氮素狀況提供新的波段選擇和技術途徑。

    茉莉酸在玉米地上部與地下部系統性誘導防御反應中的作用
    馮遠嬌,王建武,蘇貽娟,駱世明
    中國農業科學. 2009, 42(8):  2726-2735 .  doi:10.3864/j.issn.0578-1752.2009.08.011
    摘要 ( 1110 )   PDF (477KB) ( 996 )   收藏
    相關文章 | 多維度評價

    【目的】研究外源茉莉酸處理玉米地上部(或地下部)是否會系統性地影響到地下部(或地上部)的防御作用,探討對玉米防御反應的影響是否與玉米的茉莉酸信號途徑相關。【方法】以“高油115”玉米為材料,采用化學物質分析和基因表達分析方法,通過茉莉酸合成途徑抑制劑水楊苷異羥肟酸(salicylhydroxamic acid, SHAM)預處理的對比實驗,研究茉莉酸在玉米地上部與地下部誘導防御反應中的作用。【結果】外源茉莉酸處理玉米地上部能系統地影響到地下部防御物質的含量及防御相關基因的表達,處理地下部也能系統性地影響地上部。茉莉酸處理地上部以及茉莉酸處理地下部對玉米葉片防御反應的誘導均強于根系,而茉莉酸處理地上部對玉米同一部位的誘導作用強于茉莉酸處理地下部。茉莉酸處理地上部是通過激活茉莉酸自身合成來誘導葉片Bx1、Bx9、PAL、PR-1、MPI、FPS和TPS基因的表達、增加葉片丁布含量及降低咖啡酸含量的,同時系統誘導根系Bx6、Bx9、PAL和PR-2a基因表達、增加香豆酸和咖啡酸含量以及降低丁香酸含量則與激活地上部茉莉酸自身合成相關。茉莉酸處理玉米地下部對根系Bx6、PR-2a和MPI基因表達的誘導以及總酚含量的降低也是通過激活茉莉酸自身合成來實現的,對地上部(葉片)防御相關基因Bx6、Bx9、PAL、FPS和TPS表達的間接誘導作用以及丁布、香豆酸、咖啡酸和丁香酸的增加作用則與激活地下部茉莉酸自身合成相關。【結論】外源茉莉酸處理地上部能系統影響到地下部的防御反應,反之亦然;茉莉酸對玉米的誘導防御以葉片為主;茉莉酸處理地上部對玉米的誘導作用強于地下部處理;茉莉酸處理玉米的地上部或地下部,對處理部位防御作用的影響主要是通過激活玉米體內茉莉酸自身合成起作用的;茉莉酸處理玉米對非處理部位防御作用的影響則與激活處理部位茉莉酸自身合成相關。

    秸稈還田與實地氮肥管理對直播水稻產量、品質及氮肥利用的影響
    徐國偉,談桂露,王志琴,劉立軍,楊建昌
    中國農業科學. 2009, 42(8):  2736-2746 .  doi:10.3864/j.issn.0578-1752.2009.08.012
    摘要 ( 926 )   PDF (329KB) ( 1306 )   收藏
    相關文章 | 多維度評價

    【目的】探討麥秸稈還田與施氮技術對直播水稻產量、品質的影響及氮肥利用效率的表現。【方法】以直播粳稻揚粳9538為材料進行大田對比試驗,設置麥秸還田與不還田、實地氮肥管理(SSNM)和農民習慣施肥法(FFP)等處理,測定水稻產量、品質及氮肥利用效率。【結果】無論是SSNM還是FFP,與秸稈未還田相比,秸稈還田降低了單位面積穗數,提高了每穗粒數、結實率與千粒重,增加了產量,改善了稻米的外觀品質與蒸煮品質。與FFP相比,SSNM顯著提高水稻產量,降低了稻米蛋白質含量,改善了稻米的食味性。秸稈還田結合SSNM增大了籽粒最大灌漿速率與平均灌漿速率,縮短了活躍灌漿期,增加了粒重,并提高了氮收獲指數、氮肥吸收利用率、氮肥農學利用率、氮肥生理利用率和氮肥偏生產力。【結論】秸稈還田結合SSNM可增加產量,改善稻米品質,提高氮肥利用效率。

    不同耕作方式麥田土壤溫度及其對氣溫的響應特征——土壤溫度特征及熱特性
    陳繼康,張 宇,陳軍勝,陳 阜,張海林
    中國農業科學. 2009, 42(8):  2747-2753 .  doi:10.3864/j.issn.0578-1752.2009.08.013
    摘要 ( 1305 )   PDF (305KB) ( 779 )   收藏
    相關文章 | 多維度評價

    【目的】研究耕作方式對冬小麥田土壤溫度和熱特性的影響規律。【方法】于河北省欒城縣設置翻耕、旋耕和秸稈覆蓋免耕處理,采用熱脈沖-時域反射技術監測2004-2005年冬小麥生育期土壤溫度及熱特性,探討了不同耕作方式下的土壤溫度效應。【結果】耕作方式對土壤溫度主要集中在冬小麥拔節前。相對于其它處理,免耕在氣溫降低階段表現“增溫效應”,在升溫階段表現“降溫效應”,且達到極顯著水平;免耕在播種-分蘗期降低土壤日均溫0.69~1.02℃,推遲了冬小麥出苗2 d、分蘗7 d,縮短了冬前分蘗時間7 d,分蘗活動積溫減少54.12~55.55 ℃?d;免耕越冬期具有較高土壤平均溫度0.02~0.09℃和耕層土壤負積溫0.87~2.25℃?d,但在越冬期穩定通過0℃以上晚7 d,低溫持續時間長2~3 d,并推遲返青2~6 d;免耕完成返青消耗了更多活動積溫21.54~29.15℃,造成拔節推遲5 d;免耕在冬小麥營養生長階段降低累積溫差123.43~148.62℃和日平均溫差1.17~1.42℃。旋耕相對于翻耕推遲了返青4 d,減少活動積溫8.55℃,增加累積溫差25.19℃。不同耕作方式農田土壤容積熱容量、熱導率和熱擴散系數無明顯差異。【結論】從冬小麥生育進程上來說,熱量資源利用效率以翻耕最高、旋耕居中、免耕最低;免耕縮小溫度變化幅度不利于冬小麥生長發育,但有利于冬小麥保苗。免耕表現增降溫效應的主要原因是秸稈覆蓋而不是土壤物理性質的變化。

    植物保護
    稻瘟病菌假定的糖基水解酶62家族初步研究
    周 潔,鄭祥梓,蘭 斕,林成增,林雄杰,魯國東,王宗華
    中國農業科學. 2009, 42(8):  2754-2762 .  doi:10.3864/j.issn.0578-1752.2009.08.014
    摘要 ( 900 )   PDF (897KB) ( 689 )   收藏
    相關文章 | 多維度評價

    【目的】了解糖基水解酶62家族細胞壁降解酶系在稻瘟病菌致病中的作用。【方法】通過生物信息學方法對稻瘟病菌基因組中假定的糖基水解酶62家族成員進行基因結構、蛋白分泌特性及系統發育分析,并對其中一個成員MGG_01403.6進行過量表達、基因敲除分析。【結果】該家族共有8個成員,均具有細胞壁降解酶(糖基水解酶62家族)保守結構域,且均為胞外分泌蛋白;系統發育分析可以將這些成員分別聚類在兩個進化分支中;成員間在不同侵染階段表達模式有差異;MGG_01403.6過量表達和基因敲除均不影響稻瘟病菌的致病性。【結論】糖基水解酶62家族可能存在功能冗余作用,進一步的雙突變或多突變可能是明確這類多基因家族基因功能的重要方法。

    隴南地區小麥條銹菌群體遺傳多樣性SSR分析
    陸寧海,鄭文明,王建鋒,詹剛明,黃麗麗,康振生
    中國農業科學. 2009, 42(8):  2763-2770 .  doi:10.3864/j.issn.0578-1752.2009.08.015
    摘要 ( 905 )   PDF (336KB) ( 955 )   收藏
    相關文章 | 多維度評價

    【目的】甘肅隴南地區是小麥條銹菌最主要和最大的越夏區,本研究的目的是分析該地區的小麥條銹菌自然群體的遺傳結構,探索其分子遺傳變異規律。【方法】采用TP-M13-SSR 熒光標記技術,對甘肅省隴南地區8個種群409個小麥條銹菌分離株基因組DNA進行SSR標記分析。【結果】隴南地區小麥條銹菌的觀察等位基因數(Na)為1.95,有效等位基因數目(Ne)為1.43,Nei's (1973)基因多樣性指數(H)為0.27,Shannon 信息指數(I)為0.41。武都、文縣和秦城種群遺傳多樣性較高,徽縣、成縣和西和種群相對較低。AMOVA分析結果表明,小麥條銹菌群體間和群體內都存在著一定的遺傳分化,群體間的遺傳變異占總變異的12.5%,群體內遺傳變異占87.5%。地區間的基因流Nm =1.83。【結論】隴南地區小麥條銹菌群體遺傳多樣性很豐富,但地區之間有一定的差異;群體遺傳變異主要存在于群體內部,不同地區間存在基因的交流和病原菌的移動。

    小麥白粉病抗病新基因PmHNK的遺傳分析和分子標記定位
    李春鑫,許為鋼,王根松,胡 琳,張 磊,張建周,董海濱
    中國農業科學. 2009, 42(8):  2771-2777 .  doi:10.3864/j.issn.0578-1752.2009.08.016
    摘要 ( 962 )   PDF (415KB) ( 947 )   收藏
    相關文章 | 多維度評價

    【目的】周98165對河南省當前流行白粉菌生理小種具有較好的抗性,并且綜合農藝性狀優良。明確其抗白粉病基因及遺傳特性,篩選與其緊密連鎖的分子標記,為抗白粉病育種提供抗源和理論支撐。【方法】將周 98165與中國春雜交、自交、測交,對雙親及其雜交后代進行苗期鑒定,用小麥白粉病菌08B1進行遺傳分析,利用SSR、EST-SSR技術對雙親及抗感池進行篩選和電泳分析,并結合中國春缺四體材料進行染色體定位。【結果】周98165對3個白粉菌高毒力小種抗性良好,其抗病性受1對顯性核基因控制,將該基因暫命名為PmHNK。篩選了與PmHNK 連鎖的5個微衛星標記,在遺傳圖譜上的順序為Xbarc77、Xgwm547、Xwmc326、Xgwm299、PmHNK、Xgwm108,Xgwm299和Xgwm108分別為PmHNK兩側距離最近的標記,圖距分別為4.2 cM、5.6 cM,最遠標記Xbarc77與PmHNK圖距為10.6 cM,并將PmHNK 定位于3BL。【結論】抗病鑒定、遺傳分析結合分子標記分析結果表明,PmHNK是一個白粉病抗病新基因。

    小麥抗白粉病基因Pm21抗病差異的蛋白質組學研究
    李 強,張衛東,田紀春
    中國農業科學. 2009, 42(8):  2778-2783 .  doi:10.3864/j.issn.0578-1752.2009.08.017
    摘要 ( 1110 )   PDF (409KB) ( 849 )   收藏
    相關文章 | 多維度評價

    【目的】對小麥白粉菌侵染后的葉片進行差異蛋白質組學研究,以期發現抗白粉病基因Pm21轉入后,對抗病機制起重要作用的蛋白。【方法】以對小麥白粉病敏感(百農3217)和對小麥白粉病免疫(W2132-6,攜帶抗病基因Pm21)的2個小麥近等基因系為材料,分別提取2個材料拔節期接種48 h后的葉片蛋白,應用雙向電泳聯合質譜(MALDI-TOF-MS)技術分析Pm21基因轉入后差異蛋白表達。【結果】雙向電泳后,CBB染色,用ImageMasterTM 2D Platinum軟件分析檢測出12個差異蛋白點,經過質譜(MALDI-TOF-MS)分析和數據庫檢索,鑒定出9個蛋白質,其中7個分別與能量代謝、基因調控、防衛和穩定蛋白質相關,參與了增強能量代謝、基因調控、抗氧化、細胞壁加厚和木質化等抗病生理反應。【結論】抗白粉病基因Pm21轉入后,材料對白粉菌侵染響應發生變化,脯氨酸富集蛋白等脅迫反應蛋白得到增量表達,這些蛋白可能與小麥抗白粉病有一定相關性。

    鹿蹄草素對桃褐腐病菌的抑制作用及其抑菌機理
    吳振宇,王 燕,艾啟俊
    中國農業科學. 2009, 42(8):  2784-2792 .  doi:10.3864/j.issn.0578-1752.2009.08.018
    摘要 ( 881 )   PDF (705KB) ( 758 )   收藏
    相關文章 | 多維度評價

    【目的】探討鹿蹄草素對桃褐腐病菌的抑制活性及作用機理。【方法】采用生長速率法和果實接菌的方法測定鹿蹄草素對桃褐腐病菌菌絲體生長的抑制作用;采用倍比稀釋法測定鹿蹄草素最小抑菌濃度(MIC)和最小殺菌濃度(MFC);觀測接上鹿蹄草素和桃褐腐病菌對桃果實多酚氧化酶(PPO)、過氧化物酶(POD)和苯丙氨酸解氨酶(PAL)活性的誘導情況;并用掃描電鏡和透射電鏡觀察鹿蹄草素對桃褐腐病菌超微結構的影響。【結果】鹿蹄草素對桃褐腐病菌有較強的抑制活性,且濃度越高,抑制作用越強,其MIC為0.032 mg?ml-1,MFC為0.156 mg?ml-1;桃果實接上鹿蹄草素+病原菌后,PPO、POD和PAL活性開始升高,并在整個試驗過程中一直保持較高的水平;掃描電鏡下可見,菌絲扭曲變形,菌絲體之間相互粘連,細胞壁破裂,表面出現絮狀凝集物。透射電鏡下可見,細胞壁明顯變薄,細胞內部組成紊亂,細胞結構遭到嚴重的破壞。【結論】鹿蹄草素對桃褐腐病菌具有較強的抗菌作用;可使菌絲體超微結構發生改變。

    牽牛子種子提取物對朱砂葉螨觸殺活性的測定
    王 燕,吳振宇,杜艷麗,師光祿,陳 梅,王海香,王有年
    中國農業科學. 2009, 42(8):  2793-2800 .  doi:10.3864/j.issn.0578-1752.2009.08.019
    摘要 ( 947 )   PDF (646KB) ( 759 )   收藏
    相關文章 | 多維度評價

    【目的】研究牽牛子石油醚提取物中流分8對朱砂葉螨生物活性的作用機理。【方法】采用玻片浸漬法和葉片殘毒法測定了流分8對朱砂葉螨成螨和卵的室內毒力,并采用生化方法測定了谷胱甘肽-S-轉移酶、乙酰膽堿酯酶、單胺氧化酶、Ca2+-ATP酶活性的影響,通過透射電鏡觀察流分8對螨體內亞顯微結構的破壞。【結果】流分8對朱砂葉螨成螨和卵均有很強的生物活性,對成螨和卵的LC50分別是0.4686 mg?ml-1和1.2212 mg?ml-1,LC90分別是2.5935 mg?ml-1和3.1234 mg?ml-1。牽牛子流分8處理朱砂葉螨后,螨體內解毒酶谷胱甘肽-S-轉移酶被激活,這說明流分8中存在對朱砂葉螨有毒的物質;而乙酰膽堿酯酶、單胺氧化酶、Ca2+-ATP酶均受到不同程度的抑制,這可能引起神經傳遞的阻斷,從而導致螨體的死亡。透射電鏡下可見,流分8對螨體內表皮結構、肌纖維、細胞核膜、線粒體、內質網等均有不同程度的破壞。【結論】牽牛子可以有效殺死朱砂葉螨,作為新型植物源農藥具有一定的開發價值。

    土壤肥料·節水灌溉·農業生態環境
    免耕對東北黑土水穩性團聚體中有機碳分配的短期效應
    梁愛珍,楊學明,張曉平,申 艷,時秀煥,范如芹,方華軍
    中國農業科學. 2009, 42(8):  2801-2808 .  doi:10.3864/j.issn.0578-1752.2009.08.020
    摘要 ( 871 )   PDF (511KB) ( 721 )   收藏
    相關文章 | 多維度評價

    【目的】探討免耕措施下黑土總有機碳和水穩性團聚體中有機碳分配的動態變化,以及免耕對團聚體結合碳和總有機碳之間相關關系的影響,為篩選出免耕對黑土結構和質量影響的評價指標提供科學依據。【方法】以在吉林省德惠市中層黑土上進行了5年田間定位試驗的小區土壤為研究對象,對免耕(NT)、秋翻(MP)和壟作(RT)3種耕作處理下耕層(0~30 cm)黑土有機碳和團聚體結合碳的動態變化及其相互關系進行分析。【結果】5年的NT處理并沒有增加耕層有機碳(SOC)平均含量,但顯著增加了表層(0~5 cm)的SOC含量,增加量為2001年的9.9%。NT試驗前后,黑土總有機碳和>1 000 μm級團聚體結合碳變化趨勢一致,總有機碳除在表層(0~5 cm)變化顯著外,其它土層變化均不明顯,但>1 000 μm級團聚體結合碳各層均有顯著變化,說明>1 000 μm級團聚體結合碳對耕作方式的響應較總有機碳更為敏感。相關分析表明,NT處理下黑土總有機碳與>1 000 μm級團聚體結合碳之間存在顯著的正相關關系。【結論】黑土>1 000 μm級團聚體可以用于評價免耕對黑土結構和肥力的短期影響。

    長期定位施肥對土壤養分與作物產量的影響
    林治安,趙秉強,袁 亮,Hwat Bing-So
    中國農業科學. 2009, 42(8):  2809-2819 .  doi:10.3864/j.issn.0578-1752.2009.08.021
    摘要 ( 892 )   PDF (405KB) ( 1136 )   收藏
    相關文章 | 多維度評價

    【目的】研究探討長期施用有機肥、化肥、有機無機結合等不同施肥條件下的作物增產效果與土壤養分演變規律。【方法】以在山東禹城連續22年的長期施肥定位試驗為依據,對歷年土壤養分和作物產量測試結果進行系統總結。試驗采用冬小麥-夏玉米一年二熟栽培制度,分別設置①無肥對照,②常量有機肥無機肥配施,③常量有機肥,④常量化肥,⑤高量有機肥,⑥高量化肥,共6個施肥處理。【結果】在作物產量方面,試驗之初的8~10年間表現為化肥對冬小麥的增產作用優于有機肥,而在夏玉米上則表現出相反結果,有機無機結合處理大部分年份作物產量處于較高水平;隨著試驗時間的延長,各施肥處理產量逐漸趨于一致;22年間土壤有機質含量始終表現出隨有機肥施用量的增加而增高,且有逐年增長之趨勢;化肥在提高土壤有機質、全氮等營養方面受生物產量和根茬殘留量影響而與施肥量無明顯關系,增施化肥可以迅速提高速效養分含量,并在一定水平上保持相對穩定。【結論】長期施用有機肥與化肥均表現出持續提高作物產量的良好作用,且二者效果不相上下,常規栽培條件下,當產量提高到一定水平后,繼續高量施肥無助于作物產量的提高;有機肥與化肥均表現出持續提高土壤有機碳、氮含量之作用,有機肥效果明顯優于化肥,且表現出隨有機肥用量的增加而增加。而繼續提高化肥施用量無助于土壤有機碳、有機氮的積累;一向被認為鉀素含量的黃淮海平原土壤在連續施用氮磷化肥5~8年左右作物即表現明顯缺鉀現象,由此揭示出高產條件下氮磷鉀平衡施肥的重要作用;在對提高土壤速效養分效果方面的差異表現在,化肥可以迅速提高速效養分含量并在這一水平上保持相對穩定,而有機肥則具有持續提高土壤速效養分含量的作用。

    長期定位施肥對棕壤有機氮組分及剖面分布的影響
    高曉寧,韓曉日,劉 寧,左仁輝,吳正超,楊勁峰
    中國農業科學. 2009, 42(8):  2820-2827 .  doi:10.3864/j.issn.0578-1752.2009.08.022
    摘要 ( 942 )   PDF (400KB) ( 701 )   收藏
    相關文章 | 多維度評價

    【目的】揭示施肥對土壤供氮潛力的影響。【方法】以土壤有機氮作為土壤肥力的重要指標采用Bremner法對棕壤29年長期定位試驗的有機氮組成進行分級。【結果】單施化肥處理對耕層土壤有機氮含量及其組成無明顯影響;有機肥和化肥配施,耕層土壤各形態酸解有機氮的含量都有不同程度的提高,其中氨基酸態氮的增加最為明顯。在不同施肥處理中的順序是氨基酸態氮>非酸解態氮>酸解氨態氮>酸解未知態氮>氨基糖態氮。各形態有機氮的剖面分布相似,含量均隨土層的加深而降低。不同處理對有機氮各組分含量變化的作用表現為有機無機配施處理>單施有機肥處理>單施化肥處理、不施肥處理。【結論】長期有機無機肥配施顯著提高了土壤的供氮潛力,是維持土壤肥力最優的施肥方式。

    縣域農田土壤銅含量的協同克里格插值及采樣數量優化
    龐 夙,李廷軒,王永東,余海英
    中國農業科學. 2009, 42(8):  2828-2836 .  doi:10.3864/j.issn.0578-1752.2009.08.023
    摘要 ( 921 )   PDF (1940KB) ( 764 )   收藏
    相關文章 | 多維度評價

    【目的】研究縣域農田土壤銅含量的空間分布和采樣數量,為農田土壤環境質量調查提供幫助。【方法】采用協同克里格方法,以初始的623個土壤銅含量數據及在此基礎上隨機抽取的560、498和432個數據為目標變量,并以初始的623個土壤有機質含量數據為輔助變量,對四川省雙流縣農田土壤銅含量進行插值分析,并對不同樣點數量下協同克里格法在縣域尺度農田土壤銅含量空間分布研究中的適用性進行評價。【結果】相同取樣數量下,協同克里格法的均方根誤差相對于普通克里格法可降低0.9%~7.77%,預測值和實測值之間的相關系數可提高1.76%至9.76%。利用協同克里格法,在土壤銅含量數據量縮減10%的情況下,其估值精度仍高于初始的623個土壤銅含量數據的普通克里格估值,且二者的分布圖具有高度相似性。【結論】協同克里格作為一種更為精確和經濟的方法,可為縣域尺度農田土壤重金屬含量的空間分布研究提供更多的信息和幫助。

    京郊地區3種典型農田系統硝酸鹽污染現狀調查
    杜連鳳,趙同科,張成軍,安志裝,吳 瓊,劉寶存,李 鵬,馬茂亭
    中國農業科學. 2009, 42(8):  2837-2843 .  doi:10.3864/j.issn.0578-1752.2009.08.024
    摘要 ( 1068 )   PDF (327KB) ( 652 )   收藏
    相關文章 | 多維度評價

    【目的】研究北京市3種典型的農田系統(糧田、菜田和果園)土壤氮素累積、蔬菜和地下水硝酸鹽污染狀況。【方法】采用調查研究方法,采集不同類型農田土壤、蔬菜和地下水樣品,并對樣品屬性進行翔實記錄,根據測試結果和記錄進行分析。【結果】土壤氮素累積嚴重,菜田0~30 cm土層土壤硝態氮含量平均為46.2 mg?kg-1,是糧田的3.8倍;果園0~30 cm土層土壤硝態氮含量是糧田的1.2倍。菜田地下水硝態氮含量平均為13.8 mg?kg-1,是糧田地下水的2.8倍,地下水硝酸鹽含量超標率為44.8%,是糧田地下水超標率的3.3倍。果園地下水硝酸鹽含量為9.3 mg?kg-1,是糧田地下水的1.9倍,地下水超標率為23.5%,是糧田的1.7倍。蔬菜硝酸鹽污染嚴重,綠葉菜類蔬菜硝酸鹽含量最高,為2 685.5 mg?kg-1,其次是根莖類、白菜類、果菜類。根莖類、綠葉菜類、瓜果類和白菜類超標率分別為80.9%、37.9%、29.7%和2.2%。【結論】土壤、植株和地下水硝酸鹽含量與氮肥施用量直接相關,菜田和果園施肥量大,其土壤硝酸鹽累積明顯,地下水硝酸鹽超標率高,蔬菜硝酸鹽含量超標嚴重。

    園藝
    分根交替不同灌水量對蘋果生長和葉片生理特性的影響
    魏欽平,劉松忠,王小偉,張 強,劉 軍,丁三姐
    中國農業科學. 2009, 42(8):  2844-2851 .  doi:10.3864/j.issn.0578-1752.2009.08.025
    摘要 ( 865 )   PDF (384KB) ( 804 )   收藏
    相關文章 | 多維度評價

    【目的】在確保蘋果樹體正常生長情況下,探討不同根區體積灌水及灌溉量對樹體生長和葉片生理特性的影響,以期提高水分利用效率,節約灌溉水。【方法】以3年生盆栽分根皇家嘎拉蘋果為試材,研究根系分區交替灌溉不同水量對蘋果樹體生長和葉片生理特性的影響。【結果】1/4和2/4根區體積灌水顯著抑制了蘋果新梢和干周生長,隨灌溉體積增加抑制作用逐漸解除,減少灌水量也顯著抑制了新梢生長。根系分區交替灌水顯著影響蘋果葉片水勢和氣孔阻力,1/4和2/4根區體積灌水處理葉片水勢顯著低于3/4和4/4處理,氣孔阻力隨灌水體積增加顯著降低。減少根區灌水部位降低了蘋果葉光合速率、蒸騰作用和氣孔導度,并且蒸騰作用降低的幅度顯著大于光合作用的,從而提高了葉片水分利用效率。但減少灌水量對蘋果葉片各項生理指標均沒有影響。不同生長期根區交替灌水處理對葉片光合速率、蒸騰速率、氣孔導度和水分利用效率的影響一致,以春梢停長期各生理特性指標最高。【結論】灌水量是影響新梢伸長生長和主干加粗生長的主要因子,葉片生理特性主要受灌水部位調控。通過調控灌水量和根區灌水部位可以調控樹體生長,并能節約灌水量。本試驗中,在沒有考慮自然降水的情況下,為保證植株的正常生長,根區灌溉體積不能小于50%。

    柑橘栽培品種(系)DNA指紋圖譜庫的構建
    雷天剛,何永睿,吳 鑫,姚利曉,彭愛紅,許蘭珍,劉小豐,陳善春
    中國農業科學. 2009, 42(8):  2852-2861 .  doi:10.3864/j.issn.0578-1752.2009.08.026
    摘要 ( 1020 )   PDF (506KB) ( 1342 )   收藏
    相關文章 | 多維度評價

    【目的】構建柑橘栽培品種(系)的DNA指紋圖譜數據庫,為建立柑橘種苗純度及真實性鑒定技術體系和技術規范奠定基礎。【方法】利用SSR標記和ISSR標記對102個柑橘栽培品種(系)進行DNA指紋分析,篩選適合的特征引物,構建柑橘栽培品種(系)的指紋圖譜數據庫。【結果】從200對SSR引物中篩選到重復性好、多態性豐富的12對引物作為柑橘品種(系)鑒定的特征引物,12對SSR特征引物組合可鑒別42個品種(系);在此基礎上,對未出現SSR特征指紋的60個品種(系)進行ISSR指紋分析,從40個ISSR引物中篩選到2個可用于品種鑒定的特征引物,結合SSR標記,可快速、準確地鑒別70個柑橘的品種(系)。并利用這12對SSR特征引物和2個ISSR特征引物構建了70個柑橘栽培品種(系)的DNA特征指紋圖譜數據庫。【結論】SSR和ISSR標記適于構建柑橘栽培品種DNA指紋圖譜庫;指紋圖譜庫的建立為柑橘種苗純度及真實性鑒定奠定了基礎。

    生物技術與葡萄遺傳育種
    王軍
    中國農業科學. 2009, 42(8):  2862-2874 .  doi:10.3864/j.issn.0578-1752.2009.08.027
    摘要 ( 1086 )   PDF (357KB) ( 1095 )   收藏
    相關文章 | 多維度評價

    生物技術的發展和應用已滲透到葡萄遺傳育種的各個領域。DNA分子標記為研究葡萄品種起源和育成新品種提供了強有力的工具,特別是SSR標記在葡萄品種鑒別、系譜分析和遺傳圖譜構建方面已得到廣泛應用。基于DNA分子標記遺傳圖的構建加速了雜種的早期選擇,遺傳圖和物理圖的結合可以克隆控制重要性狀的功能基因,遺傳轉化技術的應用可以改良現有的葡萄品種。因此,生物技術正深刻改變著傳統的葡萄育種方法。

    密集烘烤定色期煙葉類胡蘿卜素降解及相關酶活性變化
    宋朝鵬,高 遠,武圣江,許自成,宮長榮,張衛建
    中國農業科學. 2009, 42(8):  2875-2881 .  doi:10.3864/j.issn.0578-1752.2009.08.028
    摘要 ( 882 )   PDF (323KB) ( 768 )   收藏
    相關文章 | 多維度評價

    【目的】研究密集烘烤定色階段烤煙類胡蘿卜素降解及相關酶活性的變化,為密集烤房烘烤工藝優化和完善提供理論依據。【方法】采用河南農業大學設計的電熱式溫濕自控密集烤煙箱,按照低溫中濕變黃、中濕定色烘烤工藝,對比研究定色期不同升溫速度對類胡蘿卜素各組分含量變化及相關酶活性的影響。【結果】類胡蘿卜素含量隨烘烤過程推進逐漸降低,慢速升溫烘烤(T1)類胡蘿卜素各組分(β-胡蘿卜素、葉黃素、新黃質、紫黃質)降解量相對較大,比快速升溫烘烤(T2)分別高10 %、2 %、32 %和32 %,但處理間差異不顯著(P>0.05)。烘烤條件對酶活性影響顯著,并且脂氧合酶(LOX)、苯丙氨酸解氨酶(PAL)、多酚氧化酶(PPO)、過氧化物酶(POD)對煙葉烘烤質量的影響是雙向的,定色前期相對較高的酶活性有利于生成更多的香氣前體物質。【結論】慢速升溫定色能很好地調控各種酶活性的變化,使細胞氧化還原反應達到一種動態平衡,使類胡蘿卜素充分降解,又能避免酶促棕色化反應的發生,為進一步改善煙葉品質和優化密集烤房增香工藝提供參考。

    馬拉巴栗種子發育中可溶性糖變化與種子脫水耐性的關系
    李永紅,馬穎敏,許柏球,趙梁軍
    中國農業科學. 2009, 42(8):  2882-2891 .  doi:10.3864/j.issn.0578-1752.2009.08.029
    摘要 ( 913 )   PDF (373KB) ( 573 )   收藏
    相關文章 | 多維度評價

    【目的】探索馬拉巴栗種子在發育過程中脫水耐性的形成與可溶性糖之間的關系。【方法】以不同發育階段的馬拉巴栗種子和離體胚為試材,觀測種子發育過程中可溶性糖組分和含量以及種子和離體胚的脫水耐性變化。【結果】開花后30~70 d是種子最快膨脹期,花后50 d開始形成脫水耐性,50~70 d種子脫水耐性逐漸增強,70 d種子脫水耐性最強,80 d脫水耐性轉而下降,完全成熟時(90 d)再輕微上升,其脫水耐性的強弱順序為:70 d>90 d>80 d>60 d>50 d,離體胚的脫水耐性與種子的情況相似,其脫水耐性順序為:70 d>80 d>90 d>60 d>50 d>40 d。在種子發育過程中,初期果糖、半乳糖、葡萄糖含量較高,隨后呈下降趨勢,蔗糖和麥芽糖含量從開花40 d后急劇增加,寡糖(棉籽糖和水蘇糖)在花后50 d形成,并一直保持較高含量,其中,蔗糖和水蘇糖含量最高值出現在開花后70 d。在種子發育中,還原性糖與非還原性糖的比例一直下降,90 d時兩者比值達到最低,此時寡糖含量也略有下降,寡糖/蔗糖比值達到最高,推測80 d后種子可能由發育狀態轉入萌發狀態。【結論】馬拉巴栗種子脫水耐性與種子發育時期有關,棉籽糖和水蘇糖是影響種子脫水耐性形成的重要因子,種子脫水耐性強弱與棉籽糖和水蘇糖等非還原性糖的含量及還原性糖/非還原性糖比值密切關聯。

    貯藏·保鮮·加工
    甘薯sporamin蛋白對3T3-L1前脂肪細胞分化和增殖的影響
    熊志冬,李鵬高,鄧 樂,唐玉平,木泰華
    中國農業科學. 2009, 42(8):  2892-2898 .  doi:10.3864/j.issn.0578-1752.2009.08.030
    摘要 ( 914 )   PDF (503KB) ( 1141 )   收藏
    相關文章 | 多維度評價

    【目的】探討甘薯sporamin蛋白對3T3-L1前脂肪細胞分化與增殖的影響,為開發預防和治療肥胖、糖尿病的保健食品提供理論依據。【方法】采用硫酸銨沉淀、離子交換、凝膠過濾層析的方法對‘55-2’甘薯中的sporamin蛋白進行分離純化。然后,以黃連素為陽性對照,用不同濃度sporamin(0、0.025、0.125、0.250、0.500、1.000 mg?ml-1)處理3T3-L1前脂肪細胞。采用油紅O染色和比色定量檢測細胞內脂肪生成及細胞分化程度,以MTT法檢測細胞的增殖。【結果】經離子交換、凝膠層析可純化出高純度的sporamin蛋白A和B(相對分子量分別為31 kD和22 kD)。與空白相比,用不同濃度的sporamin蛋白處理后,3T3-L1前脂肪細胞的分化受到明顯抑制。當sporamin蛋白濃度增至0.500 mg?ml-1時,脂滴生成量明顯減少,洗脫液吸光度值降至最低為0.35(P<0.05)。此外,高濃度的sporamin蛋白能有效地抑制3T3-L1前脂肪細胞的增殖,且隨著處理時間延長抑制效果更加明顯(P<0.05).【結論】甘薯sporamin蛋白能抑制3T3-L1前脂肪細胞的分化和增殖,具有潛在的減肥作用。

    類黃酮及茶兒茶素生物合成途徑及其調控研究進展
    夏濤,高麗萍
    中國農業科學. 2009, 42(8):  2899-2908 .  doi:10.3864/j.issn.0578-1752.2009.08.031
    摘要 ( 907 )   PDF (324KB) ( 2201 )   收藏
    相關文章 | 多維度評價

    類黃酮化合物是植物的次生代謝產物,廣泛分布于植物界且具有較強的生物活性。兒茶素是主要的類黃酮化合物之一,其含量占茶樹鮮葉干重的12%~25%。作為茶葉的主要風味物質,兒茶素還具有抗氧化、抗誘變與防癌、抗心血管疾病、抗紫外線輻射等功能。本文從類黃酮及茶兒茶素的生物合成途徑、組織化學定位、合成調控措施等方面,綜述有關茶樹兒茶素的生物合成代謝及其調控的研究進展,旨在為茶兒茶素生物合成的基因調控、代謝工程提供新的思路。

    畜牧·資源昆蟲
    日糧鈷銅比例對肉用綿羊維生素B12營養狀況及養分代謝的影響
    王潤蓮,張 微,朱曉萍,賈志海
    中國農業科學. 2009, 42(8):  2909-2914 .  doi:10.3864/j.issn.0578-1752.2009.08.032
    摘要 ( 959 )   PDF (274KB) ( 595 )   收藏
    相關文章 | 多維度評價

    【目的】研究不同比例的日糧鈷銅對肉用綿羊維生素B12營養狀況及營養物質消化代謝的影響。【方法】選取20只健康、體重相近(22.9±0.8)kg的小尾寒羊×無角陶賽特雜交一代羯羊,隨機分為5組,定量飼喂5種不同日糧,即對照組日糧、4種不同比例的鈷銅(0.3﹕10、0.3﹕20、0.6﹕10和0.6﹕20)日糧,試驗期8周,試驗中期進行消化代謝試驗,同時每兩周采血樣,用電化學發光法、氣相色譜法及熒光偏振免疫法測定血漿維生素B12及葉酸含量、甲基丙二酸和同型半胱胺含量。【結果】肉羊日糧添加不同比例的鈷銅,血液維生素B12的含量隨飼喂時間的延長而增加,6周后趨于穩定。鈷水平較高的后兩組顯著高于其它3組(P<0.01),血液維生素B12含量主要取決于鈷的攝入量,鈷和銅無協同效應。血漿甲基丙二酸和血糖含量隨日糧鈷銅比例增加而呈下降和上升趨勢,同型半胱胺水平無變化,葉酸含量在0.6﹕20 mg?kg-1鈷銅添加組顯著升高(P<0.05)。鈷和銅的添加比例對DM、OM、CP、NFE表觀消化率及氮代謝無影響(P>0.05),而配比為0.3﹕20時顯著促進脂肪和纖維的消化(P<0.01)。【結論】肉羊日糧中鈷和銅的添加比例對維生素B12營養狀況無影響,但適宜配比有利于營養物質的消化代謝。

    徐淮白山羊瘤胃細菌和原蟲的類群結構研究
    王夢芝,王洪榮,徐愛秋,張 潔,陳旭偉
    中國農業科學. 2009, 42(8):  2915-2922 .  doi:10.3864/j.issn.0578-1752.2009.08.033
    摘要 ( 1053 )   PDF (350KB) ( 792 )   收藏
    相關文章 | 多維度評價

    【目的】研究以稻草為主的日糧條件下徐淮白山羊瘤胃細菌和原蟲的類群結構。【方法】以4只安裝瘤胃瘺管的徐淮山羊為試驗動物,PCR擴增瘤胃細菌16S rDNA序列,利用分子克隆與測序分析、細胞計數等技術,解析瘤胃細菌和原蟲群體的類群組成。【結果】獲得的細菌克隆基本歸為兩簇:與瘤胃球菌R.bromii YE282相似性為95%的XHGR1、與瘤胃R-7菌相似性為98%的XHGR3,XHGR2位于另立的R. flavefaciens簇。瘤胃球菌屬細菌占細菌克隆總數的比例較高(33.33%),原蟲生物量略低于細菌,占瘤胃生物總量的44.83%。群體主要有內毛屬、雙毛亞科、前毛屬、頭毛屬和等毛科等原蟲,其中內毛屬原蟲比例最高為74.25%。【結論】以稻草為主的日糧條件下,徐淮白山羊瘤胃中細菌和原蟲生物量相近,瘤胃球菌屬細菌和內毛屬原蟲分別是瘤胃細菌和原蟲區系的優勢類群。

    納米硒對性成熟前雄性波爾山羊生殖機能發育的影響
    楊茹潔,施力光,岳文斌,荀文娟,張春香,任有蛇,趙平偉,雷曉峰
    中國農業科學. 2009, 42(8):  2923-2929 .  doi:10.3864/j.issn.0578-1752.2009.08.034
    摘要 ( 1154 )   PDF (566KB) ( 663 )   收藏
    相關文章 | 多維度評價

    【目的】研究日糧添加納米硒對斷奶雄性山羊性成熟過程中生殖機能的影響。【方法】選用2月齡斷奶、體重一致的波爾山羊公羔羊20只,隨機分成2組,對照組飼喂基礎日糧,處理組飼喂基礎日糧+納米硒(硒含量0.3 mg?kg-1),預飼10 d,試驗期90 d,每30 d采血分離血清測定FSH、LH和T濃度,分離睪丸測定睪丸硒濃度和GSH-Px活性,同時制作常規石蠟切片觀察睪丸組織結構。試驗結束時采集精液分析精液品質,分離精子,透射電鏡觀察精子超微結構。【結果】納米硒可促進睪丸曲精細管和間質組織及間質細胞發育,維持曲精細管中生殖細胞的發生、分化及分裂;日糧補充納米硒極顯著增加睪丸硒沉積、提高睪丸GSH-Px活性(P<0.01);30~60 d階段納米硒不影響血清生殖激素水平(P>0.05),0~90 d階段FSH、LH和T顯著升高;納米硒對射精量和精子密度無影響,精子活力增加10%,畸形精子數目降低27%。透射電鏡觀察精子超微結構,對照組精子尾部中段線粒體結構改變,排列疏松。【結論】納米硒顯著影響性成熟前公羔羊睪丸的發育,增加精子活力,降低畸形精子數,對血清生殖激素水平有一定影響。

    藏綿羊基因OLA-DQA2第2外顯子多態性分析
    劉 秀,胡 江,羅玉柱
    中國農業科學. 2009, 42(8):  2930-2936 .  doi:10.3864/j.issn.0578-1752.2009.08.035
    摘要 ( 942 )   PDF (602KB) ( 650 )   收藏
    相關文章 | 多維度評價

    【目的】針對藏綿羊腐蹄病所帶來的死亡現象,選擇與該病相關的基因OLA-DQA2為研究對象,分析群體中該基因的遺傳多態性及變異特征,為進一步尋求抗病分子育種提供依據。【方法】采用PCR-SSCP檢測216只表型正常和患病藏綿羊OLA-DQA2基因第2外顯子的多態性,克隆、測序群體內變異產生的各等位基因序列,構建系統發育樹以明確藏綿羊OLA-DQA2基因等位基因之間的遺傳關系。【結果】藏綿羊DQA2基因第2外顯子中表現了15個基因型。發現藏綿羊群體中OLA-DQA2基因第2外顯子有8個新等位基因,分別命名為OLA-DQA2*H、*I、*J、*K、*L、*M、*N和*O,使綿羊基因庫中該座位的等位基因數量從23個增加到31個。序列分析中發現71個核苷酸多態位點,這些多態位點主要由點突變形成,其中轉換39個(占54.9%),顛換23個(占32.4%)。【結論】藏綿羊DQA2基因第2外顯子具有豐富的遺傳多態性,群體中可能蘊藏著更多的抗性遺傳資源。

    家雞冠型性狀的微衛星標記連鎖分析
    梁 杜,王金富,李 巖,趙 潔,張成先,趙 燕,廖和榮
    中國農業科學. 2009, 42(8):  2937-2942 .  doi:10.3864/j.issn.0578-1752.2009.08.036
    摘要 ( 887 )   PDF (333KB) ( 646 )   收藏
    相關文章 | 多維度評價

    【目的】構建具有冠型性狀記錄的雞F2資源群的2號染色體連鎖圖譜,并結合表型分析對調控雞冠型性狀的基因進行初步定位。【方法】通過測交選擇豆冠冠型基因型純合的吐魯番斗公雞2只和玫瑰冠冠型基因型純合的玫瑰冠母雞6只為親本,采用F2代試驗設計建立F2代資源群436只,參考EL(East Lansing)家系的遺傳連鎖圖譜,在雞2號染色體上篩選14對微衛星標記,運用MapMaker/EXP3.0軟件初步構建此家系2號染色體遺傳連鎖圖譜,同時運用LOD記分法進行雞的冠型基因連鎖分析。【結果】經χ2檢驗,F2資源群冠型分化比例符合經典孟德爾遺傳學的獨立分離規律。在連鎖分析中除MCW0157外,其余13個微衛星標記均能連鎖,所構建的雞2號染色體連鎖圖譜與EL家系的遺傳連鎖圖譜相似。【結論】雞2號染色體上MCW0082位點與玫瑰冠冠型基因可能存在連鎖。

    西方蜜蜂(Apis mellifera L.)sRNA的富集與文庫檢測
    陳 璇,俞曉敏,鄭火青,蔡亦梅,胡福良
    中國農業科學. 2009, 42(8):  2943-2948 .  doi:10.3864/j.issn.0578-1752.2009.08.037
    摘要 ( 1109 )   PDF (394KB) ( 598 )   收藏
    相關文章 | 多維度評價

    【目的】提取及擴增蜜蜂(Apis mellifera L)sRNA,并構建文庫檢測富集結果是否滿足高通量測序研究要求。【方法】取蜜蜂3個級型不同發育階段個體作為材料,分別提取總RNA后混合,從中分離出15~40nt的sRNA,反轉成cDNA后構建文庫,進行藍白斑篩選。挑選288個單克隆進行測序,對測序結果進行分析。【結果】有效序列為214條,插入的cDNA片段大小范圍為15~39 bp。其中,sme-miR-71c miRNA 65條,ncRNA(包括tm-RNA、intron_ghI、5.8s rRNA)5條,tRNA 28條,siRNA及其他sRNA 33條, CDS 1條,未知序列82條。【結論】本實驗采用的方法能有效富集蜜蜂sRNA,能夠滿足高通量測序從中識別出蜜蜂miRNA的研究。

    獸醫
    2007年中國部分地區豬圓環病毒2型分子流行病學分析
    張建武,莊金山,劉長龍,王小敏,袁世山
    中國農業科學. 2009, 42(8):  2949-2957 .  doi:10.3864/j.issn.0578-1752.2009.08.038
    摘要 ( 864 )   PDF (441KB) ( 574 )   收藏
    相關文章 | 多維度評價

    【目的】對采集自上海、江西、山東、江蘇、河南和湖南等省的257份進行了PCV2的檢測,確定中國PCV2感染情況及分子特征。【目的】設計一對針對PCV2 ORF2的引物,利用PCR對其進行PCV2基因組的檢測,對PCV2陽性的樣品,進行了ORF2的克隆、序列測定和分析。【結果】結果顯示PCV2陽性率為24.51%(63/257),并能從健康豬群中檢測的陽性;各PCV2分離株間ORF2核苷酸序列同源性為84.4%~100%,氨基酸同源性為82.5%~100%,與所屬群的不同而不同。【結論】中國有2個群的PCV2毒株在流行,以PCV2b群為主(70.97%,22/31),但也有PCV2a群毒株(29.03%,9/31)的流行,同時PCV2流行的基因型沒有明顯的地域間差異。部分毒株符合高致病性PCV2的特征,暗示中國已存在高致病性PCV2的流行。

    雞、鴿、虎呼吸道和消化道黏膜上皮細胞表面流感病毒受體類型的檢測
    馬 明,劉月煥,陳明勇,韓春華,林 健
    中國農業科學. 2009, 42(8):  2958-2965 .  doi:10.3864/j.issn.0578-1752.2009.08.039
    摘要 ( 912 )   PDF (731KB) ( 739 )   收藏
    相關文章 | 多維度評價

    【目的】檢測雞、鴿和虎體內的流感病毒受體的類型和分布,以期解釋3種動物對禽流感病毒易感性差異的機制。【方法】使用地高辛標記的外源性凝集素染色方法檢測這些動物的喉頭、氣管、肺臟和腸道(直腸)的上皮細胞表面SAα2,6Gal和SAα2,3Gal連接鍵的類型。【結果】SPF雞的上呼吸道黏膜上皮細胞表面有大量的SAα2,3Gal和少量的SAα2,6Gal;肺房上皮細胞表面只有SAα2,3Gal;而直腸黏膜上皮中SAα2,6Gal和SAα2,3Gal都沒有表達。成年鴿的上呼吸道黏膜上皮細胞表面只有SAα2,6Gal,而沒有SAα2,3Gal;而下呼吸道中SAα2,6Gal和SAα2,3Gal都沒有;直腸黏膜上皮細胞只有SAα2,3Gal。虎的呼吸道和消化道(直腸)黏膜上皮細胞表面有大量的SAα2,6Gal和SAα2,3Gal。【結論】雞和虎具有禽流感病毒受體,對禽流感病毒易感,鴿不具備禽流感病毒受體,因此,鴿對禽流感病毒不易感。

    雞源腸桿菌質粒介導喹諾酮類耐藥基因檢測
    岳 磊,蔣紅霞,劉健華,廖曉萍,李樹娟,陳雪影,吳彩霞,張小云,劉雅紅
    中國農業科學. 2009, 42(8):  2966-2971 .  doi:10.3864/j.issn.0578-1752.2009.08.040
    摘要 ( 1115 )   PDF (362KB) ( 688 )   收藏
    相關文章 | 多維度評價

    【目的】對廣東地區分離得到的雞源腸桿菌進行質粒介導喹諾酮類耐藥(PMQR)基因檢測。【方法】采用紙片擴散法對84株雞源腸桿菌臨床分離株進行27種抗菌藥物的敏感性測定。通過PCR檢測質PMQR基因qnr、qepA和aac(6′)-Ib-cr。研究PMQR基因陽性菌株染色體gyrA、gyrB、parC、parE基因喹諾酮耐藥決定突變區(QRDRs)的變異情況。【結果】84株雞源腸桿菌對獸醫臨床常用的恩諾沙星、氟羅沙星、氨芐西林、復方新諾明、強力霉素以及利福平、鏈霉素、羅紅霉素的耐藥率很高,且為多重耐藥;對氨芐西林/舒巴坦、氨曲南、多粘菌素E和頭孢氨芐的敏感性高。在84株雞源腸桿菌中檢測到1株同時攜帶qnrB和aac(6′)-Ib-cr基因的肺炎克雷伯氏桿菌GDK05,整個qnrB基因的閱讀框架與GenBankTM中的qnrB6一致,同時GDK05在gyrA基因的QRDR出現83位S→I變異,gyrB、parC、parE基因的QRDRs沒有檢測到變異。【結論】廣東地區集約化養殖場雞源腸桿菌對獸醫臨床常用抗菌藥物耐藥嚴重。本研究首次在獸醫臨床上檢測到1株同時攜帶qnrB6和aac(6′)-Ib-cr基因的雞源肺炎克雷伯氏菌。PMQR機制的出現預示著喹諾酮類耐藥很可能會在獸醫臨床上更加快速而廣泛地傳播。

    同源重組敲除MSTN基因的豬胎兒成纖維細胞的構建
    李景芬,于 浩,袁 野,劉 娣
    中國農業科學. 2009, 42(8):  2972-2977 .  doi:10.3864/j.issn.0578-1752.2009.08.041
    摘要 ( 1011 )   PDF (483KB) ( 658 )   收藏
    相關文章 | 多維度評價

    【目的】獲得敲除肌肉生長抑制素(MSTN)基因的豬胎兒成纖維細胞。【方法】打靶載體的構建:以Neo為正篩選基因、HSV-tk為負篩選基因。在Neo的兩側分別插入同源長臂和同源短臂。同源長臂5 382 bp,包含MSTN基因的部分5′端,全部的exon1,intron1和exon2及大部分intron2;同源短臂844 bp,包含部分exon3及3′端的部分序列。取35 d胎齡的大白豬,用胰酶消化法,分離胎兒成纖維細胞并對其進行培養和建系。采用脂質體法將打靶載體導入胎兒成纖維細胞中,轉染后的細胞采用250 μg?ml-1 G418篩選7 d,再用200 μg?ml-1 G418+2μmol?L-1 GANC維持篩選。用RT-PCR法檢測轉染前轉染后細胞MSTN基因表達量。【結果】成功構建了對豬MSTN基因部分intron2和exon3區域進行敲除的替代型打靶載體。共得到5個具有藥物抗性的細胞克隆,經PCR檢測,其中一個細胞克隆發生了正確的同源重組。轉染后細胞MSTN基因表達量明顯降低。【結論】獲得了敲除MSTN基因的豬胎兒成纖維細胞。

    研究簡報
    隱性單基因br-2玉米矮生系的選育
    何川,鄭祖平,謝樹果,李 鐘,劉代惠
    中國農業科學. 2009, 42(8):  2978-2981 .  doi:10.3864/j.issn.0578-1752.2009.08.042
    摘要 ( 859 )   PDF (281KB) ( 648 )   收藏
    相關文章 | 多維度評價

    【目的】研究單基因br-2玉米矮源導入熱帶血緣選育矮生玉米自交系的效果。【方法】利用玉米br-2基因的致矮特性,根據基因重組的原理,通過導入熱帶血緣進行回交選擇。【結果】選育出配合力高的單基因br-2矮生系南381、南387,組配的玉米雜交種南玉8號和隆單9號先后通過四川省審定,正在中國南方大面積推廣應用。【結論】利用隱性矮生基因導入熱帶血緣,使抗病、抗倒、窄葉片等優良基因與br-2基因良好結合,克服了矮生自交系節間短、葉寬重疊密集、授粉不良等缺點,在玉米育種研究上具有一定的應用前景。

    局部根區灌溉對棉花主要生理生態特性的影響
    潘麗萍,李 彥,唐立松
    中國農業科學. 2009, 42(8):  2982-2986 .  doi:10.3864/j.issn.0578-1752.2009.08.043
    摘要 ( 896 )   PDF (295KB) ( 639 )   收藏
    相關文章 | 多維度評價
    【目的】探討局部根區不同灌溉模式對棉花主要生理生態特性的影響。【方法】以盆栽棉花為試驗材料,比較分根交替灌溉(APRI)、分根固定灌溉(FPRI)和常規灌溉(CK)下,棉花的生長、光合產物分配及相關生理響應。【結果】當灌溉量減少50%時,APRI處理的總生物量僅比CK降低10%左右,而FPRI則降低23%。不同處理的根系總量雖無差別,但APRI和CK處理的吸收根干重明顯高于FPRI;APRI的根系分布與CK基本一致,FPRI處理未灌溉一側的吸收根數量則顯著低于灌溉一側。分根灌溉條件下,棉株的葉片與木質部汁液ABA濃度大幅增加,調控氣孔運動,減少蒸騰耗水。【結論】分根交替灌水能刺激棉株吸收根生長,有效調節同化產物在根冠間的比例和分配,是一種切實可行的節水灌溉方式。
    京白梨果實后熟軟化過程中細胞壁代謝及其調控
    魏建梅,馬鋒旺,關軍鋒,袁軍偉,朱向秋
    中國農業科學. 2009, 42(8):  2987-2996 .  doi:10.3864/j.issn.0578-1752.2009.08.044
    摘要 ( 892 )   PDF (436KB) ( 1037 )   收藏
    相關文章 | 多維度評價

    【目的】探討細胞壁代謝與‘京白梨’果實軟化的關系及其調控,為解決果實品質下降及迅速軟化問題提供依據。【方法】用0℃、1-甲基環丙烯(1-MCP)和乙烯利處理‘京白梨’果實,測定細胞壁組分及其降解酶活性變化及調控效應。【結果】隨著‘京白梨’果實后熟軟化,果實細胞壁物質(CWM)、共價結合果膠(CSP)、半纖維素和纖維素含量減少,離子結合果膠(ISP)和水溶性果膠(WSP)含量增加;果膠甲酯酶(PME)和多聚半乳糖醛酸酶(PG)活性在采后3 d 后開始升高,分別在第9天和第12天出現活性高峰,α-L-阿拉伯呋喃糖苷酶(α-L-Af)和β-半乳糖苷酶(β-Gal)活性在采收時就開始升高,并持續到貯藏末期,但纖維素酶活性呈降低趨勢。相關分析表明,果實硬度與半纖維素、ISP和CSP呈極顯著相關,與WSP和纖維素呈顯著相關;而β-Gal和α-L-Af不僅與硬度呈極顯著相關,且與細胞壁組分的相關度均大于其它細胞壁降解酶,但纖維素酶未表現出相關性。0℃和1-MCP處理顯著抑制了‘京白梨’果實纖維素、半纖維素與CSP含量的下降和ISP與WSP含量的增加,降低了α-L-Af、β-Gal、PME和PG活性,推遲果實軟化;乙烯利的作用不大。【結論】采后‘京白梨’果實軟化與細胞壁組分變化密切相關,細胞壁降解酶中,β-Gal和α-L-Af可能是果實早期軟化的主要因子,PME和PG促進了果實后期軟化,但纖維素酶作用不大。0℃和1-MCP能顯著抑制‘京白梨’果實細胞壁代謝,延緩果實軟化;乙烯利未顯著促進果實軟化進程。

    重組CE18蛋白在綿羊絳蟲蚴病診斷上的應用
    劉紅霞,才學鵬,張少華,郭愛疆,閆鴻斌,茍惠天,付寶權,賈萬忠
    中國農業科學. 2009, 42(8):  2997-3002 .  doi:10.3864/j.issn.0578-1752.2009.08.045
    摘要 ( 920 )   PDF (254KB) ( 493 )   收藏
    相關文章 | 多維度評價

    【目的】探討細粒棘球蚴CE18重組蛋白作為絳蟲蚴病免疫診斷抗原的應用價值,為篩選絳蟲蚴病血清學診斷抗原提供依據。【方法】應用棘球蚴CE18重組抗原建立間接ELISA方法,分別對18份腦多頭蚴、15份細頸囊尾蚴、19份棘球蚴感染綿羊血清及194份棘球蚴病疫區綿羊血清和13份健康羊血清進行檢測,通過顯著性差異分析評價CE18蛋白作為診斷抗原的意義。同時,應用生物學軟件對CE18抗原蛋白同源序列進行分析,進一步從分子水平上提示CE18蛋白作為絳蟲蚴病診斷抗原的依據。【結果】序列分析表明棘球蚴CE18蛋白基因為多種絳蟲如泡狀帶絳蟲、多頭帶絳蟲、豬帶絳蟲等的共有序列,其蛋白質氨基酸序列相似性很高,不同種屬之間高達99%,從分子水平上表明CE18蛋白為帶絳蟲蚴共同抗原成分之一。重組抗原CE18-ELISA方法檢測綿羊血清抗體水平顯示:腦多頭蚴病、細頸囊尾蚴病、棘球蚴病和棘球蚴病疫區血清的陽性率分別為38.89%、73.33%、100%和76.14%,而對照組血清為陰性反應。【結論】CE18重組蛋白可作為綿羊棘球蚴病和細頸囊尾蚴病血清學診斷抗原,用于畜群活體檢疫初篩試驗。

    禽U6啟動子的克隆、序列分析及其驅動的siRNA表達
    王永娟,沈鵬鵬,張鑫宇,夏曉莉,孫懷昌
    中國農業科學. 2009, 42(8):  3003-3008 .  doi:10.3864/j.issn.0578-1752.2009.08.046
    摘要 ( 1047 )   PDF (413KB) ( 1024 )   收藏
    相關文章 | 多維度評價

    【目的】分離用于禽源細胞中表達短干擾RNA(short interference RNA,siRNA)的禽U6啟動子。【方法】以雞基因組為模板進行PCR擴增,將擴增產物進行序列測定和生物信息學分析,并將其插入報告基因載體pEGFP-N1中,獲得siRNA表達載體pGFP-U6,將由軟件預測針對GFP基因的siRNA所對應的shRNA(short hairpin RNA)插入其中,獲得pGFP-U6-shRNA;以含人H1啟動子的siRNA表達載體pGFP-H1-shRNA為對照,分別轉染COS-1和DF-1細胞,用熒光顯微鏡和流式細胞儀測定轉染細胞培養中GFP陽性細胞數和熒光總量。【結果】克隆的U6啟動子位于雞28號染色體,與發表的雞U6-3啟動子同源性為97.2%,含多個Oct-1序列,不含CACCC框、SPH和PSE等聚合酶Ⅲ啟動子序列,TA框不典型;在pGFP-U6-shRNA轉染的哺乳動物源COS-1細胞培養中,GFP陽性細胞數和熒光總量均有所下降,但不如pGFP-H1-shRNA轉染細胞顯著;在pGFP-U6-shRNA轉染的禽源DF-1細胞培養中,不僅GFP陽性細胞數和熒光總量顯著下降,而且基因沉默效果顯著優于pGFP-H1-shRNA轉染細胞。【結論】成功克隆的禽U6啟動子不僅能有效轉錄siRNA,而且轉錄活性具有相對的細胞種屬特異性。

福利彩票3d开奖结果