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當期目錄

    2008年 第41卷 第11期 刊出日期:2008-11-10
      
    作物遺傳育種·種質資源·分子遺傳學
    高等植物功能性分子標記的開發與利用
    楊景華,王士偉,劉訓言,楊加付,張明方
    中國農業科學. 2008, 41(11):  3429-3436 .  doi:10.3864/j.issn.0578-1752.2008.11.001
    摘要 ( 1113 )   PDF (321KB) ( 1968 )   收藏
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    在比較遺傳分析中常用的隨機DNA分子標記及目的基因標記的基礎上,綜述高等植物中最新定義的分子標記類型,即功能性分子標記,它包括間接類型及直接類型的功能性分子標記。功能性分子標記是建立在關聯分析或近等基因系中等位基因的功能性基序中單核苷酸多態性位點基礎上的一類新型顯性分子標記,它不依賴于分子遺傳作圖;利用該標記可大大提高分子標記輔助選擇的效率。

    粳稻十和田/昆明小白谷重組自交系群體主要農藝性狀的低溫反應
    徐福榮,余騰瓊,湯翠鳳,阿新祥,樊傳章,胡意良,張敦宇,董 超,戴陸園
    中國農業科學. 2008, 41(11):  3437-3447 .  doi:10.3864/j.issn.0578-1752.2008.11.002
    摘要 ( 998 )   PDF (367KB) ( 714 )   收藏
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    【目的】培育重組自交系群體是發掘或定位水稻孕穗開花期耐冷性QTL的重要基礎。本研究通過培育“十和田/昆明小白谷”重組自交系群體(RIL),在云南自然低溫條件下,分析RIL的株高、穗長、穗伸出度、單株結實率、特定結實率和穗粒數等主要農藝性狀低溫反應,為耐冷性相關性狀的遺傳分析及QTLs定位等提供研究材料和參考。【方法】以由230個家系組成的“十和田/昆明小白谷”RILs及其親本為試驗材料,2001年在昆明和呈貢,2002年在昆明和劍川,2003年在昆明進行了孕穗開花期耐冷性自然低溫鑒定,并對株高、穗長、穗伸出度、單株結實率、特定結實率和穗粒數等性狀進行方差和相關分析。【結果】株高、穗伸出度和穗粒數3性狀以基因型控制為主,穗長以基因型×環境互作為主,單株結實率和特定結實率以試點環境控制為主。在5種生長環境下,上述6個性狀F值為4.019~97.284,株系間均具有極顯著差異。在每個試點環境條件下,單株結實率與特定結實率都表現出極顯著的正相關關系,相關系數為0.826~0.885;株高與穗長和穗伸出度均表現出極顯著的正相關關系。在5種不同生長環境下6個性狀變異系數大小順序依次是特定結實率(66.3%)>穗伸出度(57.4%)>單株結實率(37.2%)>穗粒數(16.2%)>株高(9.6%)>穗長(6.4%);特定結實率、穗伸出度和單株結實率反應最敏感,穗粒數、株高和穗長不太敏感。【結論】本研究培育的“十和田/昆明小白谷”RIL可作為水稻孕穗開花期耐冷性研究的遺傳材料;特定結實率、穗伸出度和單株結實率是孕穗開花期自然低溫脅迫反應最敏感的性狀指標,株高、穗長和穗粒數的變異與孕穗開花期低溫脅迫的相關程度還有待進一步研究;在水稻孕穗開花期耐冷性自然鑒定評價中,必須進行多年多點的鑒定評價。
    水稻細胞質雄性不育系種子裂穎與漿片性狀的關系
    劉曉霞,張桂蓮,陳立云,肖應輝
    中國農業科學. 2008, 41(11):  3448-3455 .  doi:10.3864/j.issn.0578-1752.2008.11.003
    摘要 ( 944 )   PDF (298KB) ( 798 )   收藏
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    【目的】研究水稻細胞質雄性不育系種子裂穎特性與漿片的關系,揭示不育系種子裂穎的內在原因。【方法】以具有不同裂穎特性的細胞質雄性不育系福伊A、三香A、豐源A、T98A及其相應保持系為材料,對不育系間以及保持系與不育系間漿片的小維管束性狀值、體積、重量、水勢進行方差分析和多重比較,并對不育系漿片的小維管束性狀值、體積、重量、水勢與其種子裂穎率和裂穎度進行相關分析。【結果】與種子裂穎重的不育系相比,種子裂穎輕的不育系漿片小維管束導管面積大、數目多且分布均勻、體積小、重量輕、水勢低;且相應保持系也表現出大致相同的規律。不育系種子裂穎率與漿片單個小維管束的導管面積和數目、單個小維管束平均單個導管面積、整個小維管束的導管面積和數目呈極顯著負相關,與漿片單個導管未退化小維管束單個導管面積、單個小維管束面積、體積、重量、水勢呈(極)顯著正相關。【結論】漿片小維管束導管少且分布不均勻、體積大、重量重、水勢高是不育系種子裂穎重的重要原因之一。
    強優勢多倍體雜交水稻親本的生長特性和開花習性
    劉建新,陳建國,陳冬玲,宋兆建,戴兵成,蔡得田
    中國農業科學. 2008, 41(11):  3456-3464 .  doi:10.3864/j.issn.0578-1752.2008.11.004
    摘要 ( 1171 )   PDF (349KB) ( 703 )   收藏
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    【目的】利用遠緣雜交和多倍體雙重優勢選育超級稻是水稻育種的新戰略,在解決了多倍體水稻育種結實率低的瓶頸問題和選育出一批多倍體秈粳亞種雜交品系的基礎上,重點研究多倍體水稻不育系和恢復系的生長特性和開花勻性,為實現多倍體雜交稻生產打下良好基礎。【方法】從分期播種以及倍性水平上對強優勢多倍體水稻親本恢復系Sg99012、HN2026,不育系PA64S以及對照品種9311、HD9802S的葉齡、分蘗等生長特性進行比較研究。【結果】分期播種對品系的總葉齡數有一定的影響,但對出葉動態變化趨勢的影響不大。四倍體的主莖葉齡總數與其對應二倍體相比有減少的趨勢,出葉速率受環境因子的影響比倍性影響更大。對總分蘗數也有一定的影響,四倍體的分蘗數比其對應二倍體少。加倍品系較其二倍體的單個穎花開放持續時間明顯延長;恢復系9311、HN2026的穎花日開放時間更趨集中,但單穗開花歷期及其高峰期不一致;特別是具有多倍體減數分裂穩定性和高結實特性的PMeS品系HN2026-4X,具有開花期和花時都相對集中,且不易受播期和氣溫影響的特點,可作為優良多倍體恢復系加以利用。【結論】染色體加倍對試驗品系的各種性狀存在一定的影響,但不影響雜交水稻選育中所利用的不育系和恢復系的主要特點。多倍體不育系的不育穩定性和多倍體恢復系的花期花時相對集中等特性更有利于雜交選育。
    人工合成小麥中HMW-GS 6+8和1.5+10的品質效應
    中國農業科學. 2008, 41(11):  3465-3476 .  doi:10.3864/j.issn.0578-1752.2008.11.005
    摘要 ( 1146 )   PDF (307KB) ( 654 )   收藏
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    【目的】研究人工合成小麥中6+8、1.5+10 HMW-GS對小麥主要品質性狀的影響。【方法】選用一份含6+8和1.5+10 HMW-GS的人工合成六倍體小麥Syn-CD780,與栽培品種川育12-1(CY12-1)(亞基組合為1、7+8、2+12)雜交,構建F8重組近交系群體(RIL),分別在3個環境下種植(G05、G06、J06),測定16個品質參數。【結果】(1) 2個親本之間除FY之外,其他品質性狀均存在顯著差異。籽粒和蛋白質參數(TW、GH、GPC、FY、WGC、SED等)的群體均值在G06、J06環境下介于親本之間;粉質儀參數表現不一,群體均值或處于親本之間(FWA、SOF)或親本范圍之外(DST、BRT、QN、NS、LOV等)。(2)所有品質性狀在不同亞基組合之間均存在顯著差異,尤其是GH、SED和大部分粉質儀參數。同一HMW-GS編碼位點上不同等位變異之間的差異,因品質參數而異,并受其它位點的影響。多數品質性狀6+8優于7+8,1.5+10與2+12差異不明顯。(3)不同亞基組合對小麥品質影響較大,LOV和BS以(1、6+8、1.5+10)最高;NS以(1、7+8、1.5+10)最高。NS與FN呈正相關,與其它品質參數的相關性因試驗地點不同而存在較大差異;LOV與SOF呈顯著負相關、與多數品質參數呈顯著正相關。【結論】來自人工合成六倍體小麥中的HMW-GS 6+8優于普通小麥中的7+8,1.5+10則依品質參數和亞基組合方式而異。含HMW-GS 6+8和1.5+10的人工合成小麥在普通小麥品質改良上具有一定潛力。
    黑麥端部特異重復序列pSc200在新合成的不同小麥-黑麥雙二倍體中的變異
    唐宗祥,符書蘭,任正隆,周建平,張懷瓊
    中國農業科學. 2008, 41(11):  3477-3481 .  doi:10.3864/j.issn.0578-1752.2008.11.006
    摘要 ( 1148 )   PDF (297KB) ( 726 )   收藏
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    【目的】更好地了解在小麥-黑麥雙二倍體形成過程中,黑麥染色體變異的情況。【方法】利用黑麥Kustro及黑麥AR106BONE分別與小麥品種綿陽11雜交,獲得兩種雙二倍體(MKS1及MARS1)。以黑麥亞端部串聯重復序列pSc200為探針,采用熒光原位雜交的方法,分析親本黑麥及相應的雙二倍體中黑麥染色體端部染色體結構變化。【結果】檢測到pSc200雜交位點在MKS1中減少,而在MARS1中增加。【結論】異源多倍體化過程中,染色體端部結構的變異是伴隨多倍體化快速發生的。這可能有利于新合成的異源多倍體快速穩定,使得兩個不同的基因組在同一核中協調共存。來自不同組合的小麥-黑麥雙二倍體中,黑麥染色體結構發生不同的變異為黑麥在小麥育種中的應用提供了啟示。
    中國干面條品質性狀的QTL分析
    趙京嵐,陳民生,馬艷明,李瑞軍,任勇攀,孫慶泉,李斯深
    中國農業科學. 2008, 41(11):  3482-3488 .  doi:10.3864/j.issn.0578-1752.2008.11.007
    摘要 ( 1380 )   PDF (305KB) ( 730 )   收藏
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    【目的】分析影響面條品質性狀的QTL,了解面條品質的遺傳控制。【方法】利用RIL群體和QTL分析軟件進行QTL分析。面條感官品質按商業部行業標準(SB/T10137-93)測定,面條質構特性采用英國TA.XTplus型質構儀測定。【結果】檢測到8個面條品質和質構特性的10個加性QTL,分別位于1A、1D、3D、4A和6D等5條染色體,單個QTL貢獻率變化范圍為4.07%~75.67%。在1D染色體Glu-D1附近檢測到一個QTL簇,包括適口性、粘性和光滑性等3個性狀各1個QTL,貢獻率較高,增加效應均來自川35050,QTL間是正相關關系。在4A染色體上Xwmc420-Xswes620-Xswes615之間存在粘性和總分的QTL,貢獻率較高,其增加效應來自親本山農483,是正相關關系。在4A染色體Xswes624c-Xissr25b間食味QTL(QStas.sdau-4A.1)貢獻率高達75.67%,是一個主效基因位點,其增加效應來自親本山農483。【結論】檢測到8個影響面條品質和質構特性的10個加性QTL,分析了其在染色體上的位置和效應。

    中國黍稷核心種質的構建
    胡興雨,王綸,張宗文,陸平,張紅生
    中國農業科學. 2008, 41(11):  3489-3502 .  doi:10.3864/j.issn.0578-1752.2008.11.008
    摘要 ( 981 )   PDF (376KB) ( 1099 )   收藏
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    【目的】構建黍稷種質資源的核心種質。【方法】以中國黍稷種質資源數據庫中記錄的8 016份黍稷資源為材料,按地理來源劃分成23個組。各組內在11個表型性狀聚類的基礎上,按比例法取樣,并依各組的遺傳多樣性指數進行適當調整,構建黍稷核心種質。通過對核心種質各性狀特征值、符合率、遺傳多樣性指數的t檢驗來檢測核心種質。【結果】780份資源組成的初選核心種質占原始材料的9.73%。對構建的核心種質多項參數進行了評價。【結論】本研究建立的核心種質是有效的,初選種質較好地代表了供試種質。

    16個陸地棉染色體置換系產量與纖維品質性狀遺傳效應的初步分析
    欒明寶,郭香墨,張永山,姚金波
    中國農業科學. 2008, 41(11):  3503-3510 .  doi:10.3864/j.issn.0578-1752.2008.11.009
    摘要 ( 1162 )   PDF (219KB) ( 767 )   收藏
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    【目的】評估16個陸地棉染色體置換系的遺傳效應。【方法】采用部分雙列雜交試驗,以16個陸地棉染色體置換系和TM-1為父本,中棉所41、中棉所43、SG506為母本配制51個F1雜交組合,2006年在河南安陽和山東夏津兩地種植,獲得產量、纖維品質性狀數據。利用AD模型軟件分析各性狀的加性和顯性效應。【結果】產量性狀比較,鈴重加性方差比率最大,鈴數最小;顯性方差比率籽棉產量最大,鈴重最小。纖維長度主要表現出加性效應和顯性效應,顯性效應稍大于加性效應,整齊度、麥克隆值、比強度的加性方差比例較大,未檢測到顯性效應。CSB06和CSB12Sh對鈴重的正向加性效應顯著,CSB14Sh、CSB01對纖維品質的4個或3個性狀加性效應顯著,CSB01對產量性狀的顯性效應最大.纖維長度的顯性均表現為正值。【結論】CSB06和CSB12Sh可作為改良鈴重的親本利用,CSB14Sh、CSB01可作為改良纖維品質性狀的親本利用。在雜種優勢利用時,CSB01可作為改良產量性狀的親本,CSB01、CSB11Sh和CSB06可作為改良纖維長度的親本。

    亞洲大豆栽培品種遺傳多樣性、特異性和群體分化研究
    張軍,趙團結,蓋鈞鎰
    中國農業科學. 2008, 41(11):  3511-3520 .  doi:10.3864/j.issn.0578-1752.2008.11.010
    摘要 ( 1306 )   PDF (471KB) ( 1033 )   收藏
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    【目的】研究亞洲大豆栽培品種地理群體的遺傳多樣性、特異性和群體分化。【方法】應用大豆基因組64對SSR分子標記技術,對亞洲216份栽培大豆品種遺傳變異進行分析。【結果】亞洲大豆栽培品種遺傳多樣性豐富,地理群體(中國東北、中國黃淮、中國南方、朝鮮半島、東南亞、南亞)間存在較多互補等位變異數,最多的在中國黃淮與南亞群體間;各地理群體擁有各自特有或特缺的等位變異。亞洲大豆全群SSR標記遺傳距離聚類(聚成6類)與地理群體分類間有極顯著相關性,地理分群有其相應的遺傳基礎。亞洲全群由2類血緣組成,分別占中國國內和國外2大類群的絕大部分;地理群體間2類血緣組成的差異明顯。國內與國外各群體間以中國南方與東南亞群體間分化最小;國外群以東南亞與朝鮮半島群體間分化最小;國內群以中國黃淮與中國南方群體分化最小。【結論】亞洲大豆栽培品種地理群體間具有位點和等位變異的特異性,各群體間可以相互補充的位點及其等位變異甚豐富,利用國外栽培品種可以拓寬中國品種的遺傳基礎。
    甘藍型油菜一個代表性核心種質的遴選
    任麗平,倪西源,黃吉祥,雷偉俠,曹明富,趙堅義
    中國農業科學. 2008, 41(11):  3521-3531 .  doi:10.3864/j.issn.0578-1752.2008.11.011
    摘要 ( 1178 )   PDF (558KB) ( 788 )   收藏
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    【目的】分析甘藍型油菜的遺傳多樣性,遴選核心種質。【方法】將來自歐洲、亞洲、加拿大、澳大利亞和中國幾個不同地區的甘藍型油菜500余份,按照其品質特點、地理位置、生長習性分組并按比例取樣,建立由87個品種組成的預選核心種質。采用EST-STS標記和SSR標記對其進行分析,剔除遺傳冗余,選出代表該500余份資源的核心種質并進行分子標記多樣性評價和表型特征分析。【結果】在相同的選擇背景下,EST-STS和SSR 標記的多態性檢出率相仿(39%~40%),每對EST引物與SSR引物產生的多態性條帶相近。聚類分析在遺傳相似系數0.65處把87個品種分成中國和國外油菜兩個類群,進一步在約0.70處類群Ⅰ和類群Ⅱ又分別產生中國“雙低”、中國“雙高”以及歐洲冬油菜和歐洲春油菜各兩個亞組。根據遺傳多樣性分析,剔除遺傳相似系數大于或等于0.85的遺傳冗余,獲得78個品種的核心種質。【結論】EST-STS是一種經濟、有效具有功能信息的分子標記,功效與普通SSR標記相仿;遺傳多樣性和聚類分析結果為甘藍型油菜4個組的劃分提供了依據;78個品種組成的核心種質保留了預選核心種質的遺傳多樣性和結構,可作為本研究中500余份品種資源的核心種質加以利用和保存。
    利用ISSR標記分析青麻種質資源遺傳多樣性
    白占兵,粟建光,陳基權,戴志剛,王鳳敏,龔友才
    中國農業科學. 2008, 41(11):  3532-3541 .  doi:10.3864/j.issn.0578-1752.2008.11.012
    摘要 ( 1116 )   PDF (682KB) ( 802 )   收藏
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    【目的】利用分子標記分析來自中國11個省(市)的48份青麻種質資源的遺傳多樣性,為青麻資源利用和育種提供分子生物學依據。【方法】利用內部簡單重復序列多態性(ISSR)分子標記檢測青麻種質資源的遺傳多樣性。【結果】在48份青麻種質資源中,9條ISSR引物擴增出82條帶,多態條帶比率(PPB)為88.89%,擴增產物片段大小在0.1~3.0 kb。基于UPGMA聚類,將青麻分為3大類。【結論】中國青麻的遺傳多樣性水平較高,實驗結果支持青麻起源于中國。

    苧麻UDPGDH基因的cDNA克隆及表達分析
    劉 峰,黃 妤,郭清泉,張學文,李良勇,鄧 晶,謝玲玲
    中國農業科學. 2008, 41(11):  3542-3548 .  doi:10.3864/j.issn.0578-1752.2008.11.013
    摘要 ( 815 )   PDF (389KB) ( 749 )   收藏
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    【目的】分離苧麻尿苷二磷酸葡萄糖脫氫酶(UDPGDH)基因。【方法】通過簡并引物RT- PCR 結合 RACE 技術和半定量RT-PCR。【結果】成功克隆苧麻Boehmeria nivea (Linn.) Gaud.尿苷二磷酸葡萄糖脫氫酶(UDPGDH)基因cDNA序列,序列長1 837 bp,編碼一480個氨基酸的蛋白質(GenBank No.EF178294)。半定量RT-PCR分析顯示,UDPGDH在苧麻根、皮、莖和葉組織中均有表達,其表達量為莖>皮>葉>根,相對表達量依次為0.7075,0.3051,0.2651,0.1490。【結論】苧麻UDPGDH與其它植物相應序列具有較高同源性,在苧麻莖中有較高的表達。
    豌豆花發育的分子生物學研究進展
    宋偉杰,張彥波,王利琳
    中國農業科學. 2008, 41(11):  3549-3555 .  doi:10.3864/j.issn.0578-1752.2008.11.014
    摘要 ( 1090 )   PDF (234KB) ( 923 )   收藏
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    豌豆是遺傳學研究的經典材料,也是一種重要的農產品。研究豌豆花發育對于豆科植物特別是大豆產量的提高具有指導意義。近年來有關豌豆花發育基因調控的研究已取得了很大進展,本文通過比較擬南芥和豌豆花發育機制的異同,從豌豆花分生組織屬性的決定和花器官屬性的決定兩方面綜述了近些年國內外關于豌豆花發育分子機理的研究進展。
    耕作栽培·生理生化
    超高產水稻適宜單株成穗數的定量計算
    李剛華,王紹華,楊從黨,黃慶宇,李德安,寧加朝,凌啟鴻,丁艷鋒
    中國農業科學. 2008, 41(11):  3556-3562 .  doi:10.3864/j.issn.0578-1752.2008.11.015
    摘要 ( 1111 )   PDF (379KB) ( 1064 )   收藏
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    【目的】建立水稻單株成穗數通式和有效分蘗葉位理論分蘗數函數,并確定超高產水稻的秧苗分蘗成活率(s)、本田期分蘗發生率(r)、分蘗缺位數(bn)、適宜等穗期及校正系數(a)等相關參數。【方法】選擇云南水稻特殊高產生態區,2005年進行雜交秈稻Ⅱ優107密度試驗,2005~2006年進行雜交秈稻Ⅱ優107、Ⅱ優318、Ⅱ優7954、Ⅱ優084、Ⅱ優航1號和協優107大區超高產試驗。對試驗的水稻分蘗消長進行調查分析,并最終測產。【結果】所有參試品種都遵循n-3的葉蘗同伸規律,有效分蘗葉位理論分蘗數(A)可以表示為有效分蘗葉位數(E)的函數,有效分蘗葉位數(E)與主莖總葉齡(N)、伸長節間數(n)、移栽葉齡(SN)、分蘗缺位數(bn)和校正系數(a)有關,E=(N-n-SN-bn-a);超高產群體的矯正系數(a)宜取1.5;常規濕潤秧移栽大田后有1.5葉的分蘗缺位(bn),帶2葉分蘗成活率(s2)和帶1葉分蘗成活率(s1)分別為 0.8和0.3;穴盤帶土移栽,bn=0.5,s2=1.0,s1=0.5;本田期秧苗活棵至等穗期,分蘗發生率(r)80%左右。【結論】超高產水稻常規濕潤秧本田期有效分蘗葉位E=(N-n-SN-3),單株分蘗成穗數ES=(1+t3+0.8t2)(1+0.8A)+0.3t1,其中t1、t2、t3分別代表秧苗帶1葉、2葉和3葉分蘗數;穴盤小苗移栽本田期有效分蘗葉位E=(N-n-SN-2),單株分蘗成穗數ES=(1+t3) (1+0.8A3)+t2(1+0.8A2)+0.5t1,其中A2、A3分別代表2葉分蘗、3葉分蘗及主莖本田期理論分蘗數。通過兩年與實際莖蘗動態的比較,公式描述較好。

    兩系雜交稻兩優培九的生態適應性研究及其種植區域規劃
    鄒江石,呂川根,胡 凝,李義珍,姚克敏
    中國農業科學. 2008, 41(11):  3563-3572 .  doi:10.3864/j.issn.0578-1752.2008.11.016
    摘要 ( 1089 )   PDF (509KB) ( 802 )   收藏
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    【目的】實現兩系超級稻兩優培九大面積種植,分析其生態適應性,合理規劃和選擇最適宜種植區域。【方法】在南方稻區8個試驗點連續2年進行區域生態適應性試驗。根據水稻生長發育和產量形成與種植環境相協調一致的原理,采用生長解析方法,選擇生育期(GD)、生長速率( )、灌漿速率( )和產量指數(YI)為分析要素,分析兩優培九在中國南方稻區的適應性。【結果】GD、 、 都可以建立決定系數較高的環境模型,YI可以由GD、 、 綜合表達。兩優培九出穗的高溫促進率,短日下為5級,長日下為3級,短日促進率為4~5級,為中等感光型,在華南雙季稻區的生育期穩定性低于長江中下游稻區及江淮稻區。 等值線呈東南-西北走向,與該地區的夏季溫度分布基本一致。長江中下游稻區和江淮稻區是 距平+10%的高值區,華南雙季稻區為距平負值區。 除了受灌漿結實期的環境影響外,還受到抽穗前積累的干物質量(GW)運轉的影響。 等值線基本呈緯向分布,距平-20%線在24°N以南,大致與兩優培九作雙季連作稻種植的北界一致。24~28°N為 距平負值區域,28~30°N為 距平正值區域,距平+20%區域在江淮稻區。因地勢特點, 和 在四川盆地及洞庭湖地區有相對低值區,在云貴高原河谷和湘、黔、川交界的低山丘陵有相對高值區。兩優培九YI在南方稻區自南向北遞增,平均達到(10.01±2.71)t•ha-1。其中,華南雙季稻區為(7.31±1.00)t•ha-1,華中單雙季稻區為(9.34±1.28)t•ha-1,長江中下游和江淮稻區為(11.93±2.04)t•ha-1,洞庭湖地區和四川盆地是7.5~9.0 t•ha-1的低YI區,云貴高原河谷地區有15 t•ha-1以上的生產潛力,南方丘陵也有10.5 t•ha-1的高YI區。【結論】在種植區規劃上,兩優培九宜作為一季中稻,繼續向28~30°N華中單雙季稻區北部最有利的生態區域發展。

    細胞質雄性不育玉米的根系特性和氮效率研究
    李從鋒,劉 鵬,董樹亭,張吉旺,王空軍,賈士芳
    中國農業科學. 2008, 41(11):  3573-3579 .  doi:10.3864/j.issn.0578-1752.2008.11.017
    摘要 ( 1107 )   PDF (230KB) ( 693 )   收藏
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    【目的】探討細胞質雄性不育玉米的根系特性和氮素吸收利用規律。【方法】在土柱栽培條件下,選擇目前生產中廣泛應用的骨干自交系478和齊319的細胞質雄性不育系(CMS)和其同型保持系(可育系)為試驗材料,比較分析雄性不育系及其可育系灌漿期根系特性的差異及對缺氮的響應。【結果】CMS玉米的籽粒產量和千粒重均高于其同型可育植株(P<0.05),生物產量差異不顯著(P>0.05),收獲指數明顯較高(P<0.05),且缺氮條件下優勢更為明顯。CMS玉米灌漿期具有較高的根系干重、根系體積和根系總活力,且深層根系分布相對較多,根系活力較強,有效延長了根系的功能期,促進了植株對養分和水分的吸收。CMS玉米氮素積累總量高于其同型可育系(P<0.05),成熟期氮素在莖稈和籽粒中分配較多;低氮水平下,CMS玉米的氮素轉移率、貢獻率和氮素利用率均顯著高于其同型可育系(P<0.05);CMS玉米單株氮效率較高,氮響應度相對較低。【結論】細胞質雄性不育玉米籽粒產量高、氮效率高與其深層根量多、根系活力強密切相關。

    發育早期變溫對不同基因型大豆種子生長速率和蛋白質及脂肪含量的影響
    周瑞蓮,楊樹德,趙哈林,Westgate E.Mark
    中國農業科學. 2008, 41(11):  3580-3588 .  doi:10.3864/j.issn.0578-1752.2008.11.018
    摘要 ( 1290 )   PDF (379KB) ( 669 )   收藏
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    【目的】通過測定變溫處理過程中種子生長速率、蛋白質、脂肪和淀粉含量,以期了解發育早期變溫對種子發育和組分的影響。【方法】采用液體組培法在種子發育早期的分裂期(開花10~20 d)和積累期(開花20~32 d)對種子和子葉進行變溫處理。具體做法:將盆栽的3個不同基因型大豆品種(Evans,低蛋白品種;Proto, 高蛋白品種;PI132.217, 高蛋白質穩定品種)置于均溫為24℃[晝/夜溫度,27/20℃(Mo)]的生長箱中培養。在開花后10 d,將它們分別置于溫度為31℃[35/27℃(Ho)]、24℃[27/20℃(Mo)]和16℃[20/12℃(Lo)]的生長箱中。在開花后20 d,從生長在不同溫度條件下植株上采集種子去種皮種植在營養液中并分別再放置在不同溫度光照培養箱中[35/27℃(H);27/20℃(M);20/12℃(L)]。組培營養液含75 mmol•L-1谷氨酸和142 mmol•L-1的蔗糖。【結果】植株上10 d變溫處理對種子生長和干物質積累沒有影響,而對種子蛋白質和脂肪含量有明顯作用。種子最高蛋白質含量在中溫,最高脂肪含量在高溫,此時,脂肪含量大約是成熟種子的75%,是低溫下生長的種子的2倍(35%)。在組培變溫處理中,分裂期在高溫下(Ho)生長的植株上種子組培后無論生長在高溫(H),中溫(M)或低溫(L)條件下,其種子鮮重(FW)和干重(DW)均比從分裂期生長在中溫(Mo)和低溫(Lo)下的植株上采收的種子在同等溫度下高,顯示出分裂期溫度對種子后期生長具有潛在的影響。另外,積累期變溫處理中溫度從中溫(M)提高到高溫(H),子葉的生長速率是溫度從低溫(L)提高到中溫(M)的2倍,溫度降低16℃比降低8℃生長速率降低2倍,生長早期高溫有利于種子生長,劇烈變溫抑制種子生長作用。然而,溫度升高8℃(LoM和MoH)或降低8℃(HoM和MoL)均使子葉蛋白質含量增加。【結論】早期溫度調控著后期大豆種子組分發育。早期高溫有利于脂肪合成限制蛋白質積累。基因型不同品種對溫度反應不同,PI132.217對溫度反應略顯不敏感。因此,根據生產地溫度的季節變化規律,選擇合適的基因型品種和播種期對獲得高產高蛋白或高脂肪大豆產量顯得十分重要。而培育對溫度不敏感型大豆品種以抵抗未來頻繁的變溫在維持未來大豆高產穩產上可能是一有效措施。

    不同光照條件下長春花的光合作用和葉綠素熒光動力學特征
    周憶堂,馬紅群,梁麗嬌,洪 鴻,胡麗濤,孫 敏,吳能表
    中國農業科學. 2008, 41(11):  3589-3595 .  doi:10.3864/j.issn.0578-1752.2008.11.019
    摘要 ( 1487 )   PDF (788KB) ( 1388 )   收藏
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    【目的】探討不同光強下長春花的光合生理特性,為長春花的種植提供理論指導。【方法】采用遮蔭處理模擬不同的生境光強(100%、42.5%和12.5%自然光),測定不同光強條件下生長的長春花葉片的比葉重(LMA)、光合色素含量、最大凈光合速率(Pmax)、葉綠素熒光參數等光合生理指標,并對葉綠體的超微結構進行觀察。【結果】隨生境光強的減弱,最大凈光合速率Pmax下降,12.5%光強下的Pmax是全光強下的71.4%。其它光合指標也發生適應性調整,相對正常光照,弱光下葉綠素含量上升,LMA、Chla/Chlb、Car/Chl、光飽和點(LSP)、光補償點(LCP)下降。自然光照條件下葉綠體中的類囊體片層結構垛疊緊密,數量較多,隨光強減弱,葉綠體基粒逐漸變大,基粒片層發育較差、并且數量逐漸減少。Fv/Fm,qP、NPQ及實際光量子效率ΦPSⅡ等隨光強下降也都呈下降趨勢。【結論】不同光強下生長的長春花葉片的光合作用和葉綠素熒光動力學特征存在很大差異。弱光條件下,尤其是12.5%光強重度弱光脅迫下,長春花葉片的光合作用受到嚴重影響,主要表現在ΦPSⅡ、qP和NPQ的下降,從而導致光合機構發育不良和光合能力的下降,影響其正常生長。

    蕉農對香蕉保險的支付意愿分析和支付能力測度 ——來自海南省1 167戶蕉農的經驗證據
    潘勇輝
    中國農業科學. 2008, 41(11):  3596-3603 .  doi:10.3864/j.issn.0578-1752.2008.11.020
    摘要 ( 2108 )   PDF (358KB) ( 1283 )   收藏
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    【目的】探究蕉農對香蕉保險的支付意愿和支付能力,為政府優化香蕉保險制度設計提供決策依據。【方法】基于海南省1 167戶蕉農的實地調查,分別運用Logistic和CVM模型對影響蕉農參加香蕉保險意愿的微觀影響因素和支付能力測度進行實證研究。【結果】影響蕉農參加香蕉保險的重要因子包括種植年限、身份、受教育程度、種植品種、2007年香蕉種植損失對家庭生產生活的影響程度、香蕉種植收入占家庭總收入的比重、是否試點區;蕉農平均意愿保費費率為0.14,蕉農平均意愿支付保費的能力為39%,蕉農希望政府補貼水平應達到60%。【結論】加大財政對農業保險的支持力度、深度和廣度;積極開展農業保險產品創新,增加農業保險的有效供給;積極推進香蕉生產的規模化、專業化;啟動農業保險發展的規劃。
    植物保護
    小麥抗葉銹基因Lr38的一個新標記
    閆紅飛,楊文香,褚 棟,劉大群
    中國農業科學. 2008, 41(11):  3604-3609 .  doi:10.3864/j.issn.0578-1752.2008.11.021
    摘要 ( 1157 )   PDF (451KB) ( 726 )   收藏
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    【目的】建立小麥抗葉銹近等基因系材料TcLr38特異的PCR標記。【方法】以Thatcher為對照,以TcLr38和TcLr38×Thatcher F2代單株構建的分離群體為材料,利用TcLr38遠緣親本中間偃麥草特異的SCAR標記引物進行PCR擴增獲得單一條帶,并以50個小麥抗葉銹近等基因系材料對該標記特異性進行檢測,Mapmaker 3.0軟件計算該標記與Lr38的遺傳連鎖距離。【結果】中間偃麥草特異的SCAR標記引物在TcLr38中獲得單一擴增片段大小為982 bp,50個小麥抗葉銹近等基因系檢測表明為TcLr38的特有條帶,F2代分離群體驗證表明為與Lr38共分離的分子標記,命名為Y38SCAR982。【結論】Y38SCAR982可以作為Lr38的分子標記,并證實該基因由中間偃麥草向普通小麥轉移的事實。

    用兩個微衛星標記分析云南馬鈴薯晚疫病菌的遺傳多樣性
    趙志堅,曹繼芬,楊明英,孫道旺,李先平,楊萬林
    中國農業科學. 2008, 41(11):  3610-3617 .  doi:10.3864/j.issn.0578-1752.2008.11.022
    摘要 ( 1328 )   PDF (320KB) ( 1074 )   收藏
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    【目的】檢測不同馬鈴薯產區晚疫病菌基因型的特征,揭示馬鈴薯晚疫病菌群體的進化潛能和演替。【方法】用已開發出來的微衛星標記(SSR)對云南省23個馬鈴薯產區的晚疫病菌群體的遺傳結構進行研究。【結果】在兩個SSR位點Pi4B和Pi4G上共檢測到8個等位基因,占優勢的等位基因是218和161,基因頻率分別為84.02%、32.52%。在分析的235個云南晚疫病菌菌株中,檢測到18個不同的SSR基因型,其中8個新的SSR基因型譜系H-03、H-04、H-05、H-06、H-07、I-01、J-01和 K-01被首次檢測到;SSR基因型D-03、D-05、H-01和H-05是云南馬鈴薯晚疫病菌群體的優勢譜系,在云南的群體中所占的比例分別為20.85%、22.98%、15.32%和19.57%,分布于云南的大部分馬鈴薯產區。【結論】云南馬鈴薯晚疫病菌群體遺傳多樣性在地理分布上差異明顯,滇中多季作種植區晚疫病菌群體顯示了較高的遺傳多樣性,滇南冬播作一季種植區群體結構單一。有證據表明中國云南晚疫病菌群體與其它國家20世紀80年代后出現的晚疫病菌群體在遺傳上存在關聯。

    秦巴山區六種野生百合感染3種病毒病鑒定及其田間抗病性初步評價
    王仙芝 ,張延龍,牛立新,吳云峰,謝松林
    中國農業科學. 2008, 41(11):  3618-3625 .  doi:10.3864/j.issn.0578-1752.2008.11.023
    摘要 ( 1272 )   PDF (470KB) ( 806 )   收藏
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    【目的】對來自秦巴山區6種野生百合(岷江百合(Lilium regale)、卷丹(Lilium tigrinum)、野百合(Lilium brownii)、大花卷丹(Lilium leichtlinii var. maximowiczii)、山丹(Lilium pumilum)、宜昌百合(Lilium leucanthum))的病毒病危害程度進行調查,并對黃瓜花葉病毒(cucumber mosic virus,CMV)、百合斑駁病毒(lily mottle virus,LMoV)和百合無癥病毒(lily syptomless virus,LSV)3種病毒進行檢測,旨在確定野生百合是否感染病毒及感染種類,并初步判斷不同種對病毒的抗性。【方法】采用發病率和病情指數統計方法調查野生百合病毒病發病情況,采用RT-PCR檢測和克隆測序等分子生物學方法對不同發育時期野生百合黃瓜花葉病毒(CMV)、百合斑駁病毒(LMoV)和百合無癥病毒(LSV)進行鑒定。【結果】異地栽培條件下,6種野生百合中除岷江百合外,其它5種野生百合都不同程度表現出花葉、斑駁等病毒病癥狀。經RT-PCR檢測結果顯示,岷江百合無病毒侵染,卷丹感染百合斑駁病毒(LMoV),野百合、大花卷丹、山丹和宜昌百合均被黃瓜花葉病毒(CMV)和百合斑駁病毒復合侵染。【結論】岷江百合、山丹、野百合、大花卷丹和宜昌百合在原生地不帶病毒。在異地保存且有毒源存在的條件下,野生百合易感染病毒。不同種野生百合的抗病毒特性不同,岷江百合對病毒病的綜合抗性最強,抗病程度為免疫;大花卷丹和宜昌百合,屬中感類型;山丹、卷丹和野百合對病毒病抗性為高感類型。

    轉綠色熒光蛋白基因的青枯雷爾氏菌生物學特性
    車建美,藍江林,劉 波
    中國農業科學. 2008, 41(11):  3626-3635 .  doi:10.3864/j.issn.0578-1752.2008.11.024
    摘要 ( 975 )   PDF (473KB) ( 897 )   收藏
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    【目的】采用電擊法對青枯雷爾氏菌(Ralstonia solanacearum)進行gfp/luxAB基因雙標記,研究標記前后菌株的生長差異、以及侵染性和致病性的變化。【方法】通過電擊法進行青枯雷爾氏菌的遺傳轉化,采用番茄組培苗對標記菌株的侵染條件和侵染過程進行初步研究。【結果】成功地采用gfp/luxAB基因標記了青枯雷爾氏菌。標記后的菌體細胞形狀與親本菌株形狀相同,均為長橢圓形,近桿狀,整個細胞呈現綠色熒光,PCR結果表明,從標記青枯雷爾氏菌菌株的基因組DNA中擴增出約3.0 kb的gfp基因片段。標記菌在對數生長期,熒光素酶活性快速增加,到穩定期,熒光素酶活性降低。在無選擇壓力條件下連續移植20次,仍然保持均勻而且強烈的綠色熒光,熒光穩定性保持在100%。gfp基因標記前后的菌株在培養的最適溫度、最佳pH值及生長曲線上基本一致,在番茄組培苗內的侵染路線相同,致病力均達到90%以上。【結論】將gfp和luxAB融合基因成功轉入青枯雷爾氏菌,融合基因在標記菌株中的表達高效穩定。導入的gfp基因對宿主的生長特性及致病性沒有影響。

    用熒光定量RT-PCR方法分析B型和ZHJ-1型煙粉虱熱休克基因hsp70和hsp90的表達
    王海鴻,雷仲仁
    中國農業科學. 2008, 41(11):  3636-3644 .  doi:10.3864/j.issn.0578-1752.2008.11.025
    摘要 ( 1118 )   PDF (595KB) ( 845 )   收藏
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    【目的】比較溫度脅迫對兩種生物型煙粉虱體內hsps誘導表達的差異。【方法】根據煙粉虱hsp70基因、hsp90基因和18S rRNA序列,設計并合成引物用于實時定量RT-PCR,擴增產物連接到質粒pMD18-T載體上,重組質粒經篩選、簽定和10×梯度稀釋后作為模板,用于標準曲線的制作和樣品檢測,檢測溫度脅迫對B型和ZHJ-1型煙粉虱hsp70和hsp90 mRNA轉錄水平的誘導情況。【結果】在受到34℃、37℃、40℃和43℃的高溫脅迫時,兩者hsps的誘導水平無顯著差異(P>0.05);在受到4℃、7℃、10℃和13℃的低溫脅迫時,B型煙粉虱體內hsps的誘導表達水平顯著超過了ZHJ-1型煙粉虱(P<0.05)。【結論】經檢驗所建立的熒光定量RT-PCR體系特異性好,靈敏度高,符合檢測煙粉虱hsps mRNA轉錄水平的要求。低溫脅迫下B型煙粉虱體內hsps的高表達可能是其較強的耐受低溫能力的主要機制之一。

    不同放牧強度下荒漠草原植物的補償性生長
    馬紅彬,謝應忠
    中國農業科學. 2008, 41(11):  3645-3650 .  doi:10.3864/j.issn.0578-1752.2008.11.026
    摘要 ( 1216 )   PDF (273KB) ( 901 )   收藏
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    【目的】研究荒漠草原不同放牧強度下植物補償性生長特征。【方法】通過不同放牧強度試驗,研究荒漠草原植物種群,包括賴草(Leymus secalinus)、長芒草(Stipa bungeana)、糙隱子草(Cleistogenes squarrosa)和牛枝子(Lespedeza potanimii)等4種主要飼用植物的地上凈初級生長量。【結果】荒漠草原植物在不同放牧強度下補償性生長不同,在綿羊放牧強度0.60只/ha(2005年)或0.75只/ha(2006年)時表現為等補償生長,小于此強度時則發生超補償生長,大于此強度表現為欠補償生長。4種主要飼用植物種群在不同放牧強度下補償性生長特征也不盡相同。根據植物補償性生長規律,該地區荒漠草原的適宜采食率為18.01%~33.82%。【結論】荒漠草原植物在放牧干擾下存在超補償性生長情況,降低放牧強度有利于超補償和等補償生長的出現。

    丁草胺熒光偏振免疫分析——示蹤物的合成與鑒定
    薛 鋼,雷紅濤,沈玉棟,劉細霞,吳 青,孫遠明,王 弘
    中國農業科學. 2008, 41(11):  3651-3655 .  doi:10.3864/j.issn.0578-1752.2008.11.027
    摘要 ( 1111 )   PDF (320KB) ( 1002 )   收藏
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    【目的】為建立除草劑丁草胺的熒光偏振免疫檢測方法,對關鍵試劑示蹤物進行合成與鑒定。【方法】以異硫氰酸熒光素、乙二胺和己二胺為原料,合成了異硫氰酸熒光素乙二胺(EDF)和異硫氰酸熒光素己二胺(HDF)兩種中間體,薄層層析法分離出目標產物,電噴霧電離質譜法鑒定;然后將5-氨基熒光素(AF)、EDF、HDF分別與丁草胺半抗原(BMPA)連接,得到3種不同間隔臂的示蹤物(BMPA-AF,BMPA-EDF和BMPA-HDF),利用抗血清稀釋曲線測定抗血清效價,競爭抑制曲線測定不同示蹤物檢測靈敏度。【結果】3種示蹤物合成成功,抗血清稀釋曲線和競爭抑制曲線顯示3種示蹤物的抗血清效價分別為1/600、1/1500和1/600,半抑制濃度分別為1 292、433和298 ng•ml-1。【結論】合成出3種不同間隔臂的丁草胺示蹤物,對示蹤物的性質進行初步研究,為下一步建立丁草胺熒光偏振免疫分析方法奠定了基礎。

    土壤肥料·節水灌溉·農業生態環境
    3種土壤對水溶性有機物的吸附和解吸研究
    楊佳波,曾希柏,李蓮芳,白玲玉
    中國農業科學. 2008, 41(11):  3656-3663 .  doi:10.3864/j.issn.0578-1752.2008.11.028
    摘要 ( 866 )   PDF (289KB) ( 958 )   收藏
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    【目的】了解不同類型土壤對水溶性有機物的吸附和解吸差異,為有機肥的合理施用以及進一步研究其化學行為提供參考。【方法】選擇普通肥熟旱耕人為土(黑土母質發育)、石灰肥熟旱耕人為土(褐土母質發育)和酸性肥熟旱耕人為土(第四紀紅壤母質發育)3種理化性質差異較大的土壤,開展添加水溶性有機物(DOM)后不同吸附時間下土壤對DOM的吸附和解吸試驗,并利用相關模型計算了土壤對DOM吸附和解吸的參數。【結果】外源DOM進入土壤后,能很快被土壤膠體吸附,并在1 h內達到平衡;3種土壤對DOM的吸附差異明顯,其達到平衡時的吸附量分別為10 236、8 372和10 088 mg•kg-1,即以有機質含量高的普通肥熟旱耕人為土和pH低的酸性肥熟旱耕人為土對DOM的吸附量大;3種土壤對所吸附DOM的解吸量比較,在吸附量達到最大時,解吸量占吸附量的比例分別為63.2%、42.1%和93.3%;3種土壤對所吸附DOM的解吸能力比較,亦為酸性肥熟旱耕人為土>普通肥熟旱耕人為土>石灰肥熟旱耕人為土。【結論】土壤性質與其對DOM的吸附和解吸密切相關,因此,不同類型土壤在有機肥施用量和施用方法上也需要相應進行改變。

    長期施肥對紅壤和潮土顆粒有機碳含量與分布的影響
    佟小剛,徐明崗,張文菊,盧昌艾
    中國農業科學. 2008, 41(11):  3664-3671 .  doi:10.3864/j.issn.0578-1752.2008.11.029
    摘要 ( 1217 )   PDF (383KB) ( 1135 )   收藏
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    【目的】為闡明長期施肥對紅壤和潮土不同大小顆粒有機碳含量和分布的影響,探討土壤持續利用培肥模式。【方法】采集17年長期施用不同肥料后的紅壤和潮土,通過物理分組方法得到砂粒、粗粉粒、細粉粒、粗黏粒及細黏粒,觀測了不同顆粒有機碳含量和分布的狀況。【結果】與不施肥(CK)相比,施用有機肥(M、NPKM)和秸稈還田(NPKS)均可顯著增加紅壤和潮土總有機碳及不同顆粒有機碳組分的含量,其中以配施有機肥效果最為明顯。施化肥有利于增加細黏粒的有機碳含量。各級顆粒中以砂粒的有機碳(POC)含量增幅最高,在紅壤和潮土中分別增加1.7~3.8倍和1.9~2.8倍,對施肥最敏感。施肥使紅壤和潮土有機碳在砂粒中的分布比例分別提高了37.7%~91.5%和63.6%;黏粉粒中有機碳的分布比例因顆粒大小不同而有差異,但總體上施肥降低了黏粉粒中礦物結合態有機碳(MOC)的分布比例,相應地施肥提高了POC與MOC的比率(WPOC/WMOC),改良了土壤有機碳性質。【結論】長期施肥下壤質紅壤比輕質潮土固存了更多的有機碳。配施有機肥和秸稈還田是提高兩種土壤不同顆粒有機碳含量的有效措施。

    灌溉和尿素類型對玉米氮素利用及產量和品質的影響
    邵國慶,李增嘉,寧堂原,張 民,焦念元,韓 賓,白 美 ,李洪杰
    中國農業科學. 2008, 41(11):  3672-3678 .  doi:10.3864/j.issn.0578-1752.2008.11.030
    摘要 ( 969 )   PDF (233KB) ( 1051 )   收藏
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    【目的】研究不同灌水條件下,控釋尿素與常規尿素用量對玉米氮利用及產量和品質的影響。【方法】采用隨機區組設計5個施氮水平和2個水分水平,研究不同類型尿素與水耦合對玉米干物質量、葉面積指數、籽粒產量、生物產量、地上部氮素吸收和籽粒蛋白質產量的影響。【結果】相同灌水條件下,施氮處理玉米干物質量、葉面積指數均大于對照,控釋尿素處理玉米的干物質量、葉面積指數大口期前低于常規尿素,開花后卻顯著高于常規尿素;增加施氮量可顯著提高玉米吸氮量及花后籽粒吸氮量,營養器官雖可獲得較大的氮素累積,但降低了向籽粒轉移氮量。同一氮水平下,灌漿水提高了玉米地上部干物質量、葉面積指數和籽粒產量,降低了玉米地上部吸氮量、花后籽粒吸氮量和花前轉移氮量,籽粒蛋白質含量和產量也顯著降低。與常規尿素相比,控釋尿素與水分對玉米氮素吸收、籽粒產量和籽粒蛋白質產量的耦合效應更顯著。【結論】與常規尿素相比,不論有無灌漿水,控釋尿素均能較好地協調玉米的地上部生長,具有明顯的“前控后保”效果,利于獲得高產與優質的同步,而灌漿水可以顯著提高這種效果。
    氮肥和Trinexapac-ethyl配合施用對草地早熟禾草坪生長的影響
    王曉英,呼天明,王佺珍,田立民,張曉玲,田 凱
    中國農業科學. 2008, 41(11):  3679-3684 .  doi:10.3864/j.issn.0578-1752.2008.11.031
    摘要 ( 1279 )   PDF (307KB) ( 680 )   收藏
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    【目的】探明氮肥和Trinexapac-ethyl(TE)配合施用對草地早熟禾草坪生長的影響。【方法】在草地早熟禾返青后,采用完全隨機區組設計,氮肥設0(N1)、20(N2)、25(N3)和30(N4)kg•ha-1 4個水平,每月施1次;TE設0(T1)、312.5(T2)和625(T3)ml•ha-1 3個水平,每10 d 噴施1次,測定氮肥和TE配合施用對草坪株高、產草量及葉綠素含量的影響。【結果】施氮能顯著促進草坪生長,而噴施TE能夠顯著抑制草坪 的生長。在不同的氮肥水平上,T2處理能夠降低草坪新增株高、剪草量達30%左右,T3處理能夠降低草坪新增株高、剪草量達45%左右。在保證正常需要的同時,N2T3、N3T3、N4T3處理的草坪生長較慢。氮與TE的交互作用對草坪顏色有極顯著影響;相同氮水平處理中,T3處理草坪草葉綠素含量顯著高于T1處理;N4T3處理草坪顏色最深。【結論】以草坪生長與葉綠素含量為評判的依據,最好的組合為N2T3、N4T3,它們均能使草坪生長減慢而且顏色加深。

    土壤芽孢桿菌分離方法的比較——以成都郊區土壤為例
    龔國淑,張世熔,唐志燕,楊成偉,徐 嚴,張 洪
    中國農業科學. 2008, 41(11):  3685-3690 .  doi:10.3864/j.issn.0578-1752.2008.11.032
    摘要 ( 1333 )   PDF (323KB) ( 1037 )   收藏
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    【目的】篩選一種簡便、實用的從土壤中分離芽孢桿菌的方法,初步調查成都郊區土壤芽孢桿菌資源。【方法】以稀釋平板計數法為基礎,用成都郊區20個土樣作材料,設土壤懸液經加熱和不加熱分別用牛肉膏蛋白胨瓊脂和麥芽汁牛肉膏蛋白胨瓊脂分離芽孢桿菌4種處理方法,用“直接法-牛肉膏”、“直接法-麥芽汁”、“間接法-牛肉膏”和“間接法-麥芽汁”分別表示這4種處理。【結果】4種處理測定的芽孢桿菌總數為(5.180.38)~(6.300.56)log cfu•g-1dry soil,加熱處理測定的數量顯著低于不加熱處理的;用“直接法-麥芽汁”分離的芽孢桿菌種類極顯著多于其它處理,用該方法可從成都郊區分離21個種,最常見種有環狀芽孢桿菌(Bacillus circulans)、巨大芽孢桿菌(B. megaterium)、蠟狀芽孢桿菌(B. cereus)、地衣芽孢桿菌(B. licheniformis)、泛酸芽孢桿菌(B. pantothenticus)、嗜堿芽孢桿菌(B. alcalophilus)等。用“間接法-牛肉膏”僅分離到13個種,最常見種有巨大芽孢桿菌、蠟狀芽孢桿菌、短小芽孢桿菌(B. pumilus)、異常芽孢桿菌(B. insolitus)等。【結論】直接法-麥芽汁是分離土壤芽孢桿菌的理想方法。B. circulans、B. megaterium、B. pantothenticus、B. alcalophilus、B. cereus、B. licheniformis、B. insolitus 、B. subtilis、B. spaericus、B. pumilus等為成都市郊區土壤芽孢桿菌的主要類群,廣泛存在于區域內。

    園藝
    CMV侵染脅迫下黃瓜重要功能基因表達及代謝響應的研究
    毛偉華,龔亞明,宋興舜,夏曉劍,王彥杰,周艷虹,師 愷,李亞丹,喻景權
    中國農業科學. 2008, 41(11):  3691-3697 .  doi:10.3864/j.issn.0578-1752.2008.11.033
    摘要 ( 918 )   PDF (407KB) ( 1038 )   收藏
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    【目的】研究黃瓜花葉病毒病(CMV)侵染脅迫下黃瓜重要功能基因表達和代謝途徑響應。【方法】在結合氣體交換和葉綠素熒光參數及抗性相關酶活性測定的基礎上, 應用農業部園藝植物生長發育與品質調控重點開放實驗室自主開發的黃瓜cDNA芯片研究黃瓜在CMV侵染脅迫下的基因表達譜變化,并對其中5個具有代表性的基因通過實時熒光定量PCR(QRT—PCR)進行檢測,以驗證cDNA芯片雜交結果的可靠性。【結果】共獲得67個差異表達顯著的基因,其中42個基因下調表達,25個基因上調表達。這些差異表達的基因涉及了許多重要代謝途徑。許多與光合作用、氮同化相關的基因受到明顯的抑制;而一些防御相關基因和信號傳導相關基因則誘導表達;同時,也發現了一些與CMV脅迫相關的功能未知基因或未有任何功能信息的基因。【結論】CMV脅迫引發了黃瓜代謝發生一系列復雜的適應性變化,PR1-1a等基因可能在黃瓜防御CMV侵染過程發揮著重要作用。

    黃瓜幼苗不同葉位葉片光合特性對弱光的響應
    李 偉,眭曉蕾,王紹輝,關秋竹,胡麗萍,周 明,孟凡珍,張振賢
    中國農業科學. 2008, 41(11):  3698-3707 .  doi:10.3864/j.issn.0578-1752.2008.11.034
    摘要 ( 1154 )   PDF (470KB) ( 1114 )   收藏
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    【目的】探討弱光條件下黃瓜(Cucumis sativus)幼苗不同葉位葉片光合特性的響應變化及品種間差異,為日光溫室黃瓜冬季生產提供理論依據。【方法】以不耐弱光的‘津研2號’和較耐弱光的‘戴多星’黃瓜幼苗為試材,在人工氣候室內用LI-6400光合儀和PAM-2100熒光儀研究弱光[75~85 µmol•m-2•s-1,25℃(晝)/18℃(夜)]及常光對照(500~600 µmol•m-2•s-1)下黃瓜不同葉位葉片的光合氣體交換參數、葉綠素a熒光參數。【結果】弱光處理后,黃瓜第3~5葉凈光合速率(Pn)、氣孔導度(Gs)、氣孔限制值(Ls)、蒸騰速率(Tr)和瞬時水分利用效率(WUE)基本上下降,而胞間CO2濃度(Ci)升高,尤以中部葉變化明顯,Pn的下降主要是非氣孔因素限制的結果。弱光下第3~5葉光系統Ⅱ(PSⅡ)實際光化學效率(ΦPSⅡ)、光化學反應速率(Prate)、非環式電子傳遞速率(J)和PSⅡ吸收光能用于光化學反應的比例(P)均下降,光系統間激發能分配不平衡性(β/α-1)增大。弱光下‘津研2號’隨葉位的升高其Pn、ΦPSⅡ、J和P等光合、熒光參數基本呈降低趨勢,β/α-1有所升高,而‘戴多星’上述參數的變化規律與其對照相似,即中部葉具有較高的光合能力和光化學活性。【結論】弱光抑制了黃瓜幼苗各葉位葉片,尤其降低了中上部葉的光合同化能力和PSⅡ光化學活性。弱光下‘津研2號’幼苗整株持續光合能力明顯低于‘戴多星’。

    NO3-脅迫下黃瓜幼苗依賴葉黃素循環的熱耗散與啟動
    蘇秀榮,王秀峰,楊鳳娟,王玉桂
    中國農業科學. 2008, 41(11):  3708-3715 .  doi:10.3864/j.issn.0578-1752.2008.11.035
    摘要 ( 1382 )   PDF (382KB) ( 635 )   收藏
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    【目的】揭示高濃度NO3-脅迫的黃瓜幼苗,在強光下對過剩光能的耗散機理。【方法】水培條件下,不同濃度的NO3-處理黃瓜幼苗7 d,測定處理葉片與引入二硫蘇糖醇(DTT)、抗壞血酸(AsA)的處理葉片中葉黃素循環各組分和非光化學猝滅(NPQ)的變化。【結果】NO3-濃度為14~98 mmol•L-1處理的,黃瓜幼苗光合速率(Pn)與熒光參數的變化較小,差異不顯著;但當NO3-處理濃度達140、182 mmol•L-1時,幼苗光合速率、初始熒光(Fo)均顯著低于對照,在較強光下NPQ、(A+Z)/(V+A+Z)%均高于對照;引入抑制劑DTT后,NPQ、(A+Z)/(V+A+Z)%均受到抑制;(A+Z)/(V+A+Z)%與NPQ變化趨勢一致。NO3-濃度為140、182 mmol•L-1處理的幼苗,由暗處突然轉入1 280μmol•m-2•s-1(PFD)強光下時,天線轉化效率(Fv’/Fm’)、實際光化學效率(ΦPSⅡ)啟動程度均低于對照,且啟動減慢,NPQ啟動程度均高于對照。對照、140、182 mmol•L-1 NO3-各處理,NPQ啟動達最大值的時間分別約為6~9、6~9和15 min;(A+Z)/(V+A+Z)%啟動達最大值的時間分別約為15、15和24 min;引入AsA后,三者NPQ達最大值時間都約為6~9 min。【結論】當NO3-與強光共同脅迫時,黃瓜幼苗更易產生過剩激發能,依賴葉黃素循環的熱耗散為耗散過剩激發能的主要方式;高濃度182 mmol•L-1NO3-脅迫的黃瓜幼苗,葉黃素循環的啟動呈減慢趨勢。

    氮素形態對平邑甜茶IPT3表達與內源激素含量的影響
    彭靜,彭福田,魏紹沖,主春福,周鵬,姜遠茂
    中國農業科學. 2008, 41(11):  3716-3721 .  doi:10.3864/j.issn.0578-1752.2008.11.036
    摘要 ( 1138 )   PDF (310KB) ( 769 )   收藏
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    【目的】研究NO3- 和NH4+對平邑甜茶生長的影響及其與異戊烯基轉移酶基因(MhIPT3)表達、細胞分裂素含量變化的關系。【方法】在水培條件下,以平邑甜茶實生苗為試材,測定分析不同供氮形態對植株生長的影響, 同時采用實時熒光定量PCR研究MhIPT3表達量的變化,采用酶聯免疫測定植株中Z+ZR與iP+iPA、IAA、ABA含量的改變。【結果】(1)處理24 h,NO3-處理的葉面積略高于NH4+處理,但差異不顯著,第72 小時測定結果已存在顯著差異;且NO3-處理的植株生長量和株高均高于NH4+處理。(2)NO3-處理0.5 h,新根中MhIPT3表達量開始增加,2 h達到最大,之后下降但仍高于起始水平,而各個測定時期NH4+處理與KCl對照MhIPT3表達量變化不大。(3)根中iP+iPA和Z+ZR與MhIPT3表達量呈現相似的變化趨勢。(4)處理24 h,NO3-處理與NH4+處理IAA含量差異不顯著,ABA含量NO3-處理高于NH4+處理;到第72小時與168小時,IAA含量差異仍然不顯著,ABA含量NO3-處理低于NH4+處理。【結論】NO3-作為信號通過誘導MhIPT3基因表達,促進細胞分裂素合成,可能是平邑甜茶對硝態氮與銨態氮早期生長反應差異的重要原因之一。

    光質對生姜葉片光合特性的影響
    張瑞華,徐 坤,董燦興
    中國農業科學. 2008, 41(11):  3722-3727 .  doi:10.3864/j.issn.0578-1752.2008.11.037
    摘要 ( 943 )   PDF (322KB) ( 893 )   收藏
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    【目的】探討光質對苗期生姜葉片光能利用及光合特性的影響,為生姜苗期遮光處理提供理論依據。【方法】以萊蕪大姜為試材,采用不同顏色塑料薄膜及尼龍紗網進行苗期遮光處理,創造光強相同而光質不同的環境條件,測定葉片葉綠素熒光參數、光合速率和光呼吸速率日變化及光合特征參數。【結果】不同處理葉片葉綠素熒光參數日變化動態相似,但葉片Fv/Fm、Fv’/Fm’、ΦPSⅡ、qP和光化學反射指數(PRI)均以綠膜處理最高,其次為藍膜和白膜處理,紅膜處理最低;而PSⅠ和PSⅡ間激發能分配不平衡偏離系數(β/α-1)和NPQ則以綠膜處理最低,藍膜、白膜和紅膜處理依次升高。葉片Pn日變化均為有明顯午休的雙峰曲線,但由高到低依次為綠膜、白膜、紅膜、藍膜;而Pr及Pr/Pn則相反。紅膜處理葉片AQY較高而光補償點較低;綠膜處理葉片CE、RuBP最大再生速率及光飽和光合速率較高。【結論】適當增加遮光光質中綠光比例,生姜葉片午間光抑制程度較輕,PSⅠ和PSⅡ間線性電子傳遞協調性較好,激發能熱耗散較低,光能利用效率較高。因此,綠膜處理葉片適應強光能力較強,Pn較高。

    高效銀耳芽孢遺傳轉化體系的建立
    郭麗瓊,劉二鮮,王 杰,林俊芳
    中國農業科學. 2008, 41(11):  3728-3734 .  doi:10.3864/j.issn.0578-1752.2008.11.038
    摘要 ( 1000 )   PDF (595KB) ( 927 )   收藏
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    【目的】建立PEG介導的高效銀耳(Tremella fuciformis)芽孢遺傳轉化體系。【方法】采用PEG介導的原生質體法把表達質粒pAN7-1(含有構巢曲霉gpd-An 啟動子和潮霉素抗性基因hph)和pLg-hph(含香菇gpd-Le啟動子和hph基因)轉化進銀耳芽孢的細胞中;采用夾層法在含50 µg•ml-1潮霉素的篩選培養基中初篩銀耳芽孢假定轉化子,之后轉接于潮霉素含量為100 µg•ml-1的PDA平板上進行第2次篩選。【結果】PEG4000濃度為25%時介導的銀耳芽孢原生質體初轉化率最高;pLg-hph假定轉化子經過PCR鑒定及Southern 雜交驗證,結果表明hph基因能有效整合進銀耳芽孢的基因組中,其轉化率為110個/µg DNA。而pAN7-1轉化子經過PCR鑒定及Southern 雜交驗證,結果表明只有部分轉化子基因組中整合了hph基因,其轉化率只有9個/µg DNA。銀耳芽孢轉化子在PDSA培養基中繼代5次后仍檢測到hph基因的存在,表明外源基因hph能在銀耳芽孢繼代中穩定遺傳。【結論】25%的PEG4000能高效介導銀耳原生質體的轉化;香菇gpd-Le啟動子是銀耳芽孢表達外源hph基因的強啟動子;外源hph基因能夠在銀耳芽孢繼代培養中穩定遺傳。

    應用ISSR對25個小菊品種進行遺傳多樣性分析及指紋圖譜構建
    繆恒彬,陳發棣,趙宏波,房偉民,石麗敏
    中國農業科學. 2008, 41(11):  3735-3740 .  doi:10.3864/j.issn.0578-1752.2008.11.039
    摘要 ( 890 )   PDF (390KB) ( 1023 )   收藏
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    【目的】揭示選育出的菊花新品種遺傳多樣性并建立ISSR指紋圖譜,為品種知識產權保護提供依據。【方法】選用21個ISSR引物,對新選育的25個小菊品種的基因組DNA進行隨機引物PCR擴增。【結果】共獲得122條擴增帶,其中多態性譜帶114條,占擴增譜帶數的93.4%;品種間相似系數變幅在0.282~0.757;平均有效等位基因數為1.6390,平均Nei’s基因多樣性指數為0.3620,平均Shannon信息指數為0.5323;在21個引物中,引物ISSR35擴增的譜帶可把25個品種完全區分開。【結論】ISSR標記技術能較好地從分子水平揭示出菊花品種的遺傳多樣性,并能有效應用于菊花品種指紋圖譜的構建。

    貯藏·保鮮·加工
    基于小波神經網絡的柑橘pH機器視覺檢測
    曹樂平,溫芝元,陳理淵
    中國農業科學. 2008, 41(11):  3741-3745 .  doi:10.3864/j.issn.0578-1752.2008.11.040
    摘要 ( 889 )   PDF (351KB) ( 775 )   收藏
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    【目的】研究漣紅溫州蜜柑pH的機器視覺檢測及影響檢測精度的因素。【方法】對機器視覺系統采集的柑橘圖像進行圖像裁切、RGB空間至HSI空間的轉換和差值法去圖像背景,用色調H和飽和度S為輸入,建立小波神經網絡柑橘pH預測模型,無損檢測柑橘pH。【結果】30個測試樣本的檢測結果表明,預測偏差最大值為9.95%、偏差最小值為-3.6%、平均偏差為0.8%、標準偏差為2.95%,pH±0.1精度內的正確識別率為80%,pH±0.2精度內的正確識別率為93.33%。【結論】漣紅溫州蜜柑pH與果皮色澤之間具有相關性,可用機器視覺檢測其pH。但進一步提高預測精度,首先須在圖像處理環節上去除各種蟲斑與病斑的影響。

    幾種微生物發酵劑對風鴨揮發性風味化合物的影響
    許慧卿,汪志君,于 海,蔣云升,王畏畏,焦 玉
    中國農業科學. 2008, 41(11):  3746-3753 .  doi:10.3864/j.issn.0578-1752.2008.11.041
    摘要 ( 1074 )   PDF (384KB) ( 903 )   收藏
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    【目的】探討幾種微生物對風鴨揮發性風味化合物的影響,為肉制品發酵劑的開發提供理論依據。【方法】分別以米酒乳桿菌(Lactobacillus sake)、木糖葡萄球菌(Staphylococcus xylosus)和德漢遜氏酵母菌(Dabaryomyces Hansenula)為發酵劑生產風鴨,采用頂空固相微萃取和氣質聯用(HS-SPME/GC-MS)對發酵風鴨肌肉中的揮發性風味化合物種類和相對含量進行測定。【結果】共檢測到風味化合物117種,主要包括酸10種、醛20種、醇17種、酮14種、酯類27種、烴20種、酚類2種和雜環7種。其中對照中檢測到64種風味化合物,米酒乳桿菌、木糖葡萄球菌和德漢遜氏酵母菌處理中分別檢測到69、69和73種風味化合物。在各處理中,對照樣品中烴類含量較高,米酒乳桿菌處理中酸的含量較高,木糖葡萄球菌處理中醛的含量較高,而德漢遜氏酵母菌處理中醇和酯的含量高。【結論】微生物對風鴨揮發性風味化合物的種類和含量都產生了非常明顯的影響。這些揮發性風味化合物對風鴨特有風味的形成起到了重要作用。

    畜牧·資源昆蟲
    萊蕪豬和杜洛克豬背最長肌肌球蛋白重鏈組成
    呼紅梅,朱榮生,張 印,王懷中,武 英
    中國農業科學. 2008, 41(11):  3754-3759 .  doi:10.3864/j.issn.0578-1752.2008.11.042
    摘要 ( 873 )   PDF (384KB) ( 667 )   收藏
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    【目的】比較萊蕪豬和杜洛克豬背最長肌肌球蛋白重鏈(MyHC)Ⅰ、Ⅱa、Ⅱx、Ⅱb的組成差異,探討萊蕪豬肉質優良的機理。【方法】選擇體重100 kg的萊蕪豬10頭和杜洛克豬7頭,測定肉質性狀,并用實時熒光定量RT-PCR方法檢測背最長肌4種MyHC亞型mRNA的表達量,分析品種間差異。【結果】萊蕪豬肌肉大理石紋評分和肌內脂肪含量顯著高于杜洛克豬,肌肉失水率、剪切值和肌纖維直徑顯著低于杜洛克豬(P<0.01);萊蕪豬背最長肌MyHCⅡa、Ⅱx mRNA表達量顯著高于杜洛克豬,MyHCⅡb mRNA表達量則顯著低于杜洛克豬,而MyHCⅠmRNA表達量無明顯變化。【結論】萊蕪豬背最長肌氧化型肌纖維比例高于杜洛克豬,酵解型肌纖維比例低于杜洛克豬。表明萊蕪豬背最長肌利用脂肪轉化為能量的能力較高,即萊蕪豬背最長肌氧化代謝功能高于杜洛克豬,這可能與其肌內脂肪含量較高、肉質細嫩多汁相關,這一結果可為通過肌纖維類型的選育提高肉品質的研究工作提供思路。

    豬肌內脂肪前體細胞與皮下脂肪前體細胞分化過程中基因差異表達分析
    張罕星,朱曉彤,束 剛,周桂炫,高 萍,高淑靜,張常明,江青艷,陳瑤生
    中國農業科學. 2008, 41(11):  3760-3768 .  doi:10.3864/j.issn.0578-1752.2008.11.043
    摘要 ( 1038 )   PDF (584KB) ( 1251 )   收藏
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    【目的】探討豬肌內脂肪細胞與皮下脂肪細胞的基因表達差異。【方法】通過改進的膠原酶消化法,分別從豬(大×長二元雜)皮下脂肪組織和背最長肌肌肉組織中分離脂肪前體細胞,用850 nmol•L-1胰島素和50 nmol•L-1地塞米松誘導細胞分化,采用油紅O提取法測定細胞分化過程中的聚酯水平。同時采用實時熒光定量PCR方法檢測細胞分化過程中的轉錄調控因子基因(PPARγ、C/EBP β與SREBP-1)、脂肪合成酶相關基因(GPDH、ACC和SCD-1)、脂肪酸轉運相關基因(LPL、FAT與AP2)以及肌肉旁分泌因子受體基因(ACVR2B、IL-6R和IGF-1R)的表達模式。【結果】豬肌內脂肪前體細胞誘導后聚酯的速度快于皮下脂肪前體細胞。與此相似,肌內脂肪前體細胞中PPARγ、SREBP-1、SCD-1、LPL、AP2和FAT的mRNA表達在分化后期均顯著高于皮下脂肪細胞。肌肉旁分泌因子受體基因ACVR2B、IGF-IR和IL-6R mRNA在皮下脂肪前體細胞隨分化程度的增加其表達水平逐漸降低,但肌內脂肪前體細胞ACVR2B卻在誘導后不斷上調。【結論】建立了豬肌內和皮下脂肪前體細胞的原代培養模型,發現在離體培養條件下豬肌內脂肪前體細胞比皮下脂肪前體細胞具有更強的分化聚酯能力。從在體情況下肌內脂肪的沉積量少,沉積時間晚等現象可以推測肌內脂肪前體細胞的分化有可能受到肌肉旁分泌因子的局部抑制。

    大額牛瘤胃細菌16S rRNA基因序列分析
    毛華明,馬松成,陳 靜,鄧衛東,和天寶
    中國農業科學. 2008, 41(11):  3769-3775 .  doi:10.3864/j.issn.0578-1752.2008.11.044
    摘要 ( 939 )   PDF (361KB) ( 1326 )   收藏
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    【目的】研究大額牛(Bos frontalis)瘤胃細菌16S rRNA基因序列,為揭示大額牛瘤胃細菌組成的多樣性以及開發這一珍稀生物資源提供分子生物學依據。【方法】采用細菌通用引物F27和R1492對目標基因進行PCR擴增,克隆、測序后利用Neighbor-joining方法構建系統進化樹。【結果】共獲得147個16S rRNA基因序列,在GenBank登錄號為DQ673466~DQ673612。按照97%的相似性標準,這些序列被分為86個操作分類單元。有16個序列與已培養菌的序列相似性≥97%,占總序列的10.9%;另有22個序列與已培養菌的序列相似性為90%~97%,占總序列的15%;剩余109個序列為未培養、鑒定菌,所占比例高達74.1%。系統進化分析顯示,大額牛瘤胃細菌主要分布于低G+C含量細菌門(57.1%)和噬纖維菌/屈擾桿菌/擬桿菌門(42.2%),僅有一個序列位于螺旋體門。【結論】本試驗獲得了大額牛瘤胃細菌16S rRNA基因序列,為進一步研究大額牛瘤胃微生態系統組成及其與飼料消化之間的關系奠定了基礎。

    湖羊肌肉組織H-FABP和PPARγ基因表達水平與肌內脂肪含量的相關研究
    郝稱莉,李齊發,喬 永,劉振山,邵丹青,李偉華,林建良,吳福榮,沈補根,謝 莊
    中國農業科學. 2008, 41(11):  3776-3783 .  doi:10.3864/j.issn.0578-1752.2008.11.045
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    【目的】研究湖羊不同部位肌肉H-FABP和PPARγ基因mRNA的發育變化規律,結合屠宰試驗分析H-FABP和PPARγ基因mRNA表達水平對肌內脂肪沉積的影響。【方法】選取初生、1、2、3、4、5、6月齡湖羊公羔和12月齡的成年公湖羊各5只,屠宰后取背最長肌、腰大肌和股二頭肌檢測肌內脂肪含量,用熒光實時定量PCR法檢測湖羊不同部位肌肉H-FABP和PPARγ基因mRNA表達水平,分析其在不同時期的變化及其與肌內脂肪含量的關系。【結果】(1)隨著月齡的增加,肌內脂肪(intramuscular fat,IMF)含量持續上升;同月齡背最長肌和腰大肌IMF含量顯著高于股二頭肌(P<0.05)。(2)0~6月齡及12月齡,湖羊不同部位肌肉H-FABP基因和PPARγ基因mRNA表達的發育變化模式不同,具有組織特異性。隨著月齡的增加,背最長肌和腰大肌H-FABP基因mRNA的表達模式基本相同,2月齡達最高(P<0.01),總體呈現上升-下降-上升的趨勢,而股二頭肌H-FABP基因mRNA的表達量無顯著變化。對于PPARγ基因來說,背最長肌PPARγ基因mRNA的表達量4月齡達最高(P<0.01),然后下降并保持相對穩定水平,而腰大肌和股二頭肌PPARγ基因mRNA的表達量隨著月齡的增長大體呈上升-下降-上升-下降的趨勢。同月齡H-FABP基因和PPARγ基因mRNA的表達量在湖羊不同部位肌肉表現有明顯的差異。(3)湖羊不同肌肉部位基因的表達量與IMF含量相關分析表明,不同部位肌肉H-FABP基因mRNA的表達量與IMF含量呈不同程度的正相關;而PPARγ基因mRNA的表達量與IMF含量則呈不同程度的負相關。【結論】湖羊不同部位肌肉肌內脂肪沉積的發育變化基本相同,在生長發育期都是隨著月齡的增加其IMF含量上升;不同部位肌肉H-FABP和PPARγ基因表達模式不同,H-FABP基因在湖羊生長早期對肌內脂肪的沉積可能有正調控作用,而PPARγ基因可能對肌內脂肪的沉積產生一定的影響。

    家蠶磷酸吡哆醇氧化酶cDNA克隆、鑒定及基因結構分析
    張劍韻,石瑞君,黃碩豪,黃龍全
    中國農業科學. 2008, 41(11):  3784-3792 .  doi:10.3864/j.issn.0578-1752.2008.11.046
    摘要 ( 929 )   PDF (769KB) ( 847 )   收藏
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    【目的】了解家蠶維生素B6關鍵代謝酶磷酸吡哆醇氧化酶(PNPO)的基因結構。【方法】利用生物信息學原理和PCR方法,克隆出編碼家蠶(Bombyx mori)PNPO的cDNA(GenBank登錄號:DQ452398);采用T7啟動子/T7 RNA聚合酶原核表達系統對cDNA進行體外表達,并通過酶活檢測進行表達產物的功能鑒定;依據家蠶基因組數據庫信息和得到的cDNA,對家蠶PNPO基因結構進行分析。【結果】克隆到的cDNA含有771 bp的完整可讀框,編碼一條分子量為29.86 kD、含257個氨基酸殘基的蛋白質。序列比對顯示此蛋白質與人類PNPO具有51.44%的同源性,包含PNPO家族共有的保守序列,但在人和大腸桿菌PNPO中具有重要作用的幾個氨基酸殘基在此蛋白質中被替換。在以磷酸吡哆醇(PNP)為底物時,表達產物Pro-PNPO的酶活力約為17 nmol•min-1•mg-1。家蠶PNPO基因包含5個外顯子和4個內含子,跨越3.5 kb DNA序列,所有外顯子/內含子交接點都遵從gt/ag剪接規則,基因的5’端啟動子調控區發現有TATA-box和CAAT-box保守基序。【結論】獲得家蠶PNPO基因,可利用該基因在分子水平上研究家蠶的VB6代謝特征,弄清PNPO家族的特征及其在生物進化過程中的演變規律。

    意大利蜜蜂(A.m.ligustica)雄蜂卵期發育蛋白質組分析
    房宇,李建科
    中國農業科學. 2008, 41(11):  3793-3800 .  doi:10.3864/j.issn.0578-1752.2008.11.047
    摘要 ( 1331 )   PDF (420KB) ( 757 )   收藏
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    【目的】對原種意大利蜜蜂(Apis mellifera ligustica Spinola,1806)(意蜂)雄蜂的3 d卵期發育進行蛋白質組研究,以探明該蜂種雄蜂卵期蛋白質表達調控方面的一些特點,從而揭示其發育的分子機理。【方法】采用雙向電泳法對意蜂雄蜂卵期蛋白質組進行研究。【結果】3 d的卵期發育中,按順序分別檢測到200、242、233個蛋白,這些蛋白的分子量在12.42~169.60 kD,等電點為4.50~9.00。164個蛋白在3 d卵期發育過程中均有表達,其中79 個蛋白在3 個日齡的表達量無顯著差異(P>0.05),7個共有蛋白表達量隨卵期發育呈顯著上調(P<0.05)趨勢,而4個共有蛋白呈顯著下調(P<0.05)趨勢。同時卵期3 d分別有11、18和18個特異的蛋白表達。除共有及特有蛋白外,還有17個蛋白在第1 日齡和第2日齡表達而在第3 日齡關閉;43個蛋白在第2日齡和第3日齡表達而在第1日齡關閉;僅有8個蛋白在第2日齡關閉,而在第1日齡和第3日齡表達。【結論】結果初步表明意蜂雄蜂卵期發育過程中第2日齡蛋白表達最為活躍;卵期3 d所表達的共有蛋白,可能是調控意蜂雄蜂卵期發育所必需的保守蛋白,這些蛋白的表達模式存在一定的差異;不同日齡表達的特異性蛋白,表明不同發育階段的卵需要不同的特異性蛋白來調控。同時也表明雄蜂卵期發育較工蜂卵表達的保守蛋白更多,這將給蜜蜂的基因改良帶來便利。

    獸醫
    口蹄疫病毒O、A、AsiaⅠ型定型診斷膠體金免疫層析方法的建立
    蔣 韜,梁 仲,陳 涓,何繼軍,呂 律,馬維民,劉在新,劉湘濤
    中國農業科學. 2008, 41(11):  3801-3808 .  doi:10.3864/j.issn.0578-1752.2008.11.048
    摘要 ( 1122 )   PDF (387KB) ( 1685 )   收藏
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    【目的】建立一種從田間樣品中快速、靈敏、簡便檢測O、A、Asia I型口蹄疫病毒抗原的膠體金免疫層析方法(GICA)。【方法】采用檸檬酸三鈉還原制備膠體金顆粒,標記純化的標準株O、A、Asia I型口蹄疫抗體。將純化的口蹄疫流行株O/China99,A/AF72 and AsiaⅠ/China05抗體和羊抗豚鼠抗體分別包被在硝酸纖維素膜上,作為檢測帶與質控帶。經試驗條件優化,組裝形成膠體金定型診斷試劑盒。【結果】本試驗研制的口蹄疫定型試劑盒具有良好的靈敏度,可檢測到7.8×104 LD50(1﹕128倍稀釋乳鼠毒)的病毒量。同時對陽性及陰性樣品進行3次重復檢測結果完全相同,說明其有較好的重復性;特異性試驗證實該方法在檢測口蹄疫臨床癥狀相似病原,如豬水皰病抗原(SVD)、水泡性口炎(VS)、水泡性疹(VES)等病毒時無交叉反應;試劑盒對206份已知血清型田間及實驗室樣品的符合率試驗,O、A、AsiaⅠ型和陰性樣本的符合率分別為92.45 %、91.66%、92.75%、100%定型準確率94.58%。試劑盒在4℃下可保存6個月。【結論】本試驗研發的口蹄疫病毒膠體金定型診斷試劑盒是一種快速、靈敏、特異的FMD抗原檢測方法,對基層現場具有廣泛應用價值。

    中藥成分復方對兔外周血淋巴細胞增殖、IFN-γ和IL-10的mRNA表達以及兔出血癥疫苗免疫效果的影響
    楊龍圣,胡元亮,薛家賓,王 芳,王德云,徐為中
    中國農業科學. 2008, 41(11):  3809-3815 .  doi:10.3864/j.issn.0578-1752.2008.11.049
    摘要 ( 949 )   PDF (374KB) ( 720 )   收藏
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    【目的】研究兩個中藥成分復方(cCHMIs)的免疫增強作用和機理。【方法】選擇黃芪多糖、淫羊藿多糖、蜂膠黃酮和人參皂苷4種中藥成分組成兩個復方,用MTT法和熒光定量RT-PCR法測定它們對兔外周血淋巴細胞增殖和IFN-γ、IL-10 mRNA的表達影響;并將兩個復方作為佐劑,配合兔出血癥疫苗免疫幼兔,以鋁膠苗和無佐劑苗為對照,分別于免疫后7、14、21、35、49 d用MTT法和血凝抑制法測定外周血淋巴細胞增殖和血清抗體的動態變化,于免疫后63 d測定免疫器官指數和攻毒保護率。【結果】兩個復方在體外均可以顯著促進淋巴細胞增殖,提高淋巴細胞IFN-γ、IL-10 mRNA的表達;作為佐劑,兩個復方可以顯著提高免疫兔的血清抗體效價,促進體內淋巴細胞增殖,顯著促進圓小囊、腸淋巴結等免疫器官的發育,有較高的攻毒保護效果。【結論】兩個復方中藥成分具有較強的免疫增強作用,可被開發成新型的免疫增強劑。

    急性熱應激肉雞組織中Hsp90的表達與應激損傷
    雷 蕾,鮑恩東
    中國農業科學. 2008, 41(11):  3816-3821 .  doi:10.3864/j.issn.0578-1752.2008.11.050
    摘要 ( 1509 )   PDF (472KB) ( 873 )   收藏
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    【目的】探討急性熱應激條件下肉雞組織的病理性損傷及其Hsp90含量變化的相關性。【方法】將100只1日齡AA肉雞隨機分成5組,每組20羽。正常環境溫度下對受試雞進行30 d的適應性飼養后,除對照組外,將其余80只受試雞的環境溫度迅速由(25±1)℃上升至(40±1)℃,并分別持續進行2、3、5和10 h的熱應激處理。利用組織病理、免疫組織化學和酶聯免疫吸附試驗,檢測急性熱應激狀態下受試肉雞心臟、肝臟及腎臟組織的病理性損傷和Hsp90的定位與表達。【結果】在熱應激開始的2~5 h,受試雞心臟、肝臟和腎臟組織的實質細胞損傷表現出隨熱應激時間的持續而逐漸加重的趨勢,病理變化特征以顆粒變性和水泡變性為主。熱應激2 h后,Hsp90在肉雞心臟、肝臟、腎臟組織中的表達量呈極顯著增加(P<0.01),而在應激持續到3~5 h時呈現下降趨勢,待熱應激持續至10 h后,心臟和腎臟組織中Hsp90的表達量又逐漸上升。【結論】熱應激狀態下肉雞組織細胞的應激性病理損傷與Hsp90的分布和含量存在一定程度的關聯。Hsp90含量隨熱應激時間延長而出現先升高、然后下降并逐漸回升的波動,與同期各組織細胞所呈現的病理損傷變化相吻合,表明在熱應激初期促使Hsp90表達量增加,以增強細胞在不利環境中的生存能力。

    研究簡報
    基于SSR標記的太湖流域粳稻地方品種遺傳多樣性研究
    金偉棟,程保山,洪德林
    中國農業科學. 2008, 41(11):  3822-3830 .  doi:10.3864/j.issn.0578-1752.2008.11.051
    摘要 ( 1207 )   PDF (393KB) ( 988 )   收藏
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    【目的】評價太湖流域粳稻地方品種的遺傳多樣性。【方法】利用58對SSR引物,對基于主要農藝性狀構建的太湖流域粳稻地方品種核心種質庫的122個品種進行DNA水平的多態性分析,并與15個現代育成品種做比較。【結果】(1)地方品種群體中53個SSR位點共檢測到216個等位片段,每個多態性位點等位片段數的變化范圍為2~7個,平均為4.08個;71.7%的SSR位點具有3個以上等位片段;53個位點PIC值的變化范圍為0.031~0.773,平均為0.413;Nei’s基因多樣性指數He為0.378;品種間遺傳距離平均為0.419;12條染色體中,第5染色體平均等位片段數最多,第11染色體平均PIC值最大。(2)現代育成品種群體檢測到的等位片段數、位點PIC值、Nei’s基因多樣性指數和品種間遺傳距離均比地方品種群體相應值小,地方品種的遺傳多樣性大于現代育成品種。(3)聚類分析顯示,在遺傳相似系數0.63處,地方品種和現代育成品種可以明確區分開來。【結論】太湖流域粳稻地方品種具有豐富的遺傳多樣性,且與現代育成品種有較大的遺傳差異,可用以拓寬育成品種的遺傳基礎。

    苗期水稻葉片發育進程的差異蛋白質組學分析
    邵彩虹,王經源,林文雄
    中國農業科學. 2008, 41(11):  3831-3837 .  doi:10.3864/j.issn.0578-1752.2008.11.052
    摘要 ( 1151 )   PDF (389KB) ( 1265 )   收藏
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    【目的】從蛋白質組學角度對雜交水稻汕優63苗期的葉片蛋白質組變化進行研究,以揭示水稻苗期葉片蛋白質組的表達差異。【方法】蛋白質點經雙向電泳得到分離,并采用Imagemaster 2D Elite 5.0軟件對所得到的雙向電泳圖譜進行分析比較。【結果】經圖譜分析共得到差異蛋白質點41個,其中三葉期后新增蛋白質點17個,包括9個僅在三葉期出現特異的特異蛋白質點,13個蛋白質點表達豐度先逐漸增強隨后減弱或在消失,其它11個蛋白質點中,自二葉期開始表達豐度呈現下降的蛋白質點有3個,保持上升的有6個,不規律出現的有2個;其中的15個蛋白質點經質譜分析得到鑒定。【結論】蛋白質是細胞功能執行者,受細胞功能或細胞環境變化的影響,因此,上述蛋白質發生變化的原因可能與水稻苗期分蘗發生有關系。

    小麥谷蛋白膨脹指數發育動態的QTL分析
    劉 麗,李衛華,劉 偉,曹連莆,李保云,劉廣田
    中國農業科學. 2008, 41(11):  3838-3844 .  doi:10.3864/j.issn.0578-1752.2008.11.053
    摘要 ( 868 )   PDF (391KB) ( 833 )   收藏
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    【目的】檢測小麥不同發育時期谷蛋白膨脹指數(SIG)的QTL,闡明不同QTL的時空表達方式,揭示SIG發育的分子遺傳機理。【方法】利用小麥京771×Pm97034的175個重組自交系(RIL)群體,對小麥谷蛋白膨脹指數(SIG)發育動態進行了QTL分析。【結果】在籽粒灌漿的5個時期,一共檢測到8個非條件QTL和5個條件QTL,但沒有一個QTL能在5個時期都有效應。花后17d是控制SIG形成基因表達的活躍期,非條件分析和條件分析各檢測到2個QTL位點,這4個位點分別位于1D、7D和4D染色體上,其加性效應能解釋15.5%的凈表型變異。花后22 d,控制SIG的基因表達量很少,SIG表型值出現“低谷”。【結論】SIG值呈現出“低-高-低-高-低”的變化規律;這些控制SIG的基因都是在某一個特定的時期內表達,沒有一個基因能在小麥籽粒生長發育的所有階段都表達。

    普通玉米蛋白質、淀粉和油分含量的遺傳效應分析
    魏良明,戴景瑞,劉占先,鄂立柱
    中國農業科學. 2008, 41(11):  3845-3850 .  doi:10.3864/j.issn.0578-1752.2008.11.054
    摘要 ( 1195 )   PDF (197KB) ( 920 )   收藏
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    【目的】研究玉米蛋白質、淀粉和油分含量的遺傳主效應及基因型×環境互作效應。【方法】采用谷物種子性狀遺傳模型和統計方法,分析10個自交系及90個F1、F2雜交組合在兩個種植地點的試驗數據。【結果】蛋白質、淀粉、油分含量的遺傳主效應方差(VG)和基因型×環境互作方差(VGE)分別占各性狀總遺傳方差(VG +VGE)的38.5%和61.5%、48.2 %和51.8%、48.2%和51.8%。在遺傳主效應中,蛋白質、油分含量同時受控于種子和母體效應;淀粉含量以母體效應為主,種子(胚乳)效應次之;細胞質效應相對較小。在基因型×環境互作效應中,3個品質性狀均以種子、母體×環境互作為主,未發現細胞質×環境互作。蛋白質含量以互作遺傳力(h2GE)為主;淀粉、油分含量以普通遺傳力(h2G)為主。【結論】3個品質性狀都不同程度地存在種子(胚乳或胚)、母體植株和細胞質等3套遺傳體系的遺傳主效應及基因型×環境互作。其中,蛋白質含量主要受基因型×環境互作效應影響;淀粉、油分含量同時受遺傳主效應和基因型×環境互作效應的作用。

    冬小麥葉色動態的量化研究
    朱 艷,劉小軍,譚子輝,湯 亮,田永超,姚 霞,曹衛星
    中國農業科學. 2008, 41(11):  3851-3857 .  doi:10.3864/j.issn.0578-1752.2008.11.055
    摘要 ( 958 )   PDF (301KB) ( 735 )   收藏
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    【目的】模擬小麥葉色變化的動態過程,為實現小麥生長的可視化表達奠定基礎。【方法】以不同施氮水平下不同類型小麥品種的兩個生長季田間試驗為基礎,通過連續測量不同處理條件下小麥主莖和分蘗不同葉位葉片的SPAD值,綜合分析小麥葉片SPAD值隨生育進程的變化規律及其與RGB值的關系,進而構建基于SPAD的冬小麥葉色變化動態的模擬模型。【結果】模型采用分段函數描述葉片SPAD值隨生育進程的動態變化過程:第1階段為基于二次曲線的葉色增強過程;第2階段為相對穩定的功能期葉色維持過程;第3階段為基于二次曲線的葉色減弱過程;并基于葉片氮含量表達了氮素供應水平對葉片SPAD值變化規律的影響,同時用線性方程描述了葉片SPAD值與RGB值之間的定量關系。利用獨立的小麥田間試驗資料對所建模型進行了測試和檢驗,顯示不同時刻主莖和分蘗葉片SPAD預測值的平均RMSE分別為11.60%和9.03%。【結論】本模型具有較強的動態預測性和可靠性,為進一步建立虛擬小麥生長系統奠定了基礎。

    氮素和鉀素對小麥籽粒淀粉合成關鍵酶活性的影響
    鄒鐵祥,戴廷波,姜 東,荊 奇,曹衛星
    中國農業科學. 2008, 41(11):  3858-3864 .  doi:10.3864/j.issn.0578-1752.2008.11.056
    摘要 ( 964 )   PDF (322KB) ( 762 )   收藏
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    【目的】闡明氮、鉀施肥對小麥淀粉合成關鍵酶活性的影響。【方法】在大田栽培條件下,以兩個品質類型不同的冬小麥品種‘寧麥9號’(弱筋)和‘揚麥10號’(中筋)為材料,研究氮、鉀施肥對小麥籽粒中淀粉合成相關酶活性和淀粉含量的影響及其與開花期旗葉氮、鉀營養的關系。【結果】與不施氮、鉀肥的對照處理相比,氮、鉀施肥明顯提高了花后籽粒中的蔗糖含量及蔗糖合成酶(SS)、可溶性淀粉合成酶(SSS)和束縛態淀粉合成酶(GBSS)的活性,提高了淀粉產量,但降低了總淀粉和支鏈淀粉含量,兩小麥品種的表現基本一致,其中氮肥的作用大于鉀肥,施氮降低了直鏈淀粉含量,施鉀提高了直鏈淀粉含量,寧麥9號高于揚麥10號。【結論】相關分析表明,氮鉀肥料配合提高開花期旗葉氮、鉀營養并維持適宜的氮/鉀比,是氮、鉀施肥提高籽粒SSS和GBSS活性,進而促進小麥籽粒淀粉合成、改善籽粒品質的主要生理因素。施鉀提高兩小麥品種GBSS活性是直鏈淀粉含量提高的酶學基礎。較高的SS、SSS和GBSS活性是弱筋品種寧麥9號較高淀粉含量的酶學保障。

    不同棉花品種纖維比強度形成的時空差異及其與溫度的關系
    王友華,束紅梅,陳兵林,許乃銀,趙永倉,周治國
    中國農業科學. 2008, 41(11):  3865-3871 .  doi:10.3864/j.issn.0578-1752.2008.11.057
    摘要 ( 1165 )   PDF (228KB) ( 624 )   收藏
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    【目的】探討不同遺傳背景棉花品種纖維比強度形成的溫度敏感性特征。【方法】采用SPPS(11.0)統計分析軟件分析2001~2004年長江流域棉花品種區域試驗纖維品質資料。【結果】在相同條件下,同一品種的纖維比強度的變異性較為穩定,即棉纖維比強度的變異性具有較強的遺傳(品種)特性,不同品種其纖維比強度變異性存在顯著差異,因此可根據纖維比強度變異性大小對品種進行類型劃分。研究發現各品種不同果枝部位及“四桃”間纖維比強度的變異性均存在差異,根據不同果枝部位及“四桃”間纖維比強度的變異系數分別聚類,可將14個品種劃分為纖維比強度形成對溫度敏感型,中間型和非敏感型3個類群。【結論】纖維比強度變異性大小具有一定的穩定性和品種特性,不同品種纖維比強度的穩定性存在較大差異。棉纖維比強度的變異性主要來源于溫度的變異性。不同品種棉花纖維比強度變異性的顯著差異也可能主要來源于其對溫度變化敏感性的差異。

    磷素對不同大豆品種7S和11S球蛋白亞基組成及含量的影響
    蔡柏巖,葛菁萍,祖 偉
    中國農業科學. 2008, 41(11):  3872-3877 .  doi:10.3864/j.issn.0578-1752.2008.11.058
    摘要 ( 1066 )   PDF (330KB) ( 778 )   收藏
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    【目的】研究不同磷素水平對不同大豆品種7S和11S球蛋白亞基組成及含量的影響。【方法】選用東農42(高蛋白品種)、合豐25(中間型品種)、東農46(高油品種)3個大豆品種作為試驗材料,采用盆栽,在每千克土壤施N和K2O各為0.033 g基礎上,設P1、P2、P3、P4 4個P處理(即每千克土壤分別施P2O5 0、0.033、0.067、0.100 g),采用SDS-PAGE電泳法測定7S和11S球蛋白亞基組成和含量。【結果】3個大豆品種7S球蛋白由α′、α、γ、β4個亞基組成,11S球蛋白由酸性亞基和堿性亞基組成;各種亞基分子量在品種間差異不顯著。同一品種不同處理間東農42和合豐25兩個品種7S、11S球蛋白和各種亞基含量P3處理最高,東農46 P2處理最高;同一處理不同品種間7S、11S球蛋白和各種亞基含量始終是東農42最高,東農46最低,合豐25處于二者之間;3個大豆品種7S和11S球蛋白及各種亞基含量在品種間和施磷處理間差異顯著。【結論】施磷對3個大豆品種7S和11S球蛋白各種亞基組成沒有影響,對分子量影響很小。施磷對3個大豆品種7S和11S球蛋白和亞基含量有影響,適宜的施磷量有利于提高球蛋白和亞基的含量。

    食用型甘薯塊根碳水化合物代謝特性及與品質的關系
    史春余,王汝娟,梁太波,王振林
    中國農業科學. 2008, 41(11):  3878-3885 .  doi:10.3864/j.issn.0578-1752.2008.11.059
    摘要 ( 1124 )   PDF (345KB) ( 796 )   收藏
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    【目的】探討食用型品種塊根碳水化合物代謝特性及與品質的關系。【方法】以淀粉型品種為對照,選用典型的食用型品種于2004~2005年2個生長季在山東農業大學試驗農場進行試驗研究。試驗采用塊根膨大過程中定期取樣的方法,觀察塊根膨大過程中可溶性糖、淀粉及淀粉組分含量的變化、淀粉酶活性變化及其與甘薯收獲期塊根品質的關系。【結果】與淀粉型品種比較,食用型品種塊根總淀粉含量、直鏈淀粉含量以及支鏈淀粉含量均較低,可溶性總糖和β-胡蘿卜素含量較高;塊根粉的高峰黏度和崩解值等較高、糊化溫度較低;塊根蒸煮食味較好。栽秧100 d以后,食用型甘薯塊根總淀粉含量和β-淀粉酶活性下降,可溶性總糖含量提高,其變化趨勢與淀粉型品種相反。【結論】食用型品種塊根膨大后期,由于淀粉酶的作用導致淀粉分解是其總淀粉含量較低、可溶性總糖含量較高的一個重要原因。

    第三復葉期噴施草甘膦對轉基因大豆和普通大豆生理指標的影響
    原向陽,郭平毅,張麗光,王 鑫,姚滿生,王宏富
    中國農業科學. 2008, 41(11):  3886-3892 .  doi:10.3864/j.issn.0578-1752.2008.11.060
    摘要 ( 913 )   PDF (228KB) ( 713 )   收藏
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    【目的】比較不同大豆品種經草甘膦處理后植株體內生理指標的變化,闡明轉基因抗草甘膦大豆與常規大豆對草甘膦及其劑量的生理生化反應差異。【方法】采用隨機區組的設計方法,在第三復葉期噴施不同劑量的41%草甘膦異丙胺鹽水劑和10%草甘膦水劑,研究其對不同大豆品種葉片葉綠素含量指數、莽草酸含量和SOD活性等生理指標的影響。【結果】41%草甘膦異丙胺鹽水劑和10%草甘膦水劑可以抑制抗草甘膦大豆RR1、RR2和普通大豆晉大75、晉豆27葉片的葉綠素合成,抗草甘膦大豆RR1、RR2對兩種藥劑的抗性高于普通大豆晉大75和晉豆27。4個大豆品種葉片的莽草酸含量隨著草甘膦兩種制劑劑量的增加而增加,RR1和RR2的增加趨勢明顯小于晉大75和晉豆27。草甘膦2種制劑對4個大豆品種葉片SOD活性的影響不大。41%草甘膦異丙胺鹽水劑對4個大豆品種葉片莽草酸含量的影響大于10%草甘膦水劑,而對葉綠素含量和SOD活性的影響卻小于10%草甘膦水劑。【結論】大豆不同品種對草甘膦的敏感程度不同,總的來說抗草甘膦大豆的抗性>普通大豆,RR1的抗性>RR2,晉豆27(晚熟)的抗性>晉大75(早熟)。在這3個生理指標中,敏感性依次為葉片莽草酸含量>葉綠素含量> SOD活性。

    能產生多角體的可線性化桿狀病毒的構建
    于 峰,朱姍穎,李 兵,沈衛德,王文兵
    中國農業科學. 2008, 41(11):  3893-3897 .  doi:10.3864/j.issn.0578-1752.2008.11.061
    摘要 ( 1308 )   PDF (361KB) ( 710 )   收藏
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    【目的】改進用于同源重組研究的制備桿狀病毒DNA的方法。【方法】采用PCR方法從BmNPV中擴增出多角體基因,并在其兩端引入Bsu36 I酶切位點。將此片段克隆入轉移載體pBacPAK8中,與線性化的桿狀病毒DNA共轉染昆蟲細胞,獲得重組病毒。該病毒能形成多角體,便于純化,同時可以被 Bsu36 I酶切。該重組病毒的多角體純化后被裂解,并提取病毒DNA。病毒DNA經Bsu36 I酶切后,與含gfp基因的轉移質粒共轉染家蠶BmN細胞,在熒光顯微鏡下觀察重組病毒的轉染效率。【結果】BmNPV多角體基因克隆入轉移載體pBacPAK8中后,與線性化的AcPak6及BmPak6 DNA共轉染sf細胞及BmN細胞,均能產生大量的多角體。獲得的重組病毒DNA經酶切后,進一步與含gfp基因的轉移質粒共轉染的實驗表明,這種改造后的重組病毒仍具有較高的轉染重組率。【結論】本實驗成功地對用于同源重組的桿狀病毒DNA進行了改進,簡化了病毒DNA的純化方法,并且重組效率較高。

    甜菜夜蛾腸粘蛋白cDNA基因的分子克隆與序列分析
    張 霞,李國勛,郭 巍
    中國農業科學. 2008, 41(11):  3898-3904 .  doi:10.3864/j.issn.0578-1752.2008.11.062
    摘要 ( 1257 )   PDF (550KB) ( 887 )   收藏
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    【目的】圍食膜(peritrophic membrane,PM)是襯托于昆蟲中腸內的一種無脊椎動物特有的幾丁質—蛋白復合結構,它能夠促進食物消化,保護消化道免受微生物入侵。昆蟲腸粘蛋白(IIM)是其重要組分之一。因此,作為中腸防御系統的PM已成為害蟲生物防治的新靶標。分離和鑒定甜菜夜蛾腸粘蛋白基因cDNA。【方法】以甜菜夜蛾(Spodoptera exigua)中腸為材料,依據stratagene公司試劑盒方法,構建甜菜夜蛾中腸cDNA表達文庫。依據現代免疫學原理,利用粉紋夜蛾腸粘蛋白特異性多克隆抗體(anti-IIM antiserum)篩選該文庫。【結果】cDNA表達文庫滴度為8.51×106pfu/ml,重組率為99.97%。篩選文庫得到一個編碼甜菜夜蛾腸粘蛋白的cDNA克隆SeIIM-8。核酸序列分析顯示,該cDNA長為2 234 bp,在polyA末端上游24 bp處有一個多聚腺苷酸信號序列AAATTA。最長讀碼框(ORF)編碼714個氨基酸,與粘蟲腸粘蛋白(Mamestra configurata intestinal mucin)序列相似性為42%。結構域分析表明,它具有5個幾丁質結合功能域;一個富含蘇氨酸類粘蛋白結構域,重復序列為TTTQAPTTT,高度O-聯糖基化;一個天冬氨酸富集區,序列DDDKPGCNGNCPE重復達12次,該區域在已知的昆蟲腸粘蛋白中屬首次發現。與已知腸粘蛋白比較,推測其5′端還應包括信號肽序列和幾丁質結合功能域的未知序列。SeIIM-8基因在GenBank登錄號為EU047712。【結論】從本研究構建的高質量甜菜夜蛾中腸cDNA表達文庫中篩選得到一個新的圍食膜蛋白基因SeIIM-8。

    促釋型輕燒氧化鎂的養分釋放特性及其對番茄生長的影響
    張俊濤,趙 冰,劉可星,廖宗文
    中國農業科學. 2008, 41(11):  3905-3912 .  doi:10.3864/j.issn.0578-1752.2008.11.063
    摘要 ( 1084 )   PDF (320KB) ( 724 )   收藏
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    【目的】探討促釋型鎂肥的養分釋放特性、肥效及其作用機理。【方法】采用連續抽提、盆栽試驗和X射線粉末衍射儀分別測定鎂肥的水溶性鎂釋放量、番茄果實重量與生物量、鎂肥的結構。【結果】連續抽提表明,促釋型輕燒氧化鎂水溶性鎂每次的釋放量高于輕燒氧化鎂(第5次除外),6次累積釋放量是輕燒氧化鎂的1.10倍。盆栽試驗結果表明,促釋型輕燒氧化鎂處理的果實重量和生物量均高于輕燒氧化鎂處理和硫酸鎂處理;施鎂肥處理的葉片鎂、硫含量顯著高于CK(無鎂肥),促釋型輕燒氧化鎂處理的番茄葉片鎂含量顯著高于輕燒氧化鎂處理和硫酸鎂處理;施鎂處理的植株中的鎂含量顯著高于CK(無鎂肥),硫的含量沒有顯著性差異;番茄生物量與葉片、植株中的鎂含量相關系數是0.8975、0.8715;X射線衍射分析結果顯示,促釋材料改變了輕燒氧化鎂的結晶狀態,促進了輕燒氧化鎂中鎂的釋放。【結論】與輕燒氧化鎂相比,促釋型輕燒氧化鎂的水溶性鎂含量、生物量均提高。

    低氧脅迫下鈣對櫻桃砧木根系抗氧化系統及線粒體功能的影響
    生利霞,馮立國,束懷瑞
    中國農業科學. 2008, 41(11):  3913-3919 .  doi:10.3864/j.issn.0578-1752.2008.11.064
    摘要 ( 1119 )   PDF (336KB) ( 628 )   收藏
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    【目的】探討低氧脅迫下鈣對櫻桃幼苗根系抗氧化系統及線粒體功能的影響。【方法】通過溶氧調節儀人為控制營養液溶氧濃度為2 mg•L-1,鈣離子濃度設4個梯度:A(0)、B(2.5 mmol•L-1)、C(5 mmol•L-1)、D(10 mmol•L-1)。以1/2 Hogland營養液水培并正常通氣處理作對照。【結果】與對照相比,各處理的SOD、POD、CAT酶活性在處理前期均受到誘導,隨處理時間的延長酶活性下降;線粒體中H2O2、MDA含量提高、 生成速率上升;營養液缺鈣處理SOD、POD、CAT酶活性降低最快,而線粒體中H2O2、MDA含量、 生成速率最高,營養液加鈣處理可以在較長時間內維持較高的SOD、POD、CAT酶活性,降低活性氧的產生及MDA含量,提高線粒體氧化磷酸化水平,從而緩解低氧傷害,且10 mmol•L-1鈣離子處理比5 mmol•L-1鈣離子處理緩解低氧傷害的作用更明顯。【結論】營養液適量加鈣可以緩解低氧脅迫對櫻桃砧木根系的傷害。

    內蒙古絨山羊次級毛囊組織形態周期性變化研究
    李玉榮,范文斌,李長青,尹 俊,張燕軍,李金泉
    中國農業科學. 2008, 41(11):  3920-3926 .  doi:10.3864/j.issn.0578-1752.2008.11.065
    摘要 ( 865 )   PDF (464KB) ( 696 )   收藏
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    【目的】研究成年絨山羊次級毛囊組織形態的周期性變化過程,為研究絨山羊絨毛生長的分子調控機理奠定組織學基礎。【方法】制作內蒙古絨山羊1年周期內每個月的皮膚組織切片,染色后顯微鏡下觀察照相。【結果】成年絨山羊次級毛囊形態在一年中呈周期性變化,在興盛期、退行期和休止期的形態各不相同。從4月份開始,次級毛囊外根鞘細胞向下分裂延伸,開始了毛囊的重建;8~9月份毛囊完成重建,毛囊結構完整;10月份毛球細胞停止分裂,毛乳頭萎縮,大量細胞程序化死亡,毛根上移,毛囊進入退行期;12月份毛囊根部上升到皮脂腺附近不再變化;翌年1~3月毛囊的形態基本沒有變化。【結論】了解了成年絨山羊次級毛囊1年內形態的周期性變化過程,為絨山羊絨毛相關領域的研究提供一定的借鑒。

    鴨Rab6基因cDNA的克隆及組織特異性表達
    龔道清,董 飚,孟 和,顧志良
    中國農業科學. 2008, 41(11):  3927-3932 .  doi:10.3864/j.issn.0578-1752.2008.11.066
    摘要 ( 896 )   PDF (442KB) ( 669 )   收藏
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    【目的】研究鴨Rab6基因序列并進行序列分析,揭示該基因的組織特異性表達規律。【方法】運用RT-PCR技術獲得鴨Rab6基因序列,并用半定量RT-PCR方法研究該基因的組織特異性表達規律。【結果】從35周齡母鴨脂肪組織中克隆了Rab6基因的cDNA序列,大小為761 bp,包含1個627 bp完整開放閱讀框,編碼208個氨基酸。該序列與小鼠、狗、人等物種的Rab6有86.1%~93.1%的同源性,而相應蛋白的同源性達97.6%以上。蛋白預測的分子量為23 534 D,等電點預測為5.42,該蛋白在78~102氨基酸處有1個跨膜結構,這些特征與人、小鼠、狗等物種高度相似。半定量RT-PCR研究結果顯示,Rab6基因在所測組織中均表達,在小腸、肝、脾、間腦、腎、脂肪組織中高度表達,腺胃、骨骼肌、肌胃組織中中度表達,心、肺、卵巢中低度表達。【結論】Rab6基因在動物進化中具有高度保守性,具有相似的生物學功能,該基因的表達具有組織特異性。

    家蠶浸酸活化滯育卵早期胚胎發育的難溶性蛋白質差異表達分析
    趙 峰,林健榮,霍永康,毛立明,孔慶明,徐秋云,鐘楊生,王葉元
    中國農業科學. 2008, 41(11):  3933-3940 .  doi:10.3864/j.issn.0578-1752.2008.11.067
    摘要 ( 1002 )   PDF (680KB) ( 696 )   收藏
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    【目的】用鹽酸刺激活化家蠶滯育卵的孵化,是蠶種生產長期沿用的一項人工孵化技術,但鹽酸能活化滯育卵的機制卻有許多未明之處,為此,從蛋白質組學的角度探討鹽酸對蠶卵滯育解除的作用關系。【方法】用雙向電泳技術和電噴霧串聯質譜技術,比較分析冷藏45 d的滯育卵浸酸前后的難溶性卵蛋白的差異表達。【結果】根據雙向電泳圖譜分析,在浸酸前的圖譜中共檢測到296個蛋白點,浸酸后的檢測到302個蛋白點,兩者相匹配的蛋白斑點有265個,匹配率為88.6%。特異性的蛋白點,浸酸前有31個,浸酸后有37個。對浸酸前存在、經浸酸處理后消失的2個特異性差異的高豐度蛋白點用電噴霧串聯質譜技術作分析,NO.1蛋白序列與漿膜蛋白(chorion protein [Bombyx mori])有55個氨基酸的肽段相匹配,NO.2蛋白序列與熱激蛋白(heat shock protein hsp 19.9 [Bombyx mori])只有15個氨基酸的肽段相匹配,推測是一種未知蛋白。【結論】滯育性蠶卵經浸酸后,難溶性卵蛋白有差異表達,浸酸前后的一些蛋白種類或分子量發生了變化。

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