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當期目錄

    2006年 第39卷 第05期 刊出日期:2006-05-10
      
    作物遺傳育種·種質資源
    水稻栽培品種淀粉合成相關基因來源及其對品質的影響
    嚴長杰,田舜,張正球,韓月澎,陳峰,李欣,顧銘洪
    中國農業科學. 2006, 39(05):  865-871 . 
    摘要 ( 1477 )   PDF (322KB) ( 1258 )   收藏
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    【目的】明確高產水稻品種中與淀粉合成相關基因的性質,為稻米品質改良提供指導。【方法】以53個典型的秈粳品種和近年育成的高產水稻品種為材料,分析了供試品種的理化品質和RVA譜特征,并利用根據秈粳基因組序列差異設計的Wx、Sbe1、Sbe3基因的分子標記,檢測了53個水稻品種的基因型,并分析了3個基因位點的遺傳學效應。【結果】3個分子標記均能很好的區分3個位點上等位基因的秈粳來源,根據3個位點的基因型可將53個品種分為6種類型。單個基因遺傳效應分析表明:在不同基因型品種間淀粉的理化特性(AC,GC, RVA)存在顯著或極顯著差異,3個基因的聯合效應在不同基因型組合間也存在顯著的差異。【結論】3個基因在高產品種培育過程中得到了廣泛的交流和重組,而且3個基因位點上的不同等位基因(秈粳)對稻米淀粉的合成具有不同的遺傳效應。其中Wx基因的影響是最主要的,Sbe1、Sbe3基因次之。3個基因位點的分子標記可為高產品種的品質改良提供快捷的工具。
    選育高產、高配合力玉米自交系的途徑與方法
    毛建昌,張世煌,李向拓
    中國農業科學. 2006, 39(05):  872-878 . 
    摘要 ( 1702 )   PDF (337KB) ( 1343 )   收藏
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    闡述了玉米近交衰退的理論基礎,強調了加性遺傳效應對雜種優勢的作用以及穗部性狀的配合力與產量的相關性,分析了系譜法不同世代家系的測交產量與家系世代的關系。提出了采用系譜法與家系內小群體輪回選擇相結合的選育方法,并從S3家系開始進行家系內輪回選擇和選育高產、高配合力玉米自交系的技術方案。
    細胞質抗除草劑谷子遺傳發育特點及應用研究
    籍貴蘇,杜瑞恒,侯升林,程汝宏,王新玉,趙秀萍
    中國農業科學. 2006, 39(05):  879-885 . 
    摘要 ( 1174 )   PDF (210KB) ( 899 )   收藏
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    【目的】研究細胞質抗除草劑基因對谷子性狀和發育的影響。【方法】利用細胞質抗除草劑谷子與敏感型谷子正反交和多代回交等方法,獲得了同核異質雜交群體和近等基因系,比較其F1、F2、回交和復合雜交世代的群體差異和近等基因系的生長發育差異。【結果】具有抗除草劑細胞質的谷子苗期發育遲緩、抽穗晚,灌漿時間短;用其雜交獲得的回交、復合雜交及F2的多數群體表現了生長弱勢。但是具有細胞質除草劑抗性的谷子,在雜交F1代可產生較大的雜種優勢;回交、復合交和F2代有較大的分離,并且個別組合表現了與敏感細胞質一樣的豐產性。【結論】細胞質抗除草劑基因對谷子的生長和性狀發育有影響,但利用雜交種可避免細胞質抗性產生的不利影響,獲得豐產性;對抗性雜交群體和個體進行選擇可達到預期效果。在對抗除草劑谷子選育時,應注重苗期發育快、根系發達、抽穗早、灌漿速度快的單株。把以上的研究結果應用于實踐,獲得了多個細胞質抗除草劑谷子的豐產雜交組合和品系。
    海島棉GbNPR1基因全長cDNA的克隆及其在煙草中的表達
    王旭靜,竇道龍,王志興,賈士榮
    中國農業科學. 2006, 39(05):  886-894 . 
    摘要 ( 1466 )   PDF (433KB) ( 828 )   收藏
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    【目的】為棉花抗黃萎病基因工程育種提供新的基因源。【方法】以海島棉為材料,利用同源序列法和RACE技術克隆海島棉中SAR途徑的主要抗病信號元件NPR1(none expresser of PR gene)的全長cDNA序列。【結果】推導的氨基酸序列與已知NPR1的同源性較低(39%~57%),但在功能區的同源性較高(79.2%),GbNPR1蛋白中含有BTB和錨蛋白重復序列結構域,且在起始密碼子上游存在2個W框。在擬南芥中,A.tNPR1起始密碼子上游有3個W框,對誘導NPR1的表達和激活NPR1介導的植物防衛反應至關重要,錨蛋白重復序列則是NPR1實現其功能必不可少的。構建了組成型植物表達載體,通過農桿菌介導法導入煙草,轉基因植株經PCR和Southern雜交檢測,表明目的基因已整合到煙草基因組中。離體葉片接種法對轉基因煙草進行抗病性鑒定,表明對煙草赤星病菌(Alternaria alternata)的抗性有明顯提高。轉基因煙草經T1代遺傳分析發現,基因以單拷貝插入。【結論】本研究得到的基因為海島棉中NPR1的同源基因。
    金大米的知識產權問題分析及啟示
    劉銀良
    中國農業科學. 2006, 39(05):  895-901 . 
    摘要 ( 1655 )   PDF (304KB) ( 1045 )   收藏
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    世界知名的轉基因作物、富含類胡蘿卜素的金大米是由公共研究機構以人道主義為目的研發的,金大米的研發過程經歷曲折,它在得到眾多榮耀的同時,也引來諸多爭議,知識產權問題就是其中一個重要方面。本文在介紹金大米技術探索之路的基礎上,通過分析金大米的知識產權問題,揭示表面上看來非常嚴重的知識產權障礙其實卻并非不可逾越,尤其在發展中國家,例如在中國現在就可能沒有與金大米相關的任何專利存在。本文還探討了在生物技術領域內逐漸興起的反公共地悲劇問題。最后結合實際,總結了金大米的知識產權問題帶給中國科技工作者的啟示,包括應認真對待在科研工作中可能出現的知識產權障礙和應認清中國現在仍基本處于公共地悲劇階段而非反公共地悲劇階段等。
    耕作栽培·生理生態
    C4轉基因水稻秧苗葉片氣孔與葉鞘維管束結構特征
    袁莉民,仇 明,王 朋,王志琴,楊建昌
    中國農業科學. 2006, 39(05):  902-909 . 
    摘要 ( 2201 )   PDF (1872KB) ( 3504 )   收藏
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    【目的】探明C4轉基因水稻高光效的生物學結構基礎。【方法】以已導入玉米C4光合關鍵酶磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶(PEPC)、丙酮酸磷酸二激酶(PPDK)、NADP-蘋果酸酶(NADP-ME)和PEPC + PPDK的轉基因水稻為材料,以其受體品種Kitaake (WT) 為對照,運用掃描電鏡觀察了秧苗葉片氣孔與葉鞘維管束結構,運用透射電鏡觀察葉肉細胞。【結果】與對照品種相比,轉C4單基因水稻葉片氣孔密度提高、面積增大,PPDK氣孔密度和氣孔面積都居各轉基因品系之首;轉C4雙聚合基因(PEPC + PPDK)水稻葉片氣孔密度提高、面積減小;C4轉基因水稻各品系葉片葉肉細胞中葉綠體基粒堆密集,有些基粒類囊體沿長軸方向排列整齊、完整;C4轉基因品系的葉鞘均比對照品種粗壯堅韌;除PPDK外,所有轉基因品系葉鞘的內外側維管束及其導管管腔、篩管等執行物質運輸功能的組織結構的面積均大于對照品種。【結論】C4轉基因水稻葉片氣孔多、面積大以及葉鞘維管束結構發達是C4轉基因水稻高光效實現的結構前提和基礎,與秧苗高的干物質積累相一致。
    水稻葉片幾何參數的模擬分析
    石春林,朱艷,曹衛星
    中國農業科學. 2006, 39(05):  910-915 . 
    摘要 ( 1233 )   PDF (260KB) ( 954 )   收藏
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    【目的】在生長模型輸出的基礎上,構建預測水稻葉片幾何參數的動態模型,以便更準確地實現水稻的虛擬生長。【方法】在試驗觀測的基礎上,分析了不同品種類型水稻分蘗與主莖同伸葉片葉長之間以及葉長與葉寬之間的定量關系,進一步耦合水稻葉齡、葉面積和莖蘗數模擬模型,進行水稻葉片幾何參數變化的動態模型構建。【結果】不同品種類型水稻分蘗與主莖同伸葉片的葉長比隨分蘗葉序呈二次曲線變化,葉長與葉寬的關系可用冪指數函數描述。運用獨立實測資料對模型進行的初步檢驗顯示,本模型可較好地模擬不同生長條件下水稻不同葉位葉片的幾何參數。【結論】本研究構建的水稻葉片幾何參數分析模型較好地體現了器官幾何參數受生態環境、品種類型和栽培措施影響的形態生理規律,為水稻虛擬生長提供了可靠和普適的葉片幾何特征確定方法。
    水稻葉色變化與氮素吸收的關系
    趙全志,丁艷鋒,王強盛,黃丕生,凌啟鴻
    中國農業科學. 2006, 39(05):  916-921 . 
    摘要 ( 1308 )   PDF (319KB) ( 1067 )   收藏
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    【目的】明確水稻葉色變化與氮素吸收的關系。【方法】采用水培試驗的方法,對水稻植株的葉色黑黃動態變化及氮素吸收速率進行研究。【結果】水稻植株在整個生育期存在著明顯的葉色和氮素吸收變化。吸氮速率高峰分別出現在剛移栽后、抽穗前20 d左右和抽穗開花期,低谷分別出現在拔節前和抽穗前10 d左右。水稻氮素吸收速率與其后2周的葉色SPAD值密切相關。【結論】水稻地上部葉色的黑黃動態變化主要是由于根系吸收氮素變化引起的,這種變化主要受制于其自身內在節奏所制約的生物學節律。在氮素濃度恒定的條件下,水稻的葉色和氮素吸收速率亦受其生物學規律所制約。
    LAI-2000冠層分析儀在不同植物群體光分布特征研究中的應用
    王謙,陳景玲,孫治強
    中國農業科學. 2006, 39(05):  922-927 . 
    摘要 ( 1273 )   PDF (303KB) ( 1363 )   收藏
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    【目的】尋求快速準確確定各種農林植物冠層透光率及其隨時間變化規律的方法,以及通過冠層分析確定農林植物冠層消光系數的方法。【方法】應用LAI-2000冠層分析儀和LI-1400數據采集器連接LI-190、LI-191傳感器,測定了高稈作物(玉米)、矮稈作物(大豆)和林木群體(楸樹、白蠟、欒樹苗圃幼林冠層)的LAI、葉傾角、冠層開度及群體透光率。【結果】(1)LAI-2000測得的冠層開度,與全天群體透光率相關非常密切。相關系數達0.9308,回歸直線的截距為0.015,接近于0,斜率為1.0668,接近于1。所以,完全可以使用冠層開度估計透光率。陰天比晴天估計效果更好。(2)用實測的LAI和群體透光率,準確計算出了農林植物群體的消光系數。消光系數有明顯的日變化,玉米冠層一日中出現兩個極大值,中午最低。【結論】LAI-2000冠層分析儀能給出群體內不同天頂角方向的天空開度,能更詳細地表達植物群體結構特征;群體內某一點的冠層開度與該點的冠層透光率在數值上幾乎相等,所以冠層內透光率測定不再需要冠層上下同時測光計算,而直接由測冠層開度得到;LAI-2000無損測定冠層LAI,可用于計算群體消光系數,文中所計算的消光系數,處在文獻報道的正常范圍。
    植物保護
    小麥抗紋枯病種質創新及QTL定位的初步研究
    蔡士賓,任麗娟,顏 偉,吳紀中,陳懷谷,吳小有,張仙義
    中國農業科學. 2006, 39(05):  928-934 . 
    摘要 ( 1227 )   PDF (334KB) ( 1385 )   收藏
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    【目的】紋枯病已成為影響中國小麥高產、穩產的主要病害之一,創造抗紋枯病小麥種質,并探討其抗性遺傳特點,是啟動小麥抗紋枯病遺傳育種研究的基礎。【方法】以中國育種中很少利用的ARz和Niavt14為紋枯病抗源,以大面積推廣品種揚麥158等為受體親本,通過復交組合,聚合抗病基因;用單粒傳法構建含137個重組自交系ARz/揚麥158遺傳群體為材料,以致病力較強的R-46菌株為紋枯病病原,分別用溝帶接菌法和牙簽接菌法進行抗紋枯病的接菌鑒定。【結果】創造出02P12、02P315等兼抗紋枯病、赤霉病或白粉病的新種質;ARz/揚麥158群體在牙簽接菌法中,病情指數介于29.8%~64.4%之間,在溝帶接菌法中,病情指數介于25%~75%之間,病情指數均呈正態分布,具數量遺傳的特點;單標記分析法對97個在抗感池或親本間呈多態性的位點進行回歸分析,獲得Xgdm67等11個與紋枯病抗性極顯著相關的SSR標記,能解釋群體紋枯病病情指數變異的5.0%~13.0%,其中Xgwm247、Xgdm67、Xwmc94和Xgwm437在牙簽接菌法和溝帶接菌法的抗性資料中都能檢測到;用MapManager QTXb17 建立了14 條連鎖區段,并用區間作圖法檢測到與小麥紋枯病抗病相關的2個QTL位點,其中,Xgdm67~Xbarc172之間的QTL在兩種接種條件下都能檢測到,LOD值分別為4.0和3.63,能夠解釋表型變異14.36%和12.3%;Xwmc94~Xwmc273.2之間的QTL只能在牙簽法中檢測到,其LOD值和貢獻率分別為2.3和14.68%。【結論】初步認為在7D上存在抗小麥紋枯病的主效QTL。
    BTH誘導黃瓜幼苗對霜霉病的抗性與細胞壁HRGP和木質素含量的關系
    程智慧,李玉紅,孟煥文,陳 鵬,杜慧芳
    中國農業科學. 2006, 39(05):  935-940 . 
    摘要 ( 1061 )   PDF (360KB) ( 955 )   收藏
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    【目的】苯并噻二唑(BTH)對黃瓜幼苗霜霉病的誘導抗性與苯丙氨酸解氨酶(PAL)活性、過氧化物酶(POD)活性、木質素和富含羥脯氨酸糖蛋白(HRGP)含量的關系。【方法】用比色法對BTH誘導或接種霜霉菌的植株進行PAL和POD活性以及木質素和HRGP含量的測定。【結果】BTH不僅能提高黃瓜幼苗對霜霉病的抗性,而且明顯提高了PAL和POD的活性以及木質素和HRGP的含量。BTH誘導處理和霜霉菌侵染黃瓜葉片,細胞壁中HRGP的積累與木質素的沉積在時間進程中表現出明顯的同步性。【結論】HRGP的積累和細胞壁的木質化與黃瓜對霜霉病的抗性反應有關,是寄主抗病反應的生化機制之一。
    稻米中三唑磷殘留免疫親合色譜-高效液相色譜分析
    韋林洪,王 蓮,劉曙照
    中國農業科學. 2006, 39(05):  941-946 . 
    摘要 ( 1376 )   PDF (440KB) ( 941 )   收藏
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    【目的】提高三唑磷殘留的監測效率。【方法】采用碳酰二咪唑(CDI)將Sepharose CL-4B活化并與純化的抗三唑磷多克隆抗體共價偶聯,合成免疫親合色譜(IAC)吸附劑并制備對三唑磷具有特異性親合力的IAC柱。對IAC條件進行了優化,選擇0.02 mol·L-1 pH 7.2磷酸鹽緩沖液作吸附與平衡介質,60%(體積分數)甲醇水作洗脫劑。【結果】在試驗條件下,IAC柱對三唑磷的動態柱容量達1.91 ?g·ml-1床體積,當標樣溶液中三唑磷含量為2 ng·ml-1時,經IAC柱富集的效率近250倍。稻米中添加三唑磷0.1 ?g·g-1,提取液以IAC柱分離富集,洗脫液采用高效液相色譜(HPLC)法測定,5次重復測定的平均回收率為102.5%,相對標準偏差4.44%。【結論】成功建立了三唑磷IAC-HPLC分析技術并用于稻米中三唑磷殘留的測定。
    土壤肥料·節水灌溉
    農業水資源安全的定義及其內涵和外延
    劉布春,梅旭榮,李玉中,楊有祿
    中國農業科學. 2006, 39(05):  947-951 . 
    摘要 ( 1303 )   PDF (252KB) ( 1156 )   收藏
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    為了給農業水資源安全下一個比較明確的定義,同時給出這一定義的內涵和外延,本文在綜述水安全、水資源安全、水環境安全3個概念不同的定義,辨析它們之間關系的基礎上,推敲了農業水資源安全概念的組成要素,得出農業水資源安全應該是水資源的供應保障農業不受威脅,沒有危險、危害和損失。這一定義的內涵包括農業水資源安全的自然屬性、社會經濟屬性和人文屬性3個方面。其外延涉及廣義和狹義的農業水資源安全,以及由農業水資源安全引發的糧食安全、農業生態環境安全、農業經濟安全、農村社會安全等。定義這一概念可以為開展農業水資源安全研究、確定農業水資源安全的理論框架、建立農業水資源安全評價體系提供一定的理論參考。
    低溫脅迫下鉬對冬小麥抗氧化酶活性的影響
    孫學成,譚啟鈴,胡承孝,甘巧巧,易長城
    中國農業科學. 2006, 39(05):  952-959 . 
    摘要 ( 1197 )   PDF (431KB) ( 1449 )   收藏
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    【目的】揭示鉬提高冬小麥抗寒力的生理機制。【方法】采用盆栽試驗的方法,以冬小麥鉬高效品種97003和鉬低效品種97014為材料,研究了在低溫脅迫下施鉬對冬小麥葉片抗氧化酶活性影響。【結果】低溫處理2、4和6 d時施鉬均顯著提高了超氧化物歧化酶(SOD)、過氧化氫酶(CAT )、過氧化物酶(POD)和抗壞血酸過氧化物酶(APX)活性,顯著降低了2個冬小麥品種葉片中超氧陰離子產生速率;施鉬后,隨著低溫脅迫時間的延長,2個冬小麥品種葉片中4種抗氧化酶活性均先升高而后呈下降或突降趨勢,說明施鉬能使冬小麥通過正常的低溫鍛煉過程,有利于植株在經受更長時間低溫脅迫時維持較高的抗寒力;鉬對冬小麥鉬高、低效品種葉片中抗氧化酶活性的影響存在基因型差異,與鉬高效品種相比,鉬低效品種缺鉬處理葉片SOD、CAT、POD和APX等抗氧化酶活性下降幅度更大,活性氧自由基積累速率更大,這可能是鉬低效品種在缺鉬條件下更易受到低溫傷害的原因之一。【結論】鉬通過調控活性氧代謝過程來影響冬小麥的抗寒力。
    緩/控釋復合肥料不同形態氮素釋放特性研究
    董燕,王正銀
    中國農業科學. 2006, 39(05):  960-967 . 
    摘要 ( 1437 )   PDF (339KB) ( 995 )   收藏
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    【目的】探討緩/控釋復合肥料不同形態氮素養分(NH4+-N、NO3--N、Urea-N、DON和Total N)在不同介質中釋放的動力學特性及生物效應。【方法】采用水中溶出法、土壤恒溫培養法和盆栽生物試驗。【結果】不同培養介質中,緩/控釋復合肥5種形態氮素養分的累積釋放量隨時間的動態變化可用一級動力學方程Nt=N0(1-e-kt)、Elvoich方程qt=a+blnt、拋物線擴散方程qt=a+bt0.5表征,并以一級動力學方程擬合效果最好(r=0.9569**~0.9999**),E1ovich方程次之(r=0.7705**~0.9933**)。緩釋復合肥料不同形態氮素最大釋放量(N0值)與其氮素累積釋放量的變化規律一致,在水中以Total N>DON>Urea-N>NH4+-N>NO3--N,在土壤中則以Total N>NH4+-N>DON>Urea-N>NO3--N。以水為介質時,緩釋復合肥料不同形態氮素釋放速率常數(k值和b值)的變化序列均以Total N>DON>NH4+-N>NO3--N;以土壤為介質時,k值大小為Urea-N>DON>NH4+-N>Total N>NO3--N,b值則為Total N>NH4+-N>DON>NO3--N>Urea-N。與普通復合肥料相比,緩/控釋復合肥的氮素利用效率(NUE)、氮素農學效率(NAE)及氮素生理效率(NPE)分別提高了11.4%、8.32 kg·kg-1和5.17 kg·kg-1。相關分析發現,5種形態氮素養分占總氮量的比值(Nx/NT)與水稻不同生育期吸收氮素養分之間呈顯著或極顯著正相關。【結論】定量描述氮素養分釋放的動力學方程中以一級動力學方程評價更具有實效性。與普通復合肥料以單一尿素態氮養分為主相比較,緩/控釋復合肥料的不同形態氮養分更有利于水稻對氮素的吸收利用。
    稻-鴨生態種養技術減排甲烷的研究及經濟評價
    向平安,黃璜,黃梅,甘德欣,周燕,付志強
    中國農業科學. 2006, 39(05):  968-975 . 
    摘要 ( 1368 )   PDF (343KB) ( 692 )   收藏
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    【目的】稻-鴨生態種養技術是中國傳統農業的精華,研究其減排CH4的效果,為進一步開發利用這一經典農藝提供理論基礎和實踐依據。【方法】采用田間試驗及經濟學方法研究稻-鴨生態種養技術減排CH4的效果及經濟效益。【結果】稻田CH4排放通量的日變化與氣溫日變化基本一致。稻田CH4排放通量的高峰值出現在晚稻分蘗盛期,免耕養鴨稻田、免耕不養鴨稻田和翻耕不養鴨稻田的CH4排放通量分別為24.1、32.2和40.5 mg·m-2·h-1。在晚稻分蘗始-分蘗盛期,稻-鴨生態種養技術對稻田CH4排放的控制效果明顯,分別比免耕不養鴨稻田、翻耕不養鴨稻田的CH4排放量減少2.333、4.723 g·m-2。晚稻整個生育期間,免耕養鴨稻田CH4排放量比免耕不養鴨稻田、翻耕不養鴨稻田分別減少3.373和5.590 g·m-2。采用免耕稻-鴨生態種養技術農戶的財務凈效益比采用免耕不養鴨技術和翻耕不養鴨技術農戶分別增加2 166、4 207 yuan/ha。減去CH4排放的環境成本,采用稻-鴨生態種養技術的農戶的經濟效益為5 000 yuan/ha,比采用免耕不養鴨技術和翻耕不養鴨技術的農戶分別增加2 206和4 274 yuan/ha。【結論】稻-鴨生態種養技術既能增加農戶的財務收入,又能減少稻田CH4排放量,具有較好的環境效益,是一種很有發展潛力的可持續農業生產模式。
    園藝
    櫻桃自交不親和S9-單元型特異的F-box基因克隆及其表達分析
    成建紅,白松齡,韓振海,許雪峰,李天忠
    中國農業科學. 2006, 39(05):  976-983 . 
    摘要 ( 1316 )   PDF (384KB) ( 749 )   收藏
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    【目的】克隆李屬甜櫻桃自交不親和性花粉S-決定子基因,為今后果樹配子體自交不親和性機理研究奠定理論基礎。【方法】根據GenBank登錄的16個S-locus F-box同源基因保守區設計兼并引物,利用RT-PCR、RACE等手段,從甜櫻桃品種紅燈花粉cDNA中克隆到兩個編碼376-氨基酸多肽的全長基因。【結果】GenBank Blast分析顯示,克隆的兩個基因中一個基因編碼的蛋白產物與數據庫甜櫻桃自交不親和性S3-單元型特異的PaSFB3(AB096857)編碼的氨基酸序列完全一致。另一個基因編碼一新的PaSFB同源序列,其推測的氨基酸序列N-端同SFB3一樣具有明顯的F-box基序,與PaSFB1~6的一致性為76%~82%。研究顯示該基因在花粉組織中特異性表達,并表現出S9-單元型特異的連鎖信號。【結論】新基因為甜櫻桃自交不親和性花粉S-決定子候選基因PaSFB家族中一新成員,命名為PaSFB9 (GenBank登錄號:DQ422809),紅燈自交不親和基因型確定為S3S9。
    沙田柚雜種胚性愈傷組織的誘導及遺傳鑒定
    宋健坤,鄧秀新
    中國農業科學. 2006, 39(05):  984-989 . 
    摘要 ( 1032 )   PDF (345KB) ( 908 )   收藏
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    【目的】沙田柚(Citrus grandis [L.] Osbeck cv.Shatian)是中國的特有品種,其愈傷組織難以誘導。為進一步進行細胞工程研究,本研究通過與其它品種雜交的方法獲得雜種胚性愈傷組織。【方法】以沙田柚為母本,用體細胞雜種橘柚+無酸甜橙 ([C.reticulata Blanco× C.paradisi Macf.] cv.Nova+C.sinensis [L.] Osbeck cv.Succari)為父本進行雜交,90 d后將幼胚取出,在MT + ME(麥芽提取物,500 mg·L-1)和MT + GA3(1 mg·L-1)兩種固體培養基上培養。【結果】幼胚培養約5個月左右,在兩種培養基上從胚狀體和幼小植株的下胚軸處都長出了可繼代保存的胚性愈傷組織,經細胞流式儀和SSR鑒定,該胚性愈傷是三倍體雜種愈傷,繼代保存兩年后,在MT+乳糖(50 g·L-1)培養基上仍可以產生大量的胚狀體,具有較強的胚狀體發生能力。【結論】沙田柚與體細胞雜種雜交后,可以較容易地獲得其雜種的胚性愈傷,對沙田柚種質資源的保存和利用具有重要價值。
    PCR檢測乳品中金黃色葡萄球菌
    楊洋,張偉,袁耀武,鐘曉英,馬雯
    中國農業科學. 2006, 39(05):  990-996 . 
    摘要 ( 1099 )   PDF (774KB) ( 1603 )   收藏
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    【目的】利用PCR技術,無需增菌,直接檢測乳品中的金黃色葡萄球菌。【方法】通過溶劑提取的方法從人工樣品中提取模板,以金黃色葡萄球菌耐熱核酸酶基因(nuc)為靶基因,經過PCR擴增得到279 bp的產物。經過DNA測序證實該產物為目的擴增產物。采用PCR方法實際檢測了乳品中的金黃色葡萄球菌,同時,與國標GB 4789.10-94方法及兩種快速檢測致病性金黃色葡萄球菌測試片Petrifilm RSA.Count Plate 及Baird-parker+RPF Agar進行了比較。【結果】PCR方法的靈敏度高,全脂乳和脫脂乳檢測的檢出限為10 CFU/ml,奶酪檢測的檢出限為55 CFU/g,可在6 h內完成對乳品中金黃色葡萄球菌的檢測,比目前普遍采用的先增菌再進行PCR檢測的方法縮短了12~24 h。與國標方法相比,PCR方法的符合率為94.3%,敏感性為100%。【結論】采用溶劑提取制備模板的方法可有效的用于PCR直接檢測(無需增菌)乳及乳制品中的金黃色葡萄球菌。
    不同采收期川丹皮多組分化學成分變化規律研究
    白志川
    中國農業科學. 2006, 39(05):  997-1003 . 
    摘要 ( 1363 )   PDF (470KB) ( 775 )   收藏
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    【目的】明確不同采收期川丹皮藥材多組分化學成分的變化規律,確定川丹皮最佳生長期與采收期,并為丹皮藥材建立一種更符合中醫理論的質量控制方法。【方法】運用HPLC法在273 nm測量各樣品中丹皮酚含量;在242 nm建立各樣品的色譜指紋圖譜,并以丹皮酚成分峰為參照計算其它成分的相對含量,圖表分析展現牡丹皮多組分化學成分的動態變化規律。【結果】(1)墊江牡丹皮藥材中丹皮酚的平均含量為1.25%,10月份川丹皮樣品丹皮酚平均含量最高;(2)川丹皮中多組分化學成分在第5年11月份達到最高,其變化規律與丹皮酚不呈正相關。【結論】中藥材多組分化學成分色譜指紋圖譜技術是一種全面評價中藥材質量的現代儀器分析方法,可以更廣泛地應用于生產、流通領域中藥材的質量控制。
    畜牧·獸醫·資源昆蟲
    光照和褪黑激素對內蒙古絨山羊氮分配和產絨性能的影響
    王林楓,盧德勛,孫海洲,趙秀英,珊 丹
    中國農業科學. 2006, 39(05):  1004-1010 . 
    摘要 ( 1498 )   PDF (312KB) ( 879 )   收藏
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    【目的】研究日糧氮營養在絨山羊體內的分配機理,調控氮營養在絨山羊體內的分配,提高舍飼絨山羊的經濟效益,減少放牧,保護草原生態。【方法】用縮短光照和埋植褪黑激素的方法調控氮營養向絨毛方向分配。【結果】光照時間和埋植褪黑激素對絨山羊體內相關激素有顯著影響,通過相關激素的變化調節絨山羊體內體氮和毛絨氮的分配比例。短光照和埋植褪黑激素使血液中褪黑激素含量升高,毛絨氮分配比例增加而體氮分配比例減少,促進絨毛生長,試驗期內絨山羊的產絨量平均增加338.83±72 g,提高73.8%。絨毛各項品質指標均達到紡織工業標準的要求。【結論】絨山羊的絨毛生長可以通過改變光照和埋植褪黑激素進行調控,在非生絨季節誘導產絨,在生產實踐中有巨大的推廣價值。
    豬繁殖與呼吸綜合征病毒GP5和M蛋白共表達的自殺性DNA疫苗的構建及其免疫應答
    江云波,方六榮,肖少波,張輝,陳煥春
    中國農業科學. 2006, 39(05):  1011-1017 . 
    摘要 ( 1371 )   PDF (376KB) ( 1095 )   收藏
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    【目的】探討豬繁殖與呼吸綜合征病毒(PRRSV)自殺性DNA疫苗的免疫效果。【方法】將ORF5和ORF6基因分別插入可以同時表達兩個外源基因的表達載體pSCA2的26S啟動子下游,獲得ORF5和ORF6雙基因共表達自殺性DNA疫苗pSFV-56。【結果】Western blot檢測證實ORF5和ORF6基因獲得正確表達,并且所表達的GP5和M蛋白可以形成異源二聚體。將pSFV-56免疫Balb/c小鼠,首免后4周可檢測到特異性PRRSV中和抗體,首免后8周的中和抗體最高可達1﹕32,同時還可檢測到較高的特異性細胞免疫應答。進一步將pSFV-56免疫斷奶仔豬,二免后4周即可產生1:8~1:16的中和抗體,直到二免后6周仍維持這種高水平的中和抗體,而且也可檢測到較高的特異性細胞免疫應答。【結論】上述研究結果表明pSFV-56具有良好的免疫原性和誘發免疫動物產生較高免疫應答的能力。
    苦參對雞大腸桿菌的抑菌作用及其機理研究
    王關林,唐金花,蔣丹,方宏筠,劉照斌
    中國農業科學. 2006, 39(05):  1018-1024 . 
    摘要 ( 1292 )   PDF (540KB) ( 1190 )   收藏
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    【目的】闡明苦參的抑菌作用及機理,為生產實踐提供理論依據。【方法】采用牛津杯法及液體倍比稀釋法對雞大腸桿菌等常見致病細菌進行了敏感性試驗;通過電鏡觀察,SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳對蛋白表達的研究,生長曲線的繪制以及流式細胞儀對菌體細胞周期的分析,對苦參堿粗提物的抑菌作用及機理進行研究。【結果】苦參對革蘭氏陽性菌、革蘭氏陰性菌均有明顯抑制作用,抑菌譜廣;藥物是通過抑制雞大腸桿菌功能蛋白的表達,從而影響菌體的細胞周期,使I期菌數增加,R期菌數下降,最終菌體不能達到正常對數生長期而直接進入衰亡期;菌體形態結構發生明顯變化,表現為菌體縊縮變形,中間凹陷呈規則元寶狀,細胞質固縮,質壁分離,最終細胞壁破損,內容物泄漏而使菌體死亡。【結論】苦參堿對雞大腸桿菌抑菌機理是抑制調控細菌生長、分裂相關蛋白的合成,阻滯其分裂和生長,并且與細胞內的蛋白質結合,細胞質固縮、解體而死亡。
    肺動脈高壓和脂質過氧化作用對肉雞肺血管重構的影響
    潘家強,李錦春,譚 勛,孫衛東,王小龍
    中國農業科學. 2006, 39(05):  1025-1030 . 
    摘要 ( 1446 )   PDF (632KB) ( 746 )   收藏
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    【目的】對比觀察常溫和低溫飼養條件下肉雞肺動脈壓、血液脂質過氧化水平和肺阻力血管顯微結構的變化,以探討肺血管重構的機理及其在肉雞肺動脈高壓綜合征(PHS)形成中的病理意義。【方法】商品代艾維茵肉雞180羽,14日齡時隨機分為兩組, 一組為常溫對照組,按常規飼養;一組為低溫誘病組。試驗過程中連續測定肉雞平均肺動脈壓(mPAP)、右心/全心比(RV/TV);測定血漿超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-Px)活性和丙二醛(MDA)水平;采集肺組織進行彈力纖維染色,應用計算機圖像分析系統測定肺小動脈平均中膜厚度(mMTPA)和相對中膜面積(WA/TA)。【結果】低溫組mPAP, RV/TV值和血漿MDA濃度比常溫組顯著升高;低溫組肉雞肺小動脈mMTPA和WA/TA顯著高于常溫組;回歸分析表明,血漿MDA值與mMTPA,WA/TA顯著正相關, mPAP與mMTPA,WA/TA亦呈顯著正相關。【結論】低溫條件下肉雞體內脂質過氧化作用增強、肺動脈壓升高,導致肺血管重構并進一步升高肺動脈壓,這一改變是低溫誘導肉雞PHS形成的重要病理基礎之一。
    家蠶eIF2α全長cDNA克隆及生物信息學分析
    高貴田,陳克平,姚 勤,徐家萍,王林玲,陳慧卿
    中國農業科學. 2006, 39(05):  1031-1037 . 
    摘要 ( 1799 )   PDF (629KB) ( 886 )   收藏
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    【目的】克隆家蠶eIF2α全長cDNA,分析家蠶抗BmDNV-Z品系、感性品系eIF2α的點突變。【方法】利用熒光差異顯示技術,在易感濃核病毒中國鎮江株(BmDNV-Z)的家蠶品系華八中獲得感性特異條帶G13-1b650,通過電子延伸,設計特異引物驗證。【結果】克隆了家蠶eIF2α(BmeIF2α)全長cDNA。其全長為1 100 bp(GenBank登錄號:DQ073458),ORF框為999 bp,編碼332個氨基酸。BmeIF2α蛋白與草地貪夜蛾eIF2α蛋白同源性高達94.3%。具有保守的磷酸化位點S(51)R(52)R(52)R(54)R(56)K(60)R(63)。BmeIF2α有推定的3個蛋白激酶C磷酸化、5個酪氨酸激酶磷酸化、9個酪蛋白激酶Ⅱ磷酸化、3個依賴cAMP與cGMP蛋白激酶磷酸化位點,2個酪氨酸硫酸鹽化位點,1個糖基化位點。【結論】家蠶易感品系的eIF2α在113~127位的"H V A E L L H Y E T S E Q S E"為酪氨酸硫酸鹽化位點,而完全抗性品系eIF2α發生C378→T突變,導致Ser126→Leu,缺少了113~127位的酪氨酸硫酸鹽化位點。
    研究簡報
    RFLP揭示的秈粳基因組多態性
    王松文,劉 霞,王 勇,徐才國,施利利,張 欣,丁得亮
    中國農業科學. 2006, 39(05):  1038-1043 . 
    摘要 ( 1253 )   PDF (262KB) ( 698 )   收藏
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    采用28個RFLP秈粳特異性探針和6個SSR秈粳特異性標記對水稻不同品種進行了秈粳基因組多態性分析,結果表明,這些標記分布在水稻12條染色體上,能對水稻品種進行秈粳稻分子分類。由于水稻基因組序列圖的完成和釋放,使得這些秈粳特異性標記揭示的基因組多態性可以在基因組序列水平上進行分析和驗證。本研究以RZ906探針和RM405為例分析了秈粳特異性其及序列分子生物學基礎。
    富鐵營養保健型超早熟谷子新種質的創新
    劉正理,孫世賢,程汝宏,黃文勝,劉君馨,曲祝豐,夏雪巖,師志剛
    中國農業科學. 2006, 39(05):  1044-1048 . 
    摘要 ( 1076 )   PDF (256KB) ( 764 )   收藏
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    【目的】解決中國廣大高寒地區種植作物單一、效益低下的難題。【方法】采用目標性狀基因庫育種法創新超早熟谷子新種質-超早熟2號。【結果】超早熟2號具有以下幾個方面的突出特點:(1)生育期間需有效積溫1650℃,在海拔1400 m左右的河北省壩上正常成熟;(2)超早熟2號小米含鐵量為54.10 mg·kg-1,比中國小米平均含量高出62.0%;(3)粗脂肪含量為6.24%,比中國小米平均含量高出54.1%;(4)中國小米粗蛋白平均含量為12.71%,超過14%的品種僅5%,超早熟2號粗蛋白含量為14.36%,其粗蛋白含量是中國谷子推廣品種中少見的;(5)綜合性狀優良。【結論】超早熟2號的育成并在高寒地區推廣對促進中國超早熟谷子育種的開展和高寒地區種植業結構調整具有重要意義,實踐表明目標性狀基因庫育種法在超早熟等特異種質創新方面效果明顯。
    利用RAPD分子標記技術研究蕓芥(Eruca Mill.)的遺傳多樣性
    孫萬倉,范惠玲,孟亞雄,張濤,張金文,王保成,武軍艷,邵登魁,朱惠霞,燕尼,趙玉昌
    中國農業科學. 2006, 39(05):  1049-1057 . 
    摘要 ( 1357 )   PDF (755KB) ( 789 )   收藏
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    【目的】研究不同來源的蕓芥材料的遺傳多樣性和它們之間的親緣關系,以便對其進行有效、科學的利用。【方法】利用RAPD分子標記技術對來源于歐洲、非洲和亞洲的30份代表性的蕓芥(Eruca Mill.)材料進行遺傳多樣性分析,根據遺傳相似系數計算不同材料RAPD數據的遺傳距離矩陣,按UPGMA方法對研究材料進行聚類。【結果】不同蕓芥亞種間表現出比較大的多態性,47個引物共擴增出486條DNA帶,其中432條表現出多態性,占總帶數的89.0%,來源不同的材料有各自的特征帶。30個材料的遺傳距離在0.1036~0.4511之間。【結論】聚類分析表明,在遺傳距離為0.1452處,30個材料可分為7個類群,其中來源于中國的材料為一獨立的類群,來源于西班牙及其他國家地區的材料分屬另外6個不同的類群。蕓芥起源中心的西班牙及其毗鄰地區的蕓芥的遺傳多樣性最為豐富,而中國可能是蕓芥的次生演化中心。
    苧麻CCoAOMT基因全長cDNA克隆與序列分析
    陳建榮,郭清泉,張學文
    中國農業科學. 2006, 39(05):  1058-1063 . 
    摘要 ( 1662 )   PDF (575KB) ( 1024 )   收藏
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    【目的】試圖分離和克隆苧麻內源咖啡酰輔酶A甲基轉移酶基因。【方法】采用RACE技術克隆基因,對序列應用ClustaW 1.82軟件進行在線分析,將苧麻mRNA序列、mRNA編碼區序列以及氨基酸序列與已報道的其它植物的相應序列進行多重序列排列比較并構建系統樹。【結果】獲得了苧麻CCoAOMT cDNA全長序列(GenBank注冊號:AY651026);苧麻咖啡酰輔酶A甲基轉移酶是氧甲基轉移酶類;苧麻CCoAOMT基因mRNA序列與已報道的其他植物的相應序列不能聚為一類,其差異明顯大于其它植物間的差異。苧麻CCoAOMT基因mRNA編碼區序列與玉米(Zea mays:ZMA242980、ZMA242981)的同源性高于其他植物。推導的苧麻CCoAOMT酶蛋白氨基酸序列與楊樹(Populus balsamifera:AJ224894、AJ224896)、美洲山楊(Populus tremuloides:PTU27116)的同源性高于其他植物。【結論】苧麻CCoAOMT基因cDNA與其它植物的相應序列具有同源性。
    不同來源培矮64S育性轉換光溫反應特性的分析
    于永紅,斯華敏,胡國成,傅亞萍,孫宗修
    中國農業科學. 2006, 39(05):  1064-1068 . 
    摘要 ( 1119 )   PDF (291KB) ( 935 )   收藏
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    【目的】研究不同來源的5份培矮64S的育性轉換光溫反應特性。【方法】利用人工氣候箱對5份培矮64S的自交結實率和花粉可育度進行研究,并分析育性轉換發生變化的原因。【結果】在長日高溫條件(14.5h/28℃)下,5份材料幾乎完全不育,但在14.5h/24℃,除2份材料仍然保持較好的不育性外,其它材料都有一定的結實,其中4號材料的結實率達到9.05%,花粉可育度達到27.83%,與其它4份材料的差異達到極顯著水平。另外,對歷年培矮64S在氣候箱內鑒定的自交結實率的結果進行分析比較,發現不同年度間繁育的培矮64S光溫反應特性也存在差異。【結論】培矮64S表現出明顯的地區間和年度間的差異。4號材料的不育起點溫度發生變化,不符合不育系的光溫反應鑒定標準。
    地膜和秸稈覆蓋土壤肥力效應分析與比較
    卜玉山,苗果園,周乃健,邵海林,王建程
    中國農業科學. 2006, 39(05):  1069-1075 . 
    摘要 ( 1386 )   PDF (409KB) ( 942 )   收藏
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    【目的】通過研究地膜(PM)和秸稈(SM)覆蓋土壤肥力效應的特點,為二者的選擇利用提供依據。【方法】利用盆栽和大田試驗研究了地膜和秸稈覆蓋對玉米農田土壤水分、溫度、養分和微生物影響的差異。【結果】地膜和秸稈覆蓋都有明顯保水作用,但前者主要表現為增加了表層土壤水分含量,深層土壤含水量反而明顯降低,而后者各層土壤水分都有明顯提高;地膜覆蓋兼有顯著的增溫效應,而秸稈覆蓋土壤溫度卻明顯低于對照,但在冬季低溫短日照條件下,地膜覆蓋土壤溫度反而低于秸稈覆蓋;秸稈覆蓋不同程度地增加了土壤有機質和速效氮、磷、鉀等養分含量,而地膜覆蓋無此作用,甚至降低了表層土壤有機質含量;秸稈和地膜覆蓋都不同程度地增加了土壤三大種群微生物數量,但秸稈覆蓋增加幅度大于地膜覆蓋。【結論】覆蓋的主要目的是增溫時,應選擇地膜,主要目的是保水時,秸稈的效果更好,同時秸稈覆蓋還具有增加土壤養分和生物活性的作用。
    利用微衛星DNA多態性預測引進肉用綿羊品種雜種優勢
    張英杰,劉月琴,孫洪新,孫少華,李 玉
    中國農業科學. 2006, 39(05):  1076-1082 . 
    摘要 ( 1279 )   PDF (262KB) ( 844 )   收藏
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    【目的】利用微衛星DNA在不同綿羊群體中的多態性預測引進肉用綿羊品種與小尾寒羊的雜種優勢。【方法】利用5個微衛星基因座對4個國外引進肉羊品種及小尾寒羊5個群體的等位基因頻率、群體多態信息含量、有效等位基因數、雜合度和遺傳距離進行了遺傳檢測,并測定4個引進肉羊與小尾寒的雜交效果。【結果】5個微衛星基因座在白頭薩福克、黑頭薩福克、道賽特、得克賽兒及小尾寒羊5個群體中存在多態性,可以用于綿羊遺傳多樣性的評估;從不同品種看,道賽特羊的遺傳變異程度最大,而小尾寒羊的遺傳變異程度相對較小;經遺傳關系分析,在引進的4個肉羊品種中,與小尾寒羊雜交優勢由大到小依次為白頭薩福克、黑頭薩福克、道賽特、得克賽兒,與實際雜種優勢測定結果相符。【結論】利用微衛星DNA多態性預測引進肉用綿羊品種與小尾寒羊的雜種優勢是可行的,將對今后綿羊育種具有重要的應用價值。
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