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當期目錄

    2009年 第42卷 第10期 刊出日期:2009-10-10
      
    作物遺傳育種·種質資源·分子遺傳學
    中國不同省份粳稻選育品種的遺傳相似性
    束愛萍,張媛媛,曹桂蘭,盧勤,張三元,韓龍植
    中國農業科學. 2009, 42(10):  3381-3387 .  doi:10.3864/j.issn.0578-1752.2009.10.001
    摘要 ( 1093 )   PDF (234KB) ( 1059 )   收藏
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    【目的】探討中國不同省份間粳稻選育品種的遺傳相似性和遺傳差異,為粳稻育種提供參考依據。【方法】利用34對SSR引物對12個省139份粳稻選育品種進行遺傳相似性和聚類分析。【結果】共檢測到198個等位基因,平均每對SSR引物檢測到的等位基因數為5.3235個。RM320、RM531、RM1、RM286和RM336的等位基因數較多,分別為15、12、11、9和9個;RM320、RM336、RM286和RM531的遺傳多樣性指數較高,分別為2.3324、2.0292、1.8996和1.7820。12個省份間粳稻選育品種的遺傳相似性系數范圍為0.321~0.914,平均0.686。東北三省、寧夏、云南等緯度相近或生態氣候環境相似的省份間粳稻選育品種的遺傳相似性較高,而貴州、江蘇與其它省份間緯度或生態氣候差異較大,其粳稻選育品種的遺傳相似性較低。【結論】RM320、RM531、RM1、RM286和RM336等標記適合利用于粳稻選育品種的遺傳多樣性檢測。不同省份間粳稻選育品種的遺傳相似性與其親本的遺傳基礎有密切相關的同時,與品種選育時所處的緯度和生態氣候環境也有一定的相關性。

    利用ILP標記分析水稻秈粳雜交親本和衍生系的秈粳分化
    許旭明,梁康逕,張受剛,尚 偉,張瑛英,韋新宇,柯 蓓
    中國農業科學. 2009, 42(10):  3388-3396 .  doi:10.3864/j.issn.0578-1752.2009.10.002
    摘要 ( 1142 )   PDF (440KB) ( 897 )   收藏
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    【目的】揭示水稻秈粳雜交親本和衍生系的秈粳分化度,為培育實用型秈粳亞種間雜交稻提供理論和實踐依據。【方法】以通過不斷聚合和累加不同廣親和基因與恢復基因的方法,歷時21年,4個育種階段,涉及18個秈粳雜交親本和39個衍生系為研究材料,采用秈粳特異ILP分子標記(水稻內含子長度多態性分子標記)和程氏形態指數法進行秈粳分化度檢測。【結果】57個供試材料基因組DNA在所檢測位點上均存在秈粳分化。18個親本共檢測出4個粳稻、5個偏粳、8個偏秈和1個秈稻類型。在18個親本中, 明恢63和9308的粳稻成分分別為12.50%和33.33%;粳型恢復系C418的粳稻成分僅有31.25%。39個秈粳雜交衍生系共檢測出1個粳稻、11個偏粳、20個偏秈和7個秈稻類型。其中,粳型衍生系明恢502的粳稻成分僅占10.42%。ILP標記法與形態指數法判定秈粳分類結果的吻合度較好,粳稻成分指數、秈稻成分指數與程氏指數綜合值的相關系數分別為r=0.794**和r=-0.7662**。【結論】ILP標記具有準確檢測秈(粳)成分比例的功能;研究秈粳分化可以合理解釋秈粳型恢復系配組的雜交稻表現明顯雜種優勢的原因,對有效利用秈粳亞種間優良基因具有重要作用。

    利用SSR標記探討骨干親本歐柔在衍生品種的遺傳
    李小軍,徐 鑫,劉偉華,李秀全,李立會
    中國農業科學. 2009, 42(10):  3397-3404 .  doi:10.3864/j.issn.0578-1752.2009.10.003
    摘要 ( 1056 )   PDF (439KB) ( 936 )   收藏
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    【目的】研究骨干親本歐柔染色體片段在衍生后代的分布及所關聯的性狀,旨在揭示骨干親本對后代品種的遺傳貢獻。【方法】對小麥骨干親本歐柔及其衍生的23份在中國生產和育種中發揮重要作用的后代品種進行農藝性狀調查和SSR掃描。【結果】在43個SSR位點歐柔特異等位變異在一代品種的傳遞頻率高于理論比例0.38; 在41個位點歐柔特異等位變異在二代品種的傳遞頻率高于理論比例0.18;在21個位點歐柔特異等位變異被持續選擇(在2個子代的分布頻率分別大于0.38和0.18)。SSR標記與農藝性狀關聯分析表明,在Xwmc710、Xbarc235和Xbarc252位點,歐柔等位變異類型在后代具有高的分布頻率且與較高的穗粒數、產量相關。【結論】推測本研究發現的重要染色體區域及相關的優異性狀在中國小麥品種改良中發揮了重要作用,是進一步研究的重點。

    小麥TaGA20ox2基因的克隆及分析
    武晶,孔秀英,高麗峰,任正隆,賈繼增
    中國農業科學. 2009, 42(10):  3405-3412 .  doi:10.3864/j.issn.0578-1752.2009.10.004
    摘要 ( 1060 )   PDF (671KB) ( 1040 )   收藏
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    【目的】克隆小麥中的GA20-氧化酶基因并進行遺傳定位,為深入研究小麥中的GA20-氧化酶基因作用機理奠定基礎,同時為改良小麥的重要農藝性狀提供理論依據。【方法】采用同源克隆結合BAC文庫篩選的方法克隆基因,利用中國春缺失體以及國際作圖群體對該基因進行遺傳定位。【結果】從普通小麥中國春中分離得到TaGA20ox2的gDNA與cDNA序列,利用中國春缺失體材料將TaGA20ox2定位于3A、3B、3D染色體上,序列分析表明分別位于3A、3B、3D染色體上的TaGA20ox2-A1、TaGA20ox2-B1和TaGA20ox2-D1與水稻GA20ox2為直向同源基因,具有GA20ox2家族保守結構域;利用國際作圖群體W7984×Opata85將位于3D上的基因TaGA20ox2-3定位于xfba330與xgwm664標記之間。【結論】分離獲得小麥中分布于第三同源群的GA20ox2;分子標記結果結合QTL作圖信息可以初步推測TaGA20ox2-3在小麥中可能是控制株高的基因。

    不同氮水平下玉米苗期生長性狀及成熟期產量的QTL定位
    劉建超,李建生,米國華,陳范駿,張福鎖
    中國農業科學. 2009, 42(10):  3413-3420 .  doi:10.3864/j.issn.0578-1752.2009.10.005
    摘要 ( 877 )   PDF (535KB) ( 899 )   收藏
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    【目的】研究玉米苗期氮素利用效率相關性狀與成熟期產量之間的遺傳關系。【方法】以優良雜交種豫玉22兩親本Z3和87-1為基礎構建的一套F8家系的RIL群體為研究材料,在高、低氮兩種條件下,通過苗期水培試驗和成熟期田間試驗,利用復合區間作圖法對玉米苗期地上部干重、根干重、總根長、根冠比以及成熟期產量性狀進行了QTL定位。【結果】利用Windows QTL Cartographer 2.5 軟件,在LOD>2.5條件下共定位到22個QTL位點,其中高氮下定位到10個QTL,低氮下定位到12個QTL,兩種氮水平下共位或緊密連鎖的QTL位點很少,表明不同氮水平下的遺傳機制不同。在第5和第7染色體上發現了苗期根系相關性狀與成熟期產量之間存在連鎖關系。【結論】苗期根系性狀對成熟期的產量形成具有重要的作用,在氮高效遺傳育種中可以把苗期根系性狀作為一個重要的選擇指標。

    中國芝麻主要品種遺傳多樣性特點及遺傳基礎演變
    孫建,張秀榮,張艷欣,車卓,黃波
    中國農業科學. 2009, 42(10):  3421-3431 .  doi:10.3864/j.issn.0578-1752.2009.10.006
    摘要 ( 843 )   PDF (596KB) ( 841 )   收藏
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    【目的】探明中國主要芝麻品種遺傳多樣性特點和遺傳基礎演變趨勢。【方法】采用SRAP(Sequence- related amplified polymorphism,相關序列擴增多態性)標記對中國芝麻主要產區1950-2007年間應用的67個品種進行分析。【結果】21對SRAP隨機組合引物共擴增DNA帶561條,多態性帶265條,比例為47.2%;每對引物平均擴增的總帶數和多態性帶分別為26.7和12.6條。67個品種間的遺傳相似系數平均為0.9104,遺傳距離平均為0.0706,遺傳多樣性較匱乏,遺傳基礎較窄。地方品種與雜交選育品種間的遺傳相似系數和遺傳距離的均數差異達到極顯著水平,前者的遺傳基礎較后者寬;1990-2007年間應用的品種遺傳基礎較1950-1969年和1970-1989年間的窄,其遺傳相似系數和遺傳距離的均數差異均達到極顯著水平。【結論】中國芝麻主要品種總體遺傳基礎較窄,近年來通過雜交選育的品種遺傳基礎較歷史品種狹窄。

    耕作栽培·生理生化
    不同庫容量類型常規秈稻品種氮素吸收與分配的差異
    董桂春,于小鳳,董燕萍,李進前,田 昊,周 娟,王云霞,楊連新,黃建曄,王余龍
    中國農業科學. 2009, 42(10):  3432-3441 .  doi:10.3864/j.issn.0578-1752.2009.10.007
    摘要 ( 920 )   PDF (306KB) ( 813 )   收藏
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    【目的】研究不同庫容量類型水稻品種氮素吸收與分配的差異,為大庫容量類型品種的氮素遺傳改良提供參考依據。【方法】在群體水培條件下,以國內、外不同年代育成的常規秈稻代表品種(2001年為88個、2002年為122個)為材料,測定干物重(包括根系)、產量及其構成因素、氮素含量等,采用組內最小平方和的動態聚類方法將供試品種按庫容量從低到高依次分為A、B、C、D、E、F 6類,研究各類品種氮素吸收與分配的基本特點。【結果】供試品種間庫容量的差異很大(426%、817%)。A、B、C、D、E、F類品種的平均庫容量,2001年分別為426.37、642.53、770.96、903.73、1 064.32、1 213.90 g?m-2,2002年分別為359.36、574.11、764.98、962.43、1 200.11、1 455.59 g?m-2;大庫容量品種抽穗期全株含氮率較高、結實期全株含氮率下降幅度較大;大庫容量類型品種吸氮能力強,抽穗后更明顯吸氮能力顯著受到生育期與吸氮強度的影響,但吸氮強度的作用要大于生育期的作用。;大庫容量類型品種氮素在根中比例小、成熟期氮素在莖鞘葉中比例小、穗中氮素比例大、結實期莖鞘葉氮素運轉量大;增加吸氮量,促進莖鞘葉中的氮素運轉有利于庫容量的提高。【結論】大庫容量類型品種吸氮能力特別是抽穗后的吸氮能力強,成熟期氮素在營養器官中比例小、穗中氮素比例大、結實期莖鞘葉氮素運轉量大。

    雜交中稻齊穗后葉片SPAD值衰減對再生力的影響

    徐富賢,熊 洪,張 林,郭曉藝,朱永川,周興兵,劉 茂
    中國農業科學. 2009, 42(10):  3442-3450 .  doi:10.3864/j.issn.0578-1752.2009.10.008
    摘要 ( 783 )   PDF (363KB) ( 599 )   收藏
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    【目的】探明影響再生力的主作關鍵植株性狀,為雜交水稻及其再生稻的高產育種與栽培提供參考。【方法】以18個雜交中稻品種為材料,在大田高產栽培條件下,通過相關、回歸與通徑分析,研究了雜交中稻植株性狀與再生力關系及主作和再生總體高產組合的穗粒結構。【結果】活芽率、發苗力、再生稻有效穗和產量4個性狀是代表品種再生力的關鍵因子,增加有效穗是進一步提高再生稻產量的重要途徑;穗粒數、葉穎花比、葉粒數比、葉粒重比、LAI衰減指數和SPAD值衰減指數分別與活芽率、發苗力、再生稻有效穗和產量呈顯著或極顯著相關,其中僅有頭季稻齊穗期至成熟期葉片SPAD值衰減指數對活芽率、發苗力、再生稻有效穗和產量的偏相關均達顯著以上水平;同一個組合同時實現頭季稻和再生稻均分別達到最高產量的可能性小,兩季總產同時滿足理論產量達11.5 t?hm-2和產量潛力達14 t?hm-2的高產組合的主作群體主要特征最佳取值范圍:穗粒數為160~190粒,葉粒重比0.0737~0.0827 cm2?mg-1、SPAD值衰減指數0.4029~0.5409、有效穗232.12萬~249.40萬/hm2、結實率81.54%~85.74%、千粒重28.58~30.07 g、單穗重4.13~4.43 g。【結論】再生稻進一步高產的主攻目標是增加有效穗,頭季稻齊穗到成熟葉片SPAD值衰減指數可作為鑒定再生力的新指標,中等偏大穗品種是中稻-再生稻總體高產的重要特征。

    拔節至成熟期遮蔭對小麥籽粒高分子量麥谷蛋白亞基積累及GMP含量的影響

    伯云,李華偉,牟會榮,蔡 劍,周 琴,戴廷波,曹衛星,姜 東
    中國農業科學. 2009, 42(10):  3451-3458 .  doi:10.3864/j.issn.0578-1752.2009.10.009
    摘要 ( 1144 )   PDF (620KB) ( 650 )   收藏
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    【目的】高分子量麥谷蛋白亞基(HMW-GS)和麥谷蛋白大聚合體(GMP)含量是反映小麥籽粒品質的重要性狀,本試驗研究拔節到成熟期遮蔭對2個含相同HMW-GS亞基類型(7+8、2+12)小麥品種胚乳HMW-GS積累動態和GMP含量的影響。【方法】采用SDS-PAGE電泳和切膠比色的方法,對遮蔭條件下小麥籽粒中HMW-GS亞基進行定量分析。【結果】遮蔭使HMW-GS的起始形成時間提早,18%和25%重度遮蔭處理縮短各亞基和總亞基快速積累期,并降低灌漿后期積累速度,成熟期單粒總HMW-GS積累量低于對照,但成熟期籽粒HMW-GS和GMP含量高于對照。輕度遮蔭(10%)延長了籽粒HMW-GS快速積累期,亞基積累量和含量均高于對照。【結論】遮蔭處理影響小麥籽粒HMW-GS積累,但其效應與遮蔭強度有關。

    灌溉與尿素類型對玉米花后穗位葉衰老、產量和效益的影響
    邵國慶,李增嘉,寧堂原,蔣保娟,焦念元
    中國農業科學. 2009, 42(10):  3459-3466 .  doi:10.3864/j.issn.0578-1752.2009.10.0010
    摘要 ( 844 )   PDF (298KB) ( 817 )   收藏
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    【目的】研究不同水分條件下,包膜控釋尿素與常規尿素用量對玉米穗位葉衰老、產量和效益的影響。【方法】采用隨機區組設計5個施氮水平和2個水分水平,研究不同類型尿素與水分耦合對玉米花后不同時期穗位葉含水量、凈光合速率、超氧化物歧化酶(SOD)、過氧化物酶(POD)和過氧化氫酶(CAT)活性、丙二醛(MDA)和可溶性蛋白含量的影響,比較處理間的產量和經濟效益差異,討論花后穗位葉衰老與產量的關系。【結果】相同水分條件下,與常規尿素相比,開花期包膜控釋尿素處理玉米穗位葉凈光合速率較低,花后始終保持較高值,且越到后期優勢越大。相同施氮水平下,與常規尿素相比,包膜控釋尿素處理可顯著提高玉米穗位葉含水量、SOD、POD和CAT酶活性,增加可溶性蛋白含量,降低MDA積累量,因而包膜控釋尿素處理可顯著提高玉米籽粒產量和經濟效益;灌漿水有利于延緩穗位葉衰老,可顯著提高籽粒產量和經濟效益。由于包膜控釋尿素成本較高,在灌漿水條件下施氮量較高時經濟效益低于常規控釋尿素。【結論】與常規尿素相比,包膜控釋尿素與灌溉對籽粒產量和經濟效益的耦合效應更顯著,其原因是提高了葉片活性氧清除酶活性,增加了可溶性蛋白含量,降低了MDA的積累量,延緩葉片衰老和提高凈光合速率,有利于高產。隨著包膜控釋尿素產量的增加和成本的降低,它在糧食作物生產上應用前景非常廣闊。

    施氮對蠶豆/玉米間作系統蠶豆農藝性狀及結瘤特性的影響
    李玉英,孫建好,李春杰,李 隆,程 序,張福鎖
    中國農業科學. 2009, 42(10):  3467-3474 .  doi:10.3864/j.issn.0578-1752.2009.10.0011
    摘要 ( 907 )   PDF (354KB) ( 831 )   收藏
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    【目的】旨在探明施氮對蠶豆/玉米間作體系蠶豆農藝性狀和結瘤特性的影響,為河西走廊灌區豆科/禾本科間作體系氮素管理和高產高效提供科學依據。【方法】于2006-2007年在甘肅省農科院白云試驗站分別采用裂區設計和原位根系行分隔法設計了蠶豆/玉米間作體系的氮梯度試驗和根系分隔微區試驗,研究不同氮水平下蠶豆/玉米種間互作對蠶豆農藝性狀和結瘤特性的影響。【結果】施氮對蠶豆地上部生長和產量性狀均無顯著影響,但顯著地抑制了蠶豆結瘤,產生了“氮阻遏”效應,且隨著施氮量增加和蠶豆生長,“氮阻遏”效應愈加明顯。隨著蠶豆與玉米兩種作物生長發育,作物根系相互促進作用逐漸增強,顯著地促進了根瘤發育,且產生了“減緩效應”,平均為14.4%;根系互作相對于無根系互作處理蠶豆結瘤平均增加10.2%。【結論】蠶豆/玉米種間根系相互作用促進了蠶豆結瘤,減緩了”氮阻遏”效應,顯著提高了蠶豆產量性狀而實現了蠶豆增產。

    光照強度和肥力變化對冷地早熟禾生長的影響
    馬銀山,王曉芬,張作亮,李傳龍,杜國禎,張世挺
    中國農業科學. 2009, 42(10):  3475-3484 .  doi:10.3864/j.issn.0578-1752.2009.10.0012
    摘要 ( 827 )   PDF (352KB) ( 652 )   收藏
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    【目的】研究光照強度和肥力變化對高寒草甸牧草冷地早熟禾生長的影響,為牧草合理利用和草地生態系統的健康管理提供依據。【方法】試驗采用析因設計,在野外條件下,對光照和肥力變化下植物的生長參數進行測定,評估牧草對異質環境的適應特性。光照分為高光照(100%光照強度)、中度光照(43.5%光照強度)與低光照(6.74%光照強度);肥力分為施肥與不施肥。試驗測定了冷地早熟禾在不同光照和肥力水平下分蘗數、株高、地上生物量、比葉面積、相對生長率及植物個體不同部分生物量的分配。【結果】冷地早熟禾隨光照強度的減弱,分蘗數減小,地上生物量降低,施肥可補償光照減弱對分蘗數和地上生物量減小的影響。株高在中度光照強度下最高,施肥在高光照和低光照下可促進株高的增加。比葉面積(SLA)隨光照強度的減弱而增加,相對生長率(RGR)隨光照強度的減弱而減小,施肥對SLA和RGR無影響。根冠比和根分配在中度光照和低光照下各處理之間差異均不顯著,高光照下增加肥力,根冠比和根分配減小;葉分配隨光照強度的減弱而增加,繁殖分配減小,施肥對葉分配與繁殖分配無影響;施肥時莖分配隨光照強度的減弱而減小,不施肥時莖分配在中度光照強度(43.5%)下最大,高光照強度(100%)下次之,低光照強度(6.74%)下最小。【結論】冷地早熟禾是一個光苛求物種,光照強度減弱不利于其生長。肥力增加和高光照強度對冷地早熟禾的生長有增效作用,中度光照強度下肥力的作用被光照作用掩蓋,低光照強度下增加肥力可補償缺失的光照。對于林冠下以冷地早熟禾為優勢種的草地,冠層間隙光透射達中度光照水平,施肥無效;冠層間隙光透射水平較低時,可通過施肥來提高產量。

    植物保護
    小麥多品種混播控制條銹病的效果和機理研究
    郭世保,黃麗麗,康振生,程晶晶,陸寧海,楊之為,陳銀潮
    中國農業科學. 2009, 42(10):  3485-3492 .  doi:10.3864/j.issn.0578-1752.2009.10.0013
    摘要 ( 1125 )   PDF (522KB) ( 804 )   收藏
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    【目的】研究多品種混播對條銹病的控制效果及其機理,為利用品種混播這種生態控制條銹病的方法應用提供理論依據。【方法】在田間分別設計6個品種單播及其9個組合的混播小區,比較研究條銹病的發生情況和產量差異;并采用TP-M13-SSR技術分析自然發病條件下條銹菌群體的遺傳多樣性。【結果】多品種混播小區苗期發病中心較少,且發病中心的擴展速度明顯受到抑制,在春季流行階段病情指數顯著降低;品種混播以抗-感組合較好,2007年其相對防效平均為73.27%,相對增產率平均為13.26%;混播中組分數目對病害和產量的影響無明顯差異;混播小區條銹菌的遺傳多樣性高于單播小區。【結論】多品種混播對小麥小麥條銹病有較好的控制效果,并可明顯降低產量損失;品種多樣化有利于條銹菌群體結構的穩定;品種混播可作為生態防病措施之一。

    超分支滾環擴增法檢測小麥矮腥黑穗菌
    蔡俊,殷幼平,葛建軍,陳洪俊,黃冠軍,張雯迪,王中康
    中國農業科學. 2009, 42(10):  3493-3500 .  doi:10.3864/j.issn.0578-1752.2009.10.0014
    摘要 ( 993 )   PDF (704KB) ( 1194 )   收藏
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    【目的】建立小麥矮腥黑穗病菌(Tilletia controversa Kühn,TCK)的超分支滾環擴增(hyper- branched rolling cycle amplification,HRCA)檢測體系,為小麥矮腥黑穗病的鑒定以及早期診斷提供了一種新的穩定、可靠的檢測技術。【方法】鎖式探針包含一個公共連接序列和在探針兩端與靶DNA序列互補的2個序列。根據TCK的差異序列設計鎖式探針兩端序列,以此為基礎建立了TCK超分支滾環擴增反應體系。以優化的HRCA反應條件為基礎,確定檢測體系的特異性和靈敏度。比較HRCA體系和常規PCR體系的性能,并利用這2種體系對來自中國出入檢驗檢疫局截獲的51個小麥樣品進行了驗證檢測。【結果】HRCA體系能專一地檢出小麥矮腥黑穗菌的DNA靶帶,而TCT、TCL等近源種及健康小麥樣品都不能擴增。HRCA檢測TCK靶序列質粒DNA的下限為1 fg?μl-1,檢測基因組DNA的下限為10 pg?μl-1,檢測靈敏度比常規PCR檢測體系高10倍。HRCA檢測體系具有很好的特異性、靈敏度和準確性,更適合于TCK的檢測及鑒定。【結論】穩定、靈敏、特異的小麥矮腥黑穗菌的HRCA檢測體系的建立,為小麥矮腥黑穗病的早期診斷及其近源種的多靶標檢測提供了同步檢測技術。

    應用GDPs轉錄物標記法進行水稻白葉枯病菌早期侵染表達譜分析
    張新建,高世強,吳茂森,何晨陽
    中國農業科學. 2009, 42(10):  3501-3508 .  doi:10.3864/j.issn.0578-1752.2009.10.0015
    摘要 ( 885 )   PDF (267KB) ( 606 )   收藏
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    【目的】揭示水稻白葉枯病菌(Xanthomonas oryzae pv. oryzae,Xoo)在侵染水稻葉組織早期的基因表達譜差異。【方法】采用GDPs-Finder計算法,設計了能夠覆蓋KACC10331基因組全部ORFs的定向引物(GDPs),對Xoo與水稻互作1、3和7 d的總RNA進行反轉錄,對病菌cDNA探針進行Cy3/Cy5選擇性標記,與含有371個Xoo致病相關基因的芯片進行雜交。【結果】在水稻侵染的不同時期,Xoo致病相關基因表達譜存在差異。與在NBY中生長相比,Xoo在侵染1、3和7 d時分別有42個(18個上調和23個下調)、51個(29個上調和22個下調)和33個(16個上調和17個下調)基因發生了差異表達;其中5個基因是共有上調表達的,5個是共有下調表達的。推測這些基因的差異表達可能與病菌適應寄主體內環境、生長與定殖以及為害與顯癥過程有關。【結論】應用GDPs轉錄物標記技術可以成功地進行Xoo侵染過程的表達譜分析,鑒定出的差異表達的基因可以作為功能研究的靶標基因。

    厚垣普奇尼亞菌Pochonia chlamydosporia產生的幾丁質酶對南方根結線蟲卵孵化的影響
    張成敏,武俠,才秀華
    中國農業科學. 2009, 42(10):  3509-3515 .  doi:10.3864/j.issn.0578-1752.2009.10.0016
    摘要 ( 1090 )   PDF (425KB) ( 958 )   收藏
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    【目的】卵寄生真菌厚垣普奇尼亞菌Pochonia chlamydosporia產生的幾丁質酶對定居性根結類和胞囊類線蟲的卵殼消解起重要促進作用。線蟲卵寄生真菌產生幾丁質酶的特性是評價食線蟲真菌生物防治潛力的重要生化指標之一。【方法】利用NAG法和pNP法分別測定7株不同來源厚垣普奇尼亞菌Pochonia chlamydosporia幾丁質酶的降解酶系和外切酶活性。【結果】7個菌株都能夠產生外切酶,其中QNAV97-2、NRRL13094、CFCC84963和 CFCC80919菌株能夠產生幾丁質降解酶系,幾丁質酶活性染色檢測分別有2條和4條具有幾丁質酶活性的蛋白譜帶,其中CFCC80919和QNAV97-2分別產生的38.9 kD和39.8 kD幾丁質酶可能是已知的CHI43幾丁質酶。具有幾丁質降解酶活性的4個厚垣普奇尼亞菌對根結線蟲的卵孵化抑制率為40.32%~55.15%,未測定出幾丁質降解酶活性的3個菌株對根結線蟲的卵孵化抑制率不足20%。顯微觀察處理的南方根結線蟲卵殼變形和破壞。【結論】厚垣普奇尼亞菌系產生的幾丁質酶能夠消解南方根結線蟲卵殼,特別是胚前發育期未成熟卵,抑制卵孵化或殺死卵,且在消解卵的過程中起重要作用。厚垣普奇尼亞菌的幾丁質酶活性水平可能是造成該類菌殺線活性差異的原因之一。

    抗芐嘧磺隆雨久花ALS基因突變研究
    盧宗志,張朝賢,傅俊范,李茂海,李貴軍
    中國農業科學. 2009, 42(10):  3516-3521 .  doi:10.3864/j.issn.0578-1752.2009.10.0017
    摘要 ( 887 )   PDF (418KB) ( 677 )   收藏
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    【目的】近年來,中國東北水稻田抗藥性雨久花發生嚴重,部分地區用芐嘧磺隆已無法有效控制該雜草的危害。為明確該雜草抗藥性發生的根本原因,本試驗從分子水平上研究了稻田雜草雨久花(Monochoria korsakowii)對芐嘧磺隆的抗藥性機理,以確定導致抗藥性產生的乙酰乳酸合成酶(ALS)氨基酸突變位點。【方法】利用PCR技術,通過對抗藥性雨久花生物型和敏感性雨久花生物型ALS片段進行擴增和基因克隆,最后對DNA序列進行測序比對。【結果】與敏感性的雨久花ALS相比,抗藥性雨久花生物型的ALS共有3處發生突變,即第197位脯氨酸突變為組氨酸,第200位蛋氨酸突變為纈氨酸,第388位精氨酸突變為組氨酸,其中第197位突變與諸多文獻報道相符。【結論】抗藥性雨久花ALS第197位的突變可能是雨久花對芐嘧磺隆產生抗藥性的主要原因。其它2個氨基酸突變是否也導致雜草對芐嘧磺隆產生抗藥性未見相關報道,有待進一步研究。

    新型除草劑丙酯草醚對油菜幼苗生長與根尖細胞活性的影響
    張帆,田甜,金宗來,黃沖平,唐桂香,葉慶富,周偉軍
    中國農業科學. 2009, 42(10):  3522-3529 .  doi:10.3864/j.issn.0578-1752.2009.10.0018
    摘要 ( 1054 )   PDF (398KB) ( 707 )   收藏
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    【目的】研究新型油菜田除草劑丙酯草醚(ZJ0273)對甘藍型油菜發芽期幼苗在生長發育及根尖細胞活性等方面的安全性影響,為進一步明確其作用機理奠定理論基礎。【方法】利用生理生化方法探討了ZJ0273處理對發芽期油菜莖根長、干物質積累、根系活力和根細胞膜透性等的影響,并運用FDA-PI熒光對染法及根尖壓片法研究了該除草劑對油菜根尖細胞活性及有絲分裂的影響。【結果】ZJ0273處理對油菜幼苗干物質和苗高等性狀的抑制作用隨著處理濃度的升高和處理時間的延長而顯著增強;10與100 mg?L-1處理顯著抑制了油菜幼苗根的生長且兩處理間抑制效果無明顯差異;1 mg?L-1以下濃度的ZJ0273對油菜幼苗根系活力、細胞膜完整性幾乎無顯著影響,而10 mg?L-1以上濃度處理則明顯抑制根系活力且破壞細胞膜完整性;100 mg?L-1ZJ0273處理抑制油菜根尖分生區細胞有絲分裂并使多數細胞停滯于分裂中期。【結論】發芽期是油菜對ZJ0273處理的敏感時期;10 mg?L-1 ZJ0273處理即抑制油菜幼苗的生長發育及影響根尖細胞活性,且抑制效果隨處理濃度的升高和處理時間的延長而增大;對油菜幼苗較為安全的ZJ0273臨界濃度為1 mg?L-1。

    土壤肥料·節水灌溉·農業生態環境
    混合菌種固體發酵菜粕生產氨基酸肥料的條件研究
    王永紅,冉煒,張富國,楊興明,徐陽春,沈其榮
    中國農業科學. 2009, 42(10):  3530-3540 .  doi:10.3864/j.issn.0578-1752.2009.10.0019
    摘要 ( 1008 )   PDF (629KB) ( 912 )   收藏
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    【目的】通過響應曲面法優化以菜粕作為主要基質,兩株產蛋白酶菌株嗜麥芽糖寡養單胞菌Stenotrophomonas maltrophilia G12(FJ211222)和短小芽孢桿菌Bacillus pumilus K11(FJ211221)混合菌種固體發酵生產氨基酸肥料的發酵過程參數,為實際生產提供理論依據。【方法】利用響應曲面法(response surface methodology),中的Plackett-Burman設計和Box-Behnken設計完成整個優化過程,用Mintab 15.0軟件和Design-Expert 7.0軟件分析試驗數據。【結果】最終確定了麩皮添加量,基質起始含水量和起始pH為影響固體發酵酶解過程的主要因素,得出固體發酵過程主要工藝參數:發酵周期6 d,麩皮添加量14.1%,基質含水量54.4%,起始pH 9.15,接種量5.0%,菌液體積比為1﹕1,每24 h翻拋1次。【結論】發酵過程參數優化后的菜粕蛋白水解度達到了13.1%,增加了游離氨基酸和小肽含量。

    長期施用化肥和稻草對紅壤水稻土肥力和生產力持續性的影響
    廖育林,鄭圣先,聶 軍,魯艷紅,謝 堅,楊曾平
    中國農業科學. 2009, 42(10):  3541-3550 .  doi:10.3864/j.issn.0578-1752.2009.10.0020
    摘要 ( 914 )   PDF (462KB) ( 867 )   收藏
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    【目的】研究長期施用氮(N)、磷(P)、鉀(K)化肥和稻草(RS)對中國亞熱帶地區紅壤水稻土肥力變化的趨勢和水稻生產力可持續性的影響。【方法】利用1981年建立在湖南省望城縣黃金鄉第四紀紅土紅壤發育的水稻土(分類為普通簡育水耕人為土)上的定位試驗田,對氮、磷和鉀化肥及其與稻草長期配合施用的5個處理的土壤肥力和生產力可持續性進行了評價。【結果】氮、磷和鉀化肥與稻草長期配合施用能維持和提高紅壤水稻土的生產力和土壤肥力;水稻獲得了持續高產,土壤有機質、全氮、全磷、可礦化氮量均增加,速效磷和速效氮比試前土壤增加。長期施用氮、磷肥而不施鉀肥的NP處理水稻產量、土壤氮、鉀逐年降低,稻田系統生產力的可持續性和土壤肥力難以維持。稻草還田對水稻具有顯著的增產作用,27年54季的稻草還田配合化肥處理的平均水稻產量比僅施化肥的NP和NPK處理分別增產12.2%和6.7%,稻草的增產作用還隨著稻草還田時間的延長而逐年提高。【結論】稻草還田攜入的鉀與化學鉀肥具有相同的營養功能,稻草可替代部分化學鉀肥。

    不同稻作制、有機肥用量及地下水深度對紅壤性水稻土無機磷形態的影響
    馮躍華,張楊珠,黃運湘
    中國農業科學. 2009, 42(10):  3551-3558 .  doi:10.3864/j.issn.0578-1752.2009.10.0021
    摘要 ( 833 )   PDF (327KB) ( 567 )   收藏
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    【目的】探明耕作,施肥,灌溉等農藝措施對紅壤性水稻土無機磷狀況的影響。【方法】利用蔣柏藩等的無機磷分級方法研究了在長期定位試驗條件下稻作制和有機肥用量及地下水位深度對紅壤性水稻土無機磷形態的影響。【結果】紅黃泥耕層土壤的無機磷總量為398.6~546.1 mg?kg-1,平均為(471.4±40.5)mg?kg-1。無機磷各形態以O-P和Fe-P為主,平均分別占無機磷總量的39.2%和38.6%。不同稻作制間,稻-稻-冬泡的無機磷總量高于稻-稻-油菜和稻-稻-綠肥。不同有機肥施用量處理間,化肥處理的無機磷總量高于常量有機肥和高量有機肥處理。低地下水位有利于土壤無機磷的積累。不同稻作制間,Fe-P的絕對含量和相對含量均為稻-稻-冬泡、稻-稻-油菜>稻-稻-綠肥;在同一稻作制下,隨著年際的變化,Ca2-P、Ca10-P和Fe-P含量有下降的趨勢,而Al-P、O-P和Ca8-P含量都有增大的趨勢;不同施肥量處理間,Ca10-P、Fe-P和Al-P的絕對含量和相對含量均為化肥處理>常量有機肥、高量有機肥處理;在同一種有機肥施用量處理下,隨著年際的變化,Ca2-P、Ca10-P和Fe-P含量都有下降的趨勢,而Al-P、O-P和Ca8-P含量則都有上升趨勢。不同地下水位處理,低水位(-80 cm)處理的Ca10-P和Fe-P含量大于高水位(-20 cm)處理,低水位(-80 cm)處理的Ca2-P和O-P含量小于高水位(-20 cm)處理;在同一地下水位下,隨著年際的變化,Ca2-P和Fe-P含量有下降的勢,而Al-P、O-P和Ca8-P含量都有上升趨勢。【結論】冬季種植作物,土壤無機磷含量減少,而冬季施用綠肥,可使Fe-P含量減少;單純施用化肥,可使無機磷含量和Ca10-P、Fe-P和Al-P增加;低地下水位有利于土壤無機磷的積累。

    加權空間模糊動態聚類算法在土壤肥力評價中的應用
    陳桂芬,曹麗英,王國偉
    中國農業科學. 2009, 42(10):  3559-3563 .  doi:10.3864/j.issn.0578-1752.2009.10.0022
    摘要 ( 843 )   PDF (369KB) ( 724 )   收藏
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    【目的】改進和提高空間模糊聚類算法。【方法】首先利用層次分析法得到各屬性的權值,然后將權值與空間模糊動態聚類法相結合,最后利用概率統計中的F分布來確定最佳分類,以提高空間模糊聚類算法的智能性。【結果】加權空間模糊動態聚類算法與基于模糊等價關系的傳遞閉包方法進行比較表明,當λ取0.993時,F值最大,分類效果最好。此時,加權的F值為4.898,未加權的F值為2.957,說明加權的類間的差距比未加權的明顯,即該算法聚類準確率要明顯高于未加權的模糊聚類算法。【結論】將其改進的算法運用到精準農業的土壤肥力評價中,試驗結果與實際情況相符,證明了該算法的有效性。

    耕作方式對還田稻草氮素釋放及水稻氮素利用的影響
    梁天鋒,徐世宏,劉開強,王殿君,梁和,董登峰,韋善清,莫潤秀,曾可,江立庚
    中國農業科學. 2009, 42(10):  3564-3570 .  doi:10.3864/j.issn.0578-1752.2009.10.0023
    摘要 ( 867 )   PDF (275KB) ( 959 )   收藏
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    【目的】探討在免耕和常耕條件下,還田稻草氮素釋放特性和水稻氮素利用的差異。【方法】2006年和2007年晚稻,在田間將稻草還田,并在不同時期測定稻草中殘留的氮素,同時進行桶栽試驗,將15N標記稻草還田,成熟期測定水稻積累的總氮素和15N豐度。【結果】稻草中殘留的氮素隨還田時間延長而下降,但不同時間段下降的速度差異很大。還田后0~40 d,稻草中殘留的氮素下降約60%,還田后40~100 d,稻草中殘留的氮素下降約10%。兩種耕作方式下還田稻草含氮率均呈升高趨勢。無論是干稻草還是濕稻草還田,免耕條件下稻草氮素平均釋放速率高于常耕。免耕方式下濕稻草的氮素釋放速率較高,常耕方式下干稻草氮素釋放速率較高。【結論】無論還田稻草狀態相同與否,常耕水稻的氮素干物質生產效率和產量較免耕水稻高。免耕有利于還田稻草的氮素釋放,但水稻從還田稻草中吸收的氮素和氮素利用效率下降。

    園藝
    番茄分子遺傳圖譜構建和晚疫病抗性基因簇ph-3的QTL分析
    黃曉梅,許向陽,李景富,陳秀玲,徐艷輝
    中國農業科學. 2009, 42(10):  3571-3580 .  doi:10.3864/j.issn.0578-1752.2009.10.0024
    摘要 ( 1078 )   PDF (1212KB) ( 836 )   收藏
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    【目的】挖掘番茄晚疫病抗性基因緊密連鎖的分子標記,為番茄抗晚疫病種質資源的利用及分子標記輔助選擇育種提供理論和實踐依據。【方法】利用含番茄晚疫病抗性基因ph-1,2,3的L3708(Lycopersicon.pimpinellifolium)為父本,感病的優良品系04968(L.esculentum)為母本培育的260個F2單株為圖譜構建群體,通過AFLP、SSR 2種分子標記進行遺傳分析,構建分子遺傳圖譜。根據苗期接種番茄晚疫病病原菌生理小種T1,2的抗性反應,利用復合區間作圖法,進行QTL定位。【結果】構建了包含12個連鎖群的分子遺傳圖譜,其中包含3個SSR標記和149個AFLP標記。該圖譜覆蓋整個基因組總長度1 443.07 cM,平均圖距9.50 cM。檢測到了5個與抗性基因簇ph-3相關的QTL位點,其中Qph3-1位于第3連鎖群上,可以解釋的表型變異為26.59% 。Qph3-2位于第1染色體上,可以解釋的表型變異為54.86%,Qph3-3、Qph3-4和Qph3-5,位于第9連鎖群上,可以解釋的表型變異分別為9.24%、10.27%和36.49%。QTL 遺傳效應表現為加性和顯性。【結論】所得5 個分子標記可作為選育抗晚疫病番茄品種的重要分子標記輔助選擇工具。

    利用Cre/lox重組系統建立番茄基因工程雄性不育恢復系
    宋洪元,任雪松,司軍,李成瓊,宋明,雷建軍
    中國農業科學. 2009, 42(10):  3581-3591 .  doi:10.3864/j.issn.0578-1752.2009.10.0025
    摘要 ( 811 )   PDF (961KB) ( 862 )   收藏
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    【目的】利用Cre/lox重組系統具有的重組刪除特性建立番茄工程恢復系,特異刪除F1中的雄性不育基因恢復其育性。【方法】將TA29-Barnase雄性不育基因表達盒置于兩個同向lox位點之間并與NPTⅡ基因、Bar基因融合后獲得植物表達載體pBinBarloxTABn,轉化番茄獲得雄性不育轉基因植株。Cre基因在 CaMV35S啟動子的驅動下轉入番茄獲得工程恢復系。兩者在開花時進行雜交,利用Cre重組酶刪除F1中的TA29-Barnase不育基因表達盒使育性恢復。【結果】利用NPTⅡ作為轉化篩選標記基因獲得了番茄雄性不育轉基因植株。轉基因植株中的Bar基因能正常表達,真葉葉盤在含PPT 3 mg?L-1(phosphinothricin)分化培養基上能分化愈傷組織及芽;真葉具有抗PPT 20 mg?L-1濃度以上的能力。獲得的TA29-Barnase轉基因植株表現雄蕊退化、無花粉產生或產生少量形狀畸形且無生活力的花粉。雄性不育植株自花授粉不能坐果,用非轉基因保持系花粉授粉后,果實正常膨大結籽,雜交后代對除草劑Basta的抗性按1﹕1分離。不育植株與Cre轉基因工程恢復系雜交后,果實也正常膨大結籽。對不育植株與Cre轉基因工程恢復系雜交后代進行分子檢測,結果發現同時含Bar 基因和Cre基因F1植株中的TA29-Barnase雄性不育基因被精確刪除。TA29-Barnase基因刪除植株育性被恢復,能正常開花結果。【結論】利用Cre/lox重組系統建立的Cre工程恢復系成功將番茄F1代中的不育基因刪除,恢復了 F1的育性。該研究結果為植物基因工程雄性不育系的育性恢復提供了一條新的途徑。

    夜間低溫對薄皮甜瓜果實糖積累及代謝相關酶活性的影響
    郝敬虹,李天來,孟思達,趙 博,孫利萍
    中國農業科學. 2009, 42(10):  3592-3599 .  doi:10.3864/j.issn.0578-1752.2009.10.0026
    摘要 ( 845 )   PDF (420KB) ( 1099 )   收藏
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    【目的】探討夜間低溫脅迫下薄皮甜瓜果實糖代謝的變化規律。【方法】以薄皮甜瓜(Cucumis melo L.)‘玉美人’為試材,利用人工氣候室模擬設施生產中的夜間低溫脅迫環境,研究夜間低溫對薄皮甜瓜果實糖含量及其代謝相關酶活性的影響。【結果】不同的夜間低溫脅迫對果實糖含量的影響程度不同。夜間9℃處理3 d后顯著降低了果糖和葡萄糖含量,在處理的中后期蔗糖、棉籽糖和水蘇糖含量才顯著降低而肌醇半乳糖苷無顯著差異;同時,夜間9℃處理3 d后,果實中總糖含量極顯著低于對照,且隨處理時間的延長差異更大;夜間9℃處理3~12 d,果實中淀粉含量明顯高于對照。夜間12℃處理對果實中可溶性糖含量無明顯影響,但明顯增加了淀粉含量,且后期差異極顯著。從不同的夜間低溫對果實內糖代謝相關酶活性的影響來看,夜間9℃處理增強了酸性轉化酶(AI)、中性轉化酶(NI)、堿性α-半乳糖苷酶活性,降低了蔗糖合成酶(SS)、蔗糖磷酸合成酶(SPS)活性,差異均達到顯著或極顯著水平。夜間12℃處理對各種酶活性影響不大,差異不顯著。【結論】夜間9℃處理嚴重影響薄皮甜瓜果實糖積累及其代謝相關酶活性;夜間12℃處理對果實糖積累及其代謝相關酶活性無明顯影響,夜間12℃可能是薄皮甜瓜果實中糖代謝發生改變的臨界低溫。以上表明,夜間9℃脅迫條件下,薄皮甜瓜果實中蔗糖代謝、水蘇糖代謝及淀粉代謝能力的下降共同影響果實的膨大生長和品質。

    普通煙草CDPK基因家族的克隆及表達分析
    太帥帥,劉貫山,孫玉合,陳珈
    中國農業科學. 2009, 42(10):  3600-3608 .  doi:10.3864/j.issn.0578-1752.2009.10.0027
    摘要 ( 1151 )   PDF (705KB) ( 1258 )   收藏
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    【目的】從煙草中分離更多CDPK基因,分析該基因家族的序列特征、進化關系和表達譜,為全面揭示其功能奠定基礎。【方法】采用RT-PCR、RACE和生物信息學的方法,分離普通煙草CDPK基因;采用MEGA4.0軟件構建系統進化樹;利用RT-PCR研究普通煙草全長基因的表達譜。【結果】分離到普通煙草CDPK基因8個,其中3個可以找到完整的開放讀碼框;系統進化樹分析顯示,煙草屬11個全長CDPK基因位于4個亞家族,預測的2對普通煙草和擬南芥的直系同源基因在功能上可能非常保守;3個普通煙草全長基因雖然在所有的組織中都能檢測到,但是它們的表達譜在不同的組織間存在明顯差異。【結論】分離到8個未報道的普通煙草CDPK基因,結合已有的報道,目前在普通煙草中獲得了15個CDPK基因,為在基因組范圍內研究普通煙草CDPK基因家族的功能奠定了基礎。

    貯藏·保鮮·加工
    超濾法分離蘋果果膠及其理化性質
    仇農學,田玉霞,鄧 紅,郭玉蓉,喬書濤
    中國農業科學. 2009, 42(10):  3609-3616 .  doi:10.3864/j.issn.0578-1752.2009.10.0028
    摘要 ( 885 )   PDF (426KB) ( 900 )   收藏
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    【目的】對蘋果果膠超濾法分離條件和不同相對分子質量的果膠與其結構及性質的關系進行研究。【方法】采用5種不同截流分子量的超濾膜分離蘋果果膠,通過傅立葉變換紅外光譜儀和氣相色譜儀分別測定不同相對分子質量蘋果果膠的結構和單糖組成。【結果】在跨膜壓差為0.08 MPa,料液濃度為1 g?L-1,50℃條件下,獲得6種不同相對分子質量的果膠。相對分子質量與其理化性質有著對應的關系,果膠半乳糖醛酸含量、酯化度和膠凝度隨相對分子質量增大而增大,單糖組分也隨相對分子質量增大而增多。同時,超濾對果膠液的脫色有良好作用。【結論】本研究可作為蘋果果膠深度開發的新方法。

    外源乙醛對中熟和晚熟桃果實采后活性氧代謝的影響
    李建黎,韓濤,李麗萍,孫宇婧,張微娜,張海英
    中國農業科學. 2009, 42(10):  3617-3624 .  doi:10.3864/j.issn.0578-1752.2009.10.0029
    摘要 ( 802 )   PDF (382KB) ( 576 )   收藏
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    【目的】研究外源乙醛處理對桃果實采后活性氧代謝的影響。【方法】以中熟品種‘久保’和晚熟品種‘綠化9號’桃為試材,用0、0.25、0.50 和 1.00 ml?L-1 乙醛處理果實 12 h ,研究桃果實在(20±1)℃與(0±1)℃貯藏期間活性氧代謝的變化。【結果】在2種貯藏溫度下,1.00 ml?L-1乙醛處理提高了桃果實超氧化物歧化酶(SOD)、過氧化氫酶(CAT)和過氧化物酶(POD)的活性,降低了超氧負離子游離基( )生成速率和過氧化氫(H2O2)含量;0.50 ml?L-1處理在室溫下降低了 生成速率和H2O2含量,提高了SOD和POD的活性,但對CAT活性的影響不顯著,在0℃下,0.50 ml?L-1處理效果不明顯;0.25 ml?L-1處理在2種貯藏溫度下效果均不明顯。在貨架期間,不同處理間這些變化的差異不明顯。【結論】在2種貯藏溫度下,適當濃度的外源乙醛處理可有效延緩桃果實活性氧代謝。

    宰前因子對牛肉品質的影響
    杜燕,張佳,胡鐵軍,羅欣
    中國農業科學. 2009, 42(10):  3625-3632 .  doi:10.3864/j.issn.0578-1752.2009.10.0030
    摘要 ( 868 )   PDF (373KB) ( 1071 )   收藏
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    【目的】探討宰前因子對牛肉品質的影響,得出DFD(dark firm dry)牛肉的判定標準。【方法】研究某企業DFD肉的發生率,并挑選600頭延邊×西門塔爾雜交公牛進行不同的宰前處理,通過測量牛胴體背最長肌的pH、溫度以及品質指標,對劣質牛肉的發生率及牛肉品質進行分析。【結果】宰前因子中待宰密度、溫濕度以及短途運輸對DFD肉的發生影響不大;而屠宰時間、季節、待宰時間和屠宰方式對劣質牛肉(PSE肉、DFD肉)的發生都有不同程度的影響;牛肉品質的顏色指標中b*比L*更具有作為判定劣質牛肉標準的意義;DFD牛肉的判定標準為pH24>6.09,L*<37.40±3.78,b*<10.25±1.94,汁液損失值<7.36%±2.81%。【結論】在冬季清晨,待宰24 h、擊暈屠宰的肉牛DFD肉發生率較低;夏季、清真屠宰的肉牛PSE肉發生率較高;科學、規范的宰前管理可以降低肉牛的應激反應,有效減少劣質牛肉的發生;牛肉pH24>6.09,品質會產生較大的差異。

    畜牧·資源昆蟲
    促黃體素對綿羊卵母細胞體外成熟核質同步化的影響
    李凱,倪和民,趙雁偉,劉云海,曲楊燕,李曉燕,郭勇
    中國農業科學. 2009, 42(10):  3633-3638 .  doi:10.3864/j.issn.0578-1752.2009.10.0031
    摘要 ( 874 )   PDF (364KB) ( 727 )   收藏
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    【目的】研究促黃體素(LH)對綿羊卵母細胞體外成熟和體外受精的影響。【方法】將綿羊卵母細胞置于含LH(處理組)或不含LH(對照組)的成熟液中進行體外成熟,在不同時間點取出,觀察卵母細胞核成熟情況;結合皮質顆粒分布變化的觀察結果判斷細胞質成熟情況。【結果】綿羊卵母細胞體外成熟4 h時,處理組生發泡破裂(GVBD)率顯著低于對照組(36.76% vs 50%,P<0.05);體外成熟24 h并進行體外受精后,處理組卵母細胞卵裂率和囊胚率顯著高于對照組(67.15% vs 42.37%,21.9% vs 12.71%,P<0.05)。激光共聚焦掃描檢測結果表明,隨著核的成熟,綿羊卵母細胞的皮質顆粒由胞質中心區域向周邊發生規律性遷移,經LH處理的卵母細胞,皮質顆粒擴散的程度明顯好于對照組。【結論】LH可能通過延遲生發泡破裂和促進胞質成熟的方式,使綿羊卵母細胞的核質成熟趨于同步,有助于綿羊卵母細胞的體外成熟以及受精后的進一步發育。

    嶗山奶山羊微衛星標記與泌乳性狀的相關分析
    李成渤,王桂芝,紀志賓,戈 新,李培培,王建華,王建民
    中國農業科學. 2009, 42(10):  3639-3646 .  doi:10.3864/j.issn.0578-1752.2009.10.0032
    摘要 ( 891 )   PDF (766KB) ( 859 )   收藏
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    【目的】探討微衛星DNA作為嶗山奶山羊泌乳性狀遺傳標記的可行性。【方法】根據比較基因組遺傳圖譜,選擇奶牛6、14、15號染色體上與泌乳性狀相關聯的微衛星座位(BM1329、BM143、BM302、CSSM66和BMS0812),對175只嶗山奶山羊泌乳母羊進行多態性檢測,采用最小二乘方法分析微衛星座位與泌乳性狀之間的關聯效應。【結果】所選微衛星座位在嶗山奶山羊群體中均表現出豐富的遺傳多態性,有效等位基因、觀察雜合度、多態信息含量和近交系數的平均值分別為3.9924、0.4667、0.6748 和0.347。基因座CSSM66對乳脂率和300 d泌乳量均有顯著效應(P<0.05),最有利的基因型分別為210/210和194/194,具有正效應的等位基因分別為210和194;BM302對300 d泌乳量有極顯著效應(P<0.01),最有利的基因型為156/150,具有正效應的等位基因為156和150;基因座BM143對乳脂率有顯著效應(P<0.05), 對乳蛋白率有極顯著效應(P<0.01),最有利基因型分別為114/100和100/100,等位基因114和100對乳脂、乳蛋白均有正效應;基因座BM1329對乳脂率有顯著效應(P<0.05),最有利的基因型為182/180。【結論】發現了對嶗山奶山羊泌乳性狀有顯著效應、多態性較高的微衛星基因座,為開展嶗山奶山羊的標記輔助選擇提供了有價值的遺傳標記。

    PPARγ基因5'側翼區單倍型與雞生長和體組成性狀的相關研究
    韓青,王守志,戶國,李輝
    中國農業科學. 2009, 42(10):  3647-3654 .  doi:10.3864/j.issn.0578-1752.2009.10.0033
    摘要 ( 1063 )   PDF (413KB) ( 706 )   收藏
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    【目的】研究PPARγ基因5'側翼區多態性及其單倍型效應對雞生長和體組成性狀的影響,尋找影響肉雞生長和體組成性狀的QTL,為分子標記輔助選擇提供相應依據。【方法】以東北農業大學肉雞高、低腹脂雙向選擇品系第8、9和10世代肉仔雞為試驗材料,采用測序、PCR-RFLP等方法進行多態性位點檢測及基因型分析。利用基因型信息重構單倍型并分析不同單倍型與生長和體組成性狀的關系。【結果】PPARγ基因5'側翼區存在3個多態性位點(g.-1784_-1768del17,c.-1241G>A及c.-75G>A),利用其構建的單倍型對腹脂重、腹脂率、肝臟重、肝臟比例、脛骨長、股骨重、龍骨長、跖骨圍等性狀有顯著影響(P<0.05);對胸大肌重、胸小肌重、胸小肌率、跖骨長等性狀具有一定的影響(P<0.2)。最小二乘分析結果表明,對于腹脂重、腹脂率等性狀,BGA單倍型個體顯著高于其它單倍型個體(P<0.05);相對于其它單倍型個體,AAG單倍型個體有較高的肝臟重、肝臟比例、胸小肌重和胸小肌率(P<0.05);在股骨重、脛骨長、跖骨長、跖骨圍、龍骨長等骨骼生長發育性狀方面,AAG單倍型個體顯著優于AGG單倍型個體(P<0.05)。【結論】PPARγ基因5'側翼區可能存在影響雞脂肪性狀的QTL,PPARγ基因可能是影響雞骨骼性狀的重要基因之一。

    湖羊BMP2、BMP4、BMP6和BMP7基因mRNA表達水平與排卵數關系的研究
    徐業芬,李齊發,李二林,涂飛,胡冬利,謝莊,陳玲
    中國農業科學. 2009, 42(10):  3655-3661 .  doi:10.3864/j.issn.0578-1752.2009.10.0034
    摘要 ( 956 )   PDF (487KB) ( 719 )   收藏
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    【目的】研究湖羊卵巢組織BMP2、BMP4、BMP6和BMP7基因mRNA表達水平與排卵數的相關性,篩選影響湖羊多胎性狀的候選基因,為揭示湖羊高繁多胎分子遺傳機理提供參考。【方法】選取16只經產湖羊母羊,分為產單羔組和多羔組,發情后24~36 h屠宰,取卵巢,計數排卵點,記錄排卵數;應用RT-PCR技術檢測BMP2、BMP4、BMP6和BMP7基因的組織表達特征,進一步利用實時熒光定量PCR技術分析各基因mRNA在單羔組和多羔組卵巢組織中的表達差異。【結果】BMP2、BMP4和BMP7基因在湖羊母羊卵巢組織內表達,而且在垂體及下丘腦、子宮、心臟、肝臟、脾臟、肺臟、腎臟、肌肉、輸卵管組織中均有表達;BMP6基因僅在湖羊母羊卵巢、腎臟、肌肉和輸卵管組織中表達。在卵巢組織,多羔組排卵數極顯著高于單羔組(P<0.01),且多羔組BMP4基因mRNA表達極顯著高于單羔組(P<0.01),而BMP2、BMP6和BMP7基因mRNA表達在單羔組和多羔組間無顯著差異(P>0.05);相關分析表明在卵巢組織中,只有BMP4基因mRNA表達與排卵數呈正相關(r = 0.741,P <0.05)。【結論】BMP4基因mRNA表達在單羔組和多羔組間差異顯著,可能對湖羊排卵數起關鍵作用,是影響湖羊排卵數的候選基因。

    西藏3種瘋草中合成苦馬豆素內生真菌的鑒定
    余永濤,王建華,王 妍,宋毓民,耿果霞,李勤凡
    中國農業科學. 2009, 42(10):  3662-3671 .  doi:10.3864/j.issn.0578-1752.2009.10.0035
    摘要 ( 899 )   PDF (528KB) ( 680 )   收藏
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    【目的】從西藏毛瓣棘豆、冰川棘豆、莖直黃芪中分離內生真菌。【方法】應用薄層色譜法、氣相色譜、氣相色譜-質譜聯用法檢測內生真菌中的苦馬豆素(swainsonine,SW),篩選可生成SW的內生真菌;應用聚合酶鏈反應對真菌的ITS序列和IGS序列進行擴增,并根據ITS序列信息構建系統發育樹,確定其種屬分類;對IGS序列進行限制性酶切,并分析酶切產物。【結果】從3種瘋草中分離到可以產生SW的4株內生真菌,各菌的形態、ITS序列的同源性與埃里格孢屬真菌較為接近,系統發育分析表明4株真菌均為棘豆埃里格孢菌。ITS序列和IGS序列的限制性片段的分析表明,4株真菌遺傳距離較近,但仍存在種間變異,可能為棘豆埃里格孢菌的不同亞種。【結論】本研究結果為探討內生真菌合成SW機理研究奠定了基礎,為動物瘋草中毒病的防除和瘋草資源的合理利用提供了新思路。

    獸醫
    表達豬輪狀病毒VP4基因重組乳酸球菌表達載體構建及免疫原性分析
    李桂偉,喬薪瑗,劉伯臣,馬廣鵬,劉 敏,劉力威,李一經
    中國農業科學. 2009, 42(10):  3672-3678 .  doi:10.3864/j.issn.0578-1752.2009.10.0036
    摘要 ( 882 )   PDF (462KB) ( 665 )   收藏
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    【目的】構建豬輪狀病毒主要保護性抗原VP4基因的重組乳酸乳球菌口服疫苗,為豬輪狀病毒的防治提供有效方法。【方法】將豬輪狀病毒免疫保護性抗原基因VP4主要結構功能區定向插入乳酸菌表面表達載體pNZ8112,電轉化乳酸乳球菌NZ9000,構建了pNZ8112/NZ9000乳酸乳球菌表面表達系統。通過SDS-PAGE、Western-blot和免疫熒光方法鑒定,以此活菌系統口服免疫6~8周齡Balb/c小鼠,測定了免疫動物的局部體液免疫和系統免疫應答。【結果】證明插入的外源基因在菌體表面得到了正確表達,表達豬輪狀病毒免疫保護性抗原的重組乳酸乳球菌免疫動物后,分別在糞便、淚液和陰道洗液中檢測到了特異性分泌型IgA抗體和在血液中檢測到了IgG抗體的存在;體外細胞中和試驗結果表明,血清抗體對豬輪狀病毒的中和效價為1﹕40。【結論】表達豬輪狀病毒免疫保護性抗原的重組乳酸乳球菌口服免疫動物能夠產生良好的局部和系統體液免疫應答而且具有免疫中和效力。

    雛雞服用AvBD13后體液免疫的動態變化
    楊玉榮,佘銳萍,梁宏德
    中國農業科學. 2009, 42(10):  3679-3684 .  doi:10.3864/j.issn.0578-1752.2009.10.0037
    摘要 ( 826 )   PDF (418KB) ( 576 )   收藏
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    【目的】探討防御素AvBD13對雛雞體液免疫的影響。【方法】雛雞的飲水從1日齡添加AvBD13(1 μg?ml-1),分別于1、4、7、10、17日齡隨機采集雛雞的血液、脾臟、法氏囊、十二指腸、空腸和盲腸。分別采用MTT方法、ELISA方法和免疫組織化學方法檢測外周血液B淋巴細胞增殖功能、血清的免疫球蛋白含量和免疫器官、腸道的抗體生成細胞數量。【結果】與對照組比較,AvBD13明顯提高了4~10日齡雛雞血清中IgG和10~17日齡雛雞血清中IgM含量(P<0.05),提高了4~7日齡雛雞脾臟紅髓和法氏囊中IgG和IgM生成細胞數量(P<0.05)。AvBD13組雛雞腸道的IgG和IgM生成細胞的數量在4~10日齡高于對照組雛雞,但無統計學差異(P>0.05), 僅盲腸扁桃體的IgA生成細胞數量在4日齡明顯高于對照組雛雞(P<0.05)。【結論】雛雞口服AvBD13能夠明顯提高其系統體液免疫,對腸道黏膜體液免疫提高較小,AvBD13對免疫器官和局部黏膜免疫組織具有一定的選擇特異性。

    鴨β-防御素2基因的克隆、表達和表達產物的生物學特性分析
    王瑞琴,廖文艷,馬得瑩,韓宗璽,劉勝旺
    中國農業科學. 2009, 42(10):  3685-3692 .  doi:10.3864/j.issn.0578-1752.2009.10.0038
    摘要 ( 876 )   PDF (436KB) ( 653 )   收藏
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    【目的】從鴨組織中克隆鴨β-防御素(AvBD)2基因,在大腸桿菌中高效表達,檢測重組鴨AvBD2蛋白的生物學特性。【方法】應用RT-PCR技術從鴨胰腺組織中擴增鴨AvBD2基因,根據已發現的禽β-防御素和部分哺乳類動物β-防御素-2的氨基酸序列構建系統進化樹,將該基因克隆到大腸桿菌原核表達載體pGEX-6p-1上進行原核表達,對該重組蛋白進行純化,測定體外抗菌活性與理化特性。【結果】鴨胰腺組織中克隆出鴨AvBD2基因的cDNA大小為195 bp,編碼64個氨基酸。同源性分析表明,鴨AvBD2與其它物種AvBD2同源性較高。凝膠電泳結果顯示重組鴨AvBD2蛋白在原核高效表達(分子量約為32 kD),對多殺性巴氏桿菌、金黃色葡萄球菌、枯草芽胞桿菌有較高抗菌活性,對大腸桿菌與豬霍亂沙門氏菌的抗菌活性較弱。重組鴨AvBD2蛋白對上述細菌的最小抑菌濃度為15.25~125 μg?ml-1,對豬霍亂沙門氏菌最小抑菌濃度大于400 μg?ml-1。重組鴨AvBD2蛋白在-20~100℃或pH 3~12條件下處理30 min后仍有抗金黃色葡萄球菌作用。【結論】克隆并表達了鴨AvBD2基因,表達產物具有抗菌活性,對溫度和酸堿度有較高的穩定性。

    轉染技術在頂復門原蟲研究中的應用
    閆文朝,王天奇,索勛,趙戰勤,韓利方
    中國農業科學. 2009, 42(10):  3693-3699 .  doi:10.3864/j.issn.0578-1752.2009.10.0039
    摘要 ( 837 )   PDF (295KB) ( 763 )   收藏
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    自1993年轉染技術首次在弓形蟲中成功報道以來,頂復門原蟲的轉染研究得到了快速發展,不僅在弓形蟲、瘧原蟲和住肉孢子蟲等實現了穩定轉染,而且在體外細胞上生長效率較低的柔嫩艾美耳球蟲也相繼實現了瞬時轉染和穩定轉染。頂復門原蟲轉染技術的日漸成熟及其在頂復門原蟲研究中的應用,為頂復門原蟲基因功能和免疫學等領域研究提供了新思路和新的有力工具。本文結合本課題組近幾年來的研究成果,綜述了轉染技術及其在頂復門原蟲基因表達調控、基因功能、耐藥性分子機理、藥物敏感性試驗和免疫學等研究中應用的最新進展。

    伴大豆球蛋白胃蛋白酶水解肽對大鼠腸道細菌區系變化的影響
    左偉勇,陳偉華,鄒思湘,張源淑
    中國農業科學. 2009, 42(10):  3700-3705 .  doi:10.3864/j.issn.0578-1752.2009.10.0040
    摘要 ( 909 )   PDF (423KB) ( 552 )   收藏
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    【目的】在分子水平上探討伴大豆球蛋白水解肽對腸道雙歧桿菌生長的影響。【方法】選取21日齡健康清潔級雄性SD大鼠,隨機分為4個處理,每個處理3只,基礎日糧預飼一周后,分別灌胃生理鹽水(對照組)、伴大豆球蛋白液(Conglycinin組)、伴大豆球蛋白酶水解肽P2組分(P2-PTC組)、伴大豆球蛋白鹽酸徹底水解液(HCl-FHC組),各0.5 ml,1次/天。除對照組外,各處理組灌胃液體總含氮量相等(折合蛋白含量為0.5 mg?ml-1),實驗共21 d。應用PCR-DGGE技術分析灌胃伴大豆球蛋白酶解肽對大鼠糞樣細菌區系變化的影響,并采用連續稀釋PCR的方法半定量研究伴大豆球蛋白酶解肽對大鼠腸道雙歧桿菌數量的影響。【結果】灌胃伴大豆球蛋白酶解肽的大鼠在實驗后第1周,其糞樣微生物區系變化迅速,而后緩慢,最終形成穩定的體系,提示酶解肽在一定程度上影響了腸道細菌的組成,與對照組和蛋白鹽酸徹底水解液組比較,腸道雙歧桿菌數量明顯增加。【結論】本試驗在分子水平證明了伴大豆球蛋白水解肽對腸道雙歧桿菌的生長有促進作用。

    研究簡報
    哈克尼西棉細胞質雄性不育系和保持系差異表達基因分析
    馬勇,吳建勇,邢朝柱,郭立平,鞏養倉,崔明暉,王海林
    中國農業科學. 2009, 42(10):  3706-3712 .  doi:10.3864/j.issn.0578-1752.2009.10.0041
    摘要 ( 883 )   PDF (475KB) ( 715 )   收藏
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    【目的】通過篩選哈克尼西棉細胞質雄性不育系和保持系間敗育關鍵時期花藥中差異表達的基因,為進一步揭示棉花雄性不育機理,更好地利用棉花細胞質雄性不育材料奠定基礎。【方法】以哈克尼西棉細胞質雄性不育系和保持系間敗育關鍵時期,即花粉母細胞時期之前的花藥為研究材料,應用cDNA-AFLP技術分離和鑒定兩材料間差異表達的片段,并對差異片段進行驗證、克隆、測序和生物信息學分析。【結果】共得到108個差異表達片段,其中67個被成功克隆,通過BLAST分析發現,29個片段可以在NCBI數據庫中找到同源序列,對這些序列進行Gene Ontology分析后得知這些片段主要參與信號轉導、轉錄、能量代謝、細胞壁發育等相關過程。其中,在兩材料間還分離到一些與RNA編輯和雄配子發育相關的基因存在差異表達,而這些可能與棉花細胞質雄性不育相關。【結論】本研究通過cDNA-AFLP的分析,在棉花細胞質雄性不育系和保持系間分離到了108個差異表達的片段,通過對這些片段的分析,對兩材料間差異表達的基因信息有了一個基本了解,這些結果為更好地了解棉花細胞質雄性不育發生過程相關基因的調控網絡,揭示棉花雄性不育機理打下基礎。

    種子引發對高粱幼苗耐鹽性的生理效應
    馬金虎,王宏富,王玉國,李新基,韋獻果
    中國農業科學. 2009, 42(10):  3713-3719 .  doi:10.3864/j.issn.0578-1752.2009.10.0042
    摘要 ( 1107 )   PDF (217KB) ( 617 )   收藏
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    【目的】探討種子引發對高粱幼苗耐鹽性及其生理效應的影響。【方法】用100 mmol?L-1NaCl溶液和20%PEG溶液對甜飼1號、Tx623A×89-363、黑30A×05-244和晉雜17共4個高粱雜交種進行引發處理。采用營養沙培試驗,設置0、50、100和150 mmol?L-1NaCl溶液模擬鹽脅迫。研究引發處理對NaCl脅迫下,種子發芽、幼苗耐鹽性及其幼苗生理效應的影響。【結果】引發處理不同程度提高了4個品種幼苗的耐鹽指數和耐鹽比率。提高了鹽脅迫下種子的發芽勢、發芽率、發芽指數、活力指數,且以NaCl溶液引發效果最明顯。在100 mmol?L-1NaCl溶液脅迫過程中,特別是在鹽脅迫后期,經NaCl溶液引發處理后,4個品種幼苗葉片SOD、POD活性和脯氨酸含量都比未引發處理高。【結論】采用合理的種子引發技術可以有效提高高粱苗期的耐鹽性,解決鹽漬地種植高粱出苗差、保苗難問題。種子引發通過提高鹽脅迫下高粱幼苗保護酶活性及滲透調節物質含量等,增強了幼苗的耐鹽性。

    牛耳楓提取物對甜菜夜蛾酚氧化酶的抑制作用
    劉偉,肖婷,杜磊,薛超彬,楊帆,羅萬春
    中國農業科學. 2009, 42(10):  3720-3725 .  doi:10.3864/j.issn.0578-1752.2009.10.0043
    摘要 ( 986 )   PDF (243KB) ( 778 )   收藏
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    【目的】篩選對甜菜夜蛾(Spodoptera exigua(Hübner))酚氧化酶具有高抑制活性的化合物,尋找新型害蟲控制劑的線索。【方法】以牛耳楓(Daphniphyllum calycinum Benth.)提取物Deoxycalyciphylline B和Methyl homosecodaphniphyllate為抑制劑,采用酶標儀微量法研究了其對甜菜夜蛾酚氧化酶的抑制活性及抑制類型。【結果】Deoxycalyciphylline B和Methyl homosecodaphniphyllate對甜菜夜蛾酚氧化酶的抑制中濃度(IC50)分別為2.439 mmol?L-1和0.879 mmol?L-1,2種化合物均為典型的可逆競爭型抑制劑,抑制常數(Ki)分別為2.051 mmol?L-1和1.269 mmol?L-1。【結論】2種生物堿對甜菜夜蛾酚氧化酶具有較好的抑制活性,可以以這2種化合物或其類似物為模板指導酶抑制劑的分子設計,是尋找新型害蟲控制劑的重要途徑。

    SIMETAW模型在遼西北地區的驗證與應用
    史金麗,王立剛,邱建軍,任天志,耿旭,楊曉光,孫占祥
    中國農業科學. 2009, 42(10):  3726-3733 .  doi:10.3864/j.issn.0578-1752.2009.10.0044
    摘要 ( 1048 )   PDF (340KB) ( 814 )   收藏
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    【目的】驗證美國加州大學開發的作物蒸散量-SIMETAW(simulation of evapotranspiration of applied water)模型在中國遼西北地區應用的有效性。【方法】利用遼西北地區的作物、土壤和氣候數據運行模型,將當地主要作物蒸散量的模型模擬值與田間實測值進行對比分析;同時,在模型驗證的基礎上模擬分析當地主要作物生育期內蒸散量和所需灌水量的多年平均情況。【結果】主要作物生育時期內模型模擬的蒸散強度曲線和實測曲線變化趨勢基本一致,蒸散總量模擬值和實測值比較接近,相對誤差均在10%之內。利用模型模擬當地玉米、大豆和谷子生育期內蒸散量多年平均值分別為514.15、449.64和389.12 mm,所需灌水量分別為208.4、220.93和116.17 mm。【結論】SIMETAW模型在遼西北地區對玉米、大豆和谷子蒸散量的模擬比較準確,模型有效,可以進一步應用該模型開展作物的水分管理研究和指導灌溉。

    低溫弱光條件下砧穗互作對茄子嫁接苗抗冷性的影響
    張曉艷,徐坤
    中國農業科學. 2009, 42(10):  3734-3740 .  doi:10.3864/j.issn.0578-1752.2009.10.0045
    摘要 ( 835 )   PDF (260KB) ( 761 )   收藏
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    【目的】探討茄子砧木及接穗對嫁接苗抗冷性的貢獻大小,為茄子越冬嫁接栽培合理選用品種提供參考。【方法】以抗冷性顯著不同的臺茄(T)和赤茄(C)互為砧穗,采用靠接法進行組合嫁接,測定低溫(10 ℃/2 ℃)脅迫前后嫁接苗葉片電解質滲漏率、丙二醛(MDA)含量及主要滲透調節物質含量的變化。【結果】低溫脅迫下,TC/TC、TC/C、TC/T等組合嫁接苗中臺茄葉片的的電解質滲透率及MDA含量均顯著高于同株的赤茄葉片,但顯著低于T/T,且組合嫁接苗中臺茄葉片的可溶性糖、可溶性蛋白和脯氨酸含量較T/T顯著升高,表明抗冷性較強的赤茄根系及葉片,均對嫁接苗臺茄接穗抗冷性具有正向效應。雖然TC/C的抗冷性較強,TC/TC次之,TC/T較差,但三者均顯著低于C/C,表明抗冷性較弱的臺茄無論根系還是葉片,均對嫁接苗赤茄接穗抗冷性具有負向效應。【結論】由于TC/C的抗冷性顯著高于TC/T,表明嫁接苗抗冷性以根系的貢獻大于接穗。

    柑橘碎葉病毒外殼蛋白基因的克隆和序列分析
    宋震,劉科宏,楊方云,唐科志,李中安,周常勇
    中國農業科學. 2009, 42(10):  3741-3748 .  doi:10.3864/j.issn.0578-1752.2009.10.0046
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    【目的】了解中國CTLV分離物外殼蛋白(CP)基因的變異情況。【方法】對來源于中國不同地區、不同寄主品種的18個柑橘碎葉病毒(CTLV)分離物進行RT-PCR、克隆、測序,應用DNAMAN軟件進行序列分析。【結果】18個分離物的CP基因全長714 nt, 推導的CP含237個氨基酸。CP核苷酸序列及推導的氨基酸序列最大相似性分別為88.5%~99.9%和91.1%~99.6%。與核苷酸序列G289→A或C、A409→C和G414→T的單堿基突變相對應,CTLV外殼蛋白第97、137、138位氨基酸在強、弱毒分離物之間存在差異,多數弱毒分離物為Q97或K97、Q137、H138,而多數強毒分離物為E97、R137或K137、Q138。在根據CP氨基酸序列構建的系統進化樹上,本研究獲得的18個CTLV分離物至少可以劃分為2個組群,其中,在指示植物上表現較弱癥狀的多數(4/6)CTLV分離物劃分在第Ⅰ組群,多數(10/12)CTLV強毒分離物劃分在第Ⅱ組群。【結論】CTLV外殼蛋白基因相對保守,其第289、409、414位堿基在強、弱毒分離物之間存在差異,可能與病毒致病性相關。

    絨山羊生長期次級毛囊cDNA消減文庫的構建及其序列分析
    席海燕,周歡敏,鄭琰
    中國農業科學. 2009, 42(10):  3749-3754 .  doi:10.3864/j.issn.0578-1752.2009.10.0047
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    【目的】構建絨山羊生長期次級毛囊的消減文庫,尋找絨毛生長的相關候選基因。【方法】以生長期次級毛囊cDNA為tester,休止期次級毛囊cDNA為driver,利用抑制性消減雜交技術構建生長期次級毛囊消減文庫并進行生物信息學分析。【結果】構建了具有高消減效率的cDNA文庫。隨機挑取20個陽性克隆進行PCR擴增,插入片段長度主要分布在250~1 000 bp之間。挑取750個克隆進行測序,得到342條有效序列,平均長度596 bp。進行同源性分析,有298個與nucleotide數據庫山羊及其它物種的已知序列同源。在EST數據庫中找到38個相似EST序列和6個無同源性序列。對298個已知功能基因的ESTs進行分類,細胞分裂類為13個、細胞信號類為49個、細胞結構蛋白52個、細胞防御類21個、代謝類46個、基因/蛋白表達類37個、未分類的80個。【結論】應用SSH技術,構建了絨山羊生長期和休止期次級毛囊差異表達基因的cDNA文庫,為進一步篩選絨毛生長相關的候選基因奠定了基礎。

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