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當期目錄

    2006年 第39卷 第01期 刊出日期:2006-01-10
      
    作物遺傳育種·種質資源
    兩個強優勢多倍體秈粳亞種雜交稻生長習性研究
    宋兆建,杜超群,戴兵成,陳冬玲,陳建國,蔡得田
    中國農業科學. 2006, 39(01):  1-9 . 
    摘要 ( 1416 )   PDF (305KB) ( 1163 )   收藏
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    【目的】利用遠緣雜交和多倍體雙重優勢選育超級稻是水稻育種的新戰略。在獲得一批多倍體秈粳亞種雜交稻株系的基礎上,為了更大規模地展示這種雜種優勢和更全面地研究多倍體秈粳亞種雜交稻的特點。【方法】以PSR073和PSR120為材料,對其葉齡、分蘗、開花習性及外部形態等進行觀察統計,研究其生長習性。【結果】PSR073、PSR120在株高、穗長、粒長、粒寬、千粒重等農藝性狀上均表現出明顯的多倍體優勢,并且具有高達83%以上的結實率;葉齡、分蘗及開花習性等方面表現出與二倍體水稻相似的特點。【結論】這兩個多倍體水稻雜種的特點與以前報道的多倍體水稻的情況明顯不同,遠緣雜交和多倍體化并沒有對其生長習性產生不利影響,相反具有強大的雜種優勢,這為其應用于生產提供了理論和實踐依據。
    A-3中抗條銹新基因YrTp1和YrTp2的分子標記定位分析
    殷學貴,尚勛武,龐斌雙,宋建榮,曹世勤,李金昌,張學勇
    中國農業科學. 2006, 39(01):  10-17 . 
    摘要 ( 1166 )   PDF (835KB) ( 963 )   收藏
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    【目的】半個多世紀的中國小麥育種史基本是育種家與條銹病的賽跑史。因此,篩選、鑒定、儲備和利用新抗源是我國育種和資源研究中的一個長遠戰略性課題。【方法】利用小麥條銹菌條中31、32號生理小種,對來自小麥與十倍體長穗偃麥草[Thinopyrum ponticum (Host) Liu & Wang]的雜交后代材料A-3進行抗性遺傳分析。用熒光SSR分子標記技術,鑒定所攜帶抗條銹病基因是否為新基因,并對其進行染色體定位研究。【結果】遺傳分析表明,A-3對條中31號和32號的抗性由一顯一隱2對基因控制。經過對196對微衛星引物的篩選,發現2B染色體短臂上的WMC477-167bp與顯性基因緊密連鎖,遺傳距離為0.4 cM,將該顯性基因定位于2BS上;7B染色體短臂上的WMC364-208bp與隱性基因連鎖,遺傳距離為5.8 cM。圖位比較、系譜分析和抗譜分析表明,A-3所含抗條銹基因不同于已知抗條銹基因,暫定名為YrTp1和YrTp2。【結論】可利用A-3中與條銹病抗性緊密連鎖的分子標記YrTp1和YrTp2將抗性基因轉移到主栽品種中,在小麥育種和生產上發揮作用。
    四種玉米幼胚培養性狀的基因效應分析
    宋蕓,夏燕莉,魏 昕,張志明,趙茂俊,榮廷昭,潘光堂
    中國農業科學. 2006, 39(01):  18-22 . 
    摘要 ( 1116 )   PDF (191KB) ( 840 )   收藏
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    【目的】了解玉米幼胚培養主要性狀的遺傳變異規律。【方法】選用玉米高幼胚培養能力自交系R18-599(紅)與低培養能力自交系R15獲得6個世代,幼胚培養測定胚性愈傷組織誘導率、非胚性愈傷組織誘導率、愈傷組織克隆力和愈傷組織綠苗再分化數4個性狀,采用6世代平均值分析法和主基因+多基因混合遺傳模型世代聯合分析法分別進行遺傳分析。【結果】胚性愈傷組織誘導率受2對加性-顯性-上位性主基因+加性-顯性-上位性多基因控制;非胚性愈傷組織出愈率受兩對加性-顯性-上位性主基因控制;再分化數受1對主基因+加性-顯性多基因控制;克隆力受2對主基因+多基因控制,但2種方法對克隆力的上位性效應鑒定結果不同。【結論】比較2種方法的分析結果,世代聯合分析法不僅提高了試驗結果的精確度,同時還提供了更多的遺傳信息。
    甘藍型油菜華油雜6號及其親本的基因差異表達研究
    沈俊儒,吳建勇,張劍,劉平武,楊光圣
    中國農業科學. 2006, 39(01):  23-28 . 
    摘要 ( 1167 )   PDF (310KB) ( 1166 )   收藏
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    【目的】探討甘藍型油菜在基因表達水平上的雜種優勢機理,以期為最終揭示雜種優勢的遺傳基礎積累試驗數據。【方法】應用擬南芥cDNA芯片,以華油雜6號及其親本為材料,分析雜種和親本在花蕾中的基因差異表達。【結果】雜種和母本8086A之間,有83個上調的轉錄本和331個下調的轉錄本;雜種和父本7-5之間,有94個上調表達的轉錄本和423個下調表達的轉錄本。在上調表達的轉錄本中,存在較多與光合作用相關的基因,討論了這些基因和甘藍型油菜華油雜6號雜種優勢之間的關系。磷酸核酮糖(PRK)的Northern印跡結果與芯片顯示結果基本一致。【結論】基礎代謝基因對甘藍型油菜雜種優勢的形成影響較大。擬南芥cDNA芯片可以廣泛應用于甘藍型油菜及其近源物種的基因表達分析。
    超高產大豆育種研究的進展與討論
    趙團結,蓋鈞鎰,李海旺,邢 邯,邱家馴
    中國農業科學. 2006, 39(01):  29-37 . 
    摘要 ( 912 )   PDF (270KB) ( 1193 )   收藏
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    根據現時大豆品種產量潛力水平提出中國大豆超高產育種目標,并從大豆產量性狀遺傳改良、理想株型育種及雜種優勢生產利用探索等方面綜述了與超高產大豆選育相關的研究進展,同時對今后的大豆超高產育種研究進行討論。
    耕作栽培·生理生態
    根系化學訊號與稻米品質的關系
    楊建昌,常二華,張文杰,王志琴,劉立軍
    中國農業科學. 2006, 39(01):  38-47 . 
    摘要 ( 1259 )   PDF (378KB) ( 989 )   收藏
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    【目的】試圖闡明水稻根系化學訊號與米質形成的關系。【方法】試驗采用不同基因型的水稻材料,測定結實期根系玉米素(Z)+玉米素核苷(ZR)、脫落酸(ABA)、1-氨基環丙烷1-羧酸(ACC)和根系分泌的有機酸以及稻米外觀品質和蒸煮食味品質,并進行相關分析。【結果】表明灌漿中、后期根系Z+ZR濃度與膠稠度及堿化值呈顯著或極顯著正相關(r=0.72*~0.90**),與直鏈淀粉含量呈顯著或極顯著負相關(r=-0.68*~-0.78**);灌漿中期根系ABA濃度與膠稠度及堿化值呈極顯著負相關(r=-0.90** ~-0.91**),與直鏈淀粉含量呈極顯著正相關(r=0.87**);灌漿中期根系ACC濃度與堊白粒率和堊白度呈極顯著正相關(r = 0.97**~0.98**),灌漿后期根系ACC濃度與米粒的堊白度和堊大小呈極顯著正相關(r = 0.69*~0.96**)。結實期根系分泌的蘋果酸和琥珀酸越多的品種,其稻米淀粉譜的崩解值越大,消解值越小;而根系分泌的酒石酸和檸檬酸越多的品種,結果則相反。根系分泌乳酸較多的品種,稻米的膠稠度和堿化值較小,直鏈淀粉含量較高。結實期外源ZR、ABA和ACC處理根系后對稻米品質的影響,與內源激素(Z+ZR, ABA, ACC)同稻米品質指標的關系基本吻合。施用菜籽餅作有機肥,可以提高根系蘋果酸和琥珀酸濃度并增大崩解值和降低消解值。【結論】根系化學訊號對稻米品質的形成起重要作用,通過調控根系化學訊號,可以改善稻米品質。
    夏玉米農田表面溫度影響因素分析
    史長麗,郭家選,梅旭榮,趙全勝,盧志光
    中國農業科學. 2006, 39(01):  48-56 . 
    摘要 ( 848 )   PDF (580KB) ( 929 )   收藏
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    【目的】農田表面溫度變化規律及其特征的研究,對于采用該指標進行農田墑情監測具有重要的實踐指導意義。【方法】以華北平原夏玉米農田尺度為研究對象,采用渦度相關技術和熱紅外遙感技術,研究了夏玉米全生育期內不同環境條件下農田能量平衡各分量及氣溫環境因素與農田表面溫度的關系。【結果】在不存在土壤水分脅迫情況下,夏玉米不同生育階段日變化過程中,氣溫與農田表面溫度的相關程度不同,葉面積指數(LAI)較低時二者高度相關,隨著生長發育LAI的增加,二者相關程度降低且分散程度增大;凈輻射和潛熱通量的大小是確定農田表面溫度高低的主要能量因子,二者相關程度隨著生育期LAI的增減呈拋物線變化趨勢, 晴天日農田郁閉時,農田表面溫度與能量平衡各分量之間的相關程度達到最高。季節變化過程中,日平均表面溫度和瞬時表面溫度與日平均氣溫和瞬時氣溫間呈高度相關。夏玉米生長大喇叭口期至乳熟期,0~100 cm土層土壤相對含水量超過65%以上時,晴天或云天日表面溫度與氣溫差值相差不大,基本穩定,平均為-5.3℃。【結論】農田表面溫度的高低是由作物生長勢和外界的輻射、土壤水分狀況等因素共同作用確定。
    不同種植方式土地利用效率的定量評價
    劉玉華,張立峰
    中國農業科學. 2006, 39(01):  57-60 . 
    摘要 ( 1246 )   PDF (231KB) ( 1081 )   收藏
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    【目的】針對目前土地當量比在間作應用中存在的問題,分析土地當量比概念的實質是評價不同種植方式的土地利用效率。【方法】采用理論分析與田間試驗結果相結合的方法。【結果】在研究土地當量比內涵的基礎上,結合實例進一步就應用土地當量比評價復種套作、間混作及輪作等不同種植方式的土地利用效率進行了深入探討,明確了土地當量比是評價不同種植方式土地利用效率的客觀指標。【結論】復種套作、間混作及輪作的土地當量比分別為1.68、1.38和1.21,三種不同的種植方式土地利用效率較單作分別提高68%、38%和21%。
    植物保護
    一氧化氮和過氧化氫誘導水稻細胞過敏反應的協同作用分析
    齊放軍,高世強,吳茂森,何晨陽
    中國農業科學. 2006, 39(01):  61-65 . 
    摘要 ( 1267 )   PDF (330KB) ( 1313 )   收藏
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    【目的】本文研究了信號分子一氧化氮(NO)和過氧化氫(H2O2)對水稻細胞過敏反應(HR)的誘導作用。【方法】用溴酚蘭染色法定量檢測這兩種信號分子單獨或協同誘導作用下水稻細胞的HR。【結果】該兩種信號分子可以獨立或協同誘導水稻細胞HR的產生,H2O2對NO誘導的HR具有調節作用,但NO與H2O2濃度平衡與否對HR誘導并無影響。【結論】H2O2和NO均是誘導水稻細胞HR的信號分子,誘導過程中并不存在"NO/H2O2 濃度平衡作用機制"。
    特異性MEK抑制劑U0126對玉米大斑病菌孢子萌發、附著胞產生和致病性的影響
    范永山,谷守芹,董金皋,董秉芳
    中國農業科學. 2006, 39(01):  66-73 . 
    摘要 ( 996 )   PDF (460KB) ( 993 )   收藏
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    【目的】研究MAPK信號轉導途徑對玉米大斑病菌生長、發育和致病性的調控作用,為明確玉米大斑病菌和玉米之間互作的分子機制奠定基礎,對玉米大斑病的有效防治也有重要的理論意義。【方法】利用MEK特異性抑制劑U0126處理玉米大斑病菌,觀測該抑制劑對玉米大斑病菌孢子萌發、附著胞發育和致病性的影響。【結果】U0126對玉米大斑的菌落形態和生長速度沒有顯著影響,可以形成正常的菌絲、分生孢子,但分生孢子萌發時間晚,芽管短,分生孢子萌發百分率和附著胞產生數目下降,玉米葉片的發病時間延遲2~3 d,發病率下降30%左右。在一定濃度范圍內,U0126對分生孢子萌發和附著胞產生的抑制程度隨著濃度增加而上升,但隨著處理時間的延長而下降。【結論】玉米大斑病菌的分生孢子萌發、附著胞產生和對感病玉米葉片的致病能力受U0126抑制的MAPK信號轉導途徑調節。
    小麥藍矮病植原體延伸因子(EF-Tu) tuf基因序列的同源性分析
    安鳳秋,吳云鋒,孫秀芹,顧沛雯,楊 英
    中國農業科學. 2006, 39(01):  74-80 . 
    摘要 ( 1036 )   PDF (453KB) ( 850 )   收藏
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    【目的】利用分子生物學方法分析小麥藍矮病植原體延伸因子tuf基因,從亞組水平上確定小麥藍矮病植原體的分類地位。【方法】電鏡觀察自然發病的小麥藍矮病病葉;用引物fTufu/rTufu對小麥藍矮病植原體延伸因子tuf基因進行PCR擴增;核苷酸序列測定及分析。【結果】經電鏡超微結構觀察,在韌皮部觀察到大量典型植原體。通過PCR擴增得到約850 bp的特異片段。感受態轉化后,進行測序,結果表明小麥藍矮病植原體tuf基因片段長842 bp,編碼280個氨基酸。分析比較15種植原體延伸因子tuf基因的同源性,結果表明小麥藍矮病植原體與三葉草綠變(KVF)親緣關系最近,核苷酸同源性為99.9%,氨基酸同源性為100%。【結論】從亞組水平上確定了小麥藍矮病植原體的分類地位,為研究小麥藍矮病植原體的來源及致病分子機理提供理論依據。
    二苯基噻吩活性氧量子產率、殺蟲活性及穩定性研究
    陳小軍,徐漢虹,王玉健,胡珊,張志祥,張耀謀
    中國農業科學. 2006, 39(01):  81-87 . 
    摘要 ( 797 )   PDF (416KB) ( 868 )   收藏
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    【方法】以α-三聯噻吩(α-T)為對照,首次研究了二苯基噻吩活性氧量子產率、殺蟲活性及穩定性。【結果】二苯基噻吩紫外光照射280 min后吸光度變化最大值為 A=0.438,α-T在200 min后吸光度變化值最大 A=0.480;二苯基噻吩和α-T對白紋伊蚊3齡幼蟲24h的LC50值分別為9.18×10-3 ?g·ml-1和9.69×10-4 ?g·ml-1,對小菜蛾3齡幼蟲LC50值分別為267.87 ?g·ml-1和 222.22 ?g·ml-1;二苯基噻吩和α-T在甲醇中半衰期為113.62 h和10.65 h。二苯基噻吩量子產率與α-T相當,對白紋伊蚊和小菜蛾具有較好的光活化毒殺作用,但穩定性好。【結論】二苯基噻吩克服了光活化殺蟲劑穩定性差而難以在田間推廣使用等不足,在殺蟲的同時又能催化降解殘留農藥三唑磷,二苯基噻吩有廣泛的開發和應用前景。
    氯化汞對草地貪夜蛾Sf9細胞及核型多角體病毒的遺傳毒理研究
    林健榮,鄧平建,李喜梅,房師松,霍永康
    中國農業科學. 2006, 39(01):  88-94 . 
    摘要 ( 729 )   PDF (391KB) ( 744 )   收藏
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    【目的】試驗以草地貪夜蛾細胞sf9作為受體,檢測氯化汞對其生長發育的影響。【方法】采用臺盼蘭染料排斥法測定細胞活力,蘇木素-伊紅染色法檢測細胞中的微核,對經氯化汞處理誘變的病毒AcMNPV 的DNA進行PCR擴增,產物經測序后進行分子突變分析。【結果】sf9細胞在4 ?g·ml-1的氯化汞濃度作用下,其細胞表面變得粗糙,分裂生長減慢,當劑量增大到7 ?g·ml-1時,便可觀察到一些細胞的細胞膜破裂,在9 ?g·ml-1時,某些細胞的完整性受到破壞。用蘇木素-伊紅染色法檢測細胞中的微核現象時,9 ?g·ml-1氯化汞處理區的微核率高達6.8%,有些細胞出現三核甚至多核的核裂現象,反映部分細胞的完整性受到一定程度的損傷。AcMNPV病毒經氯化汞短時間處理后接種于sf9細胞,多角體在sf9細胞中的形成數目較對照區少,異常多角體的比例增加,抽提經氯化汞處理的AcMNPV 的DNA,采取PCR技術進行擴增反應,對獲得的擴增產物進行測序分析,發現DNA序列上的堿基有2處G→C、T→C的轉換和堿基缺失的現象。【結論】一定劑量的氯化汞將會引起草地貪夜蛾sf9細胞及核型多角體病毒的損傷與致突變。
    土壤肥料·節水灌溉
    含鎂復合肥對黃花菜生長及土壤養分含量的影響
    孫楠,曾希柏,高菊生,王伯仁
    中國農業科學. 2006, 39(01):  95-101 . 
    摘要 ( 796 )   PDF (288KB) ( 952 )   收藏
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    【目的】探討紅壤旱地、特別是低肥力紅壤旱地中鎂對作物生長及產量的影響,為鎂肥的合理施用和含鎂復合肥的研制奠定進一步的基礎。【方法】利用田間試驗方法,研究了兩種不同鎂含量的復合肥對黃花菜生長、產量及紅壤旱地養分含量的影響,并對其生長過程中土壤養分、作物生長等的變化進行了系統觀測。【結果】兩種含鎂復合肥對促進黃花菜生長發育、提高黃花菜產量和抗病能力均具有良好效果,其中含鎂量較高的鎂肥II增產效果更優,比不施肥處理增產57.4%,比施氮磷鉀處理增產32.8%,比含鎂較低的鎂肥I增產14.5%。兩種含鎂復合肥對土壤交換性鎂和氮磷鉀含量亦具有一定影響。其中施用鎂肥II處理土壤堿解氮、速效磷、交換性鉀及交換性鎂含量分別比對照提高94.9%、46.5%、31.1%和35.3%。施用含鎂復合肥可以明顯提高黃花菜的產量、改善土壤養分狀況。【結論】在紅壤旱地土壤、氣候和生產力水平等條件下,為保證作物優質、高產,在現有施肥結構的基礎上,應考慮施用鎂肥。
    長期施肥對潮土土壤磷素利用與積累的影響
    黃紹敏,寶德俊,皇甫湘榮,張夫道,徐明崗,介曉磊
    中國農業科學. 2006, 39(01):  102-108 . 
    摘要 ( 1276 )   PDF (276KB) ( 806 )   收藏
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    【目的】探討小麥-玉米輪作方式下長期不同施肥方式和施肥量對潮土土壤磷素積累與利用。【方法】采用14年28季長期肥料試驗。【結果】不施磷肥土壤每年接收外源P 2.4~3.1 kg·ha-1,作物帶走P16.7~21.6 kg·ha-1,每年虧缺P 14.3~18.5 kg·ha-1;施磷肥處理除每年無機磷肥帶進78 kg·ha-1和107 kg·ha-1(1.5MNPK)外,有機肥、秸稈、雨水及灌溉水和種子帶進土壤P 2.7~134 kg·ha-1,其中9.2%~38.3%被小麥、玉米吸收利用,14年小麥的磷素累積利用率在4.4%~51%之間,高低順序為:NPK>NP>SNPK>MNPK>1.5MNPK>PK;玉米在13.4%~36.1%之間,高低順序為:1.5MNPK>SNPK>NPK>NP>MNPK>PK。【結論】磷素施入越多,殘留在土壤中越多,磷素利用率越低,其中38%~60%轉化為0~40 cm土層全磷,6.7%~13.6%轉化為有效態磷,有機肥處理磷的有效化高于無機肥;40%~62%成為非測定磷,即至少有40%~62%的外源磷素被浪費。
    長江三角洲綽墩遺址埋藏古水稻土肥力特征研究
    盧佳,胡正義,曹志洪,楊林章,林先貴,董元華,丁金龍,鄭云飛
    中國農業科學. 2006, 39(01):  109-117 . 
    摘要 ( 1170 )   PDF (263KB) ( 735 )   收藏
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    【目的】了解綽墩遺址古水稻土的基本性質,闡明水稻土的可持續利用機理。【方法】以綽墩遺址埋藏的古稻田土壤為研究對象,根據14C和考古學方法確定了土壤成土年齡和分布;按照中國土壤學會編匯的《土壤農業化學分析方法》測定了土壤pH,有機碳、營養元素含量。【結果】碳化稻和土壤有機質中14C分析證實綽墩遺址最古老水稻土為距今6 000年馬家浜時期,該時期古稻田位于表層以下1 m左右,平均每塊稻田面積5.2 m2。古水稻土(每克土中水稻植硅體含量>5 000顆)有機碳平均含量9.7 g·kg-1;N、P、K、Ca、Mg、S、Fe、Mn、Cu、Zn的全量平均含量分別為0.8、1.58、18.2、7.6、6.3 、0.1、22.、0.51 g·kg-1和40.9、80.8 mg·kg-1。【結論】古水稻土的有機碳、全氮含量、C/N比顯著大于同期種植強度較弱的古水稻土(水稻植硅體含量<5 000顆/g),其它元素差異不顯著;不同種植強度古水稻土有效態養分含量和pH差異不顯著。古水稻土N、S、Cu全量含量顯著低于現代表層水稻土,而有機碳、P、Fe、Mn全量含量則相反;現代表層水稻土有效態養分含量一般大于古水稻土。
    黃壤旱地-水系統中磷釋放及影響因素的研究
    劉 方,羅海波,舒英格,劉元生,何騰兵,龍 健
    中國農業科學. 2006, 39(01):  118-124 . 
    摘要 ( 1193 )   PDF (259KB) ( 784 )   收藏
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    【目的】探討降雨-徑流過程中土壤溶解態磷向水體遷移的規律及其影響因素。【方法】采用無界徑流小區法以及盆栽試驗和模擬試驗研究貴州中部黃壤旱地磷釋放及影響因素。【結果】旱地向水體釋放的磷量受施磷水平以及玉米生長過程的影響;在高磷黃粘泥土上施磷肥(P2O5)150~900 kg·ha-1,其滲透水中活性磷的平均含量達0.020~0.137 mg·L-1。旱地向水體釋放的磷量還受環境因子的影響,在溫度為30~35℃、水土比為15﹕1~25﹕1、淹水時間為12~18 h、酸雨pH值為3.82~3.43的條件下,土壤磷的釋放量顯著地增加。【結論】不同類型黃壤旱地地表徑流中活性磷(磷酸根態磷)含量存在明顯的差異,活性磷含量與土壤有效磷存在顯著的正相關,與土壤無定型鋁和有機質含量存在密切的負相關。
    吉林省黑土區農業生境大型土壤節肢動物群落組成與生態分布
    吳東輝,張柏,陳鵬
    中國農業科學. 2006, 39(01):  125-131 . 
    摘要 ( 972 )   PDF (229KB) ( 828 )   收藏
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    【目的】了解土地利用差異對大型土壤節肢動物群落特征的影響。【方法】選取吉林省中部黑土區農田、居民點園地和"三北"防護林等典型農業土地利用生境作為研究樣地,于2003年7月和9月分別進行大型土壤節肢動物調查,研究大型土壤節肢動物的群落組成與生態分布。【結果】研究區共捕獲大型土壤節肢動物2 357只,分別隸屬于節肢動物門5綱9目70科。【結論】不同農業土地利用生境大型土壤節肢動物群落個體數量和類群數差異顯著;農業生產活動促使大型土壤節肢動物向土壤下層移動,其中7月下移最為明顯;此外,不同類群大型土壤節肢動物對土地利用變化響應存在一定差異。
    園藝
    西葫蘆未受精胚珠離體培養條件的優化及胚囊植株的產生
    謝冰,王秀峰,樊治成
    中國農業科學. 2006, 39(01):  132-138 . 
    摘要 ( 921 )   PDF (297KB) ( 1123 )   收藏
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    【目的】建立西葫蘆離體雌核發育高頻植株再生體系,以加速自交系選育,有效縮短西葫蘆雜種一代育種周期。【方法】將西葫蘆未受精胚珠接種至附加2,4-D、NAA、BA的N6培養基上可形成胚狀體,該胚狀體轉接至無激素的N6培養基上可形成再生植株。【結果】試驗共獲得120棵再生植株(R0),其中41株因生活力低下死亡,8株用于摸索移栽方法死亡,71株移栽成活且生長正常,其中42株性狀表現符合二倍體特征且育性正常,已有10株獲得自交果實及種子,其余29株育性異常。試驗結果表明,胚珠發育時期、培養基、供體基因型及供體栽培季節等均顯著影響胚狀體誘導頻率。【結論】胚狀體起源于胚囊成員細胞,再生植株為胚囊植株。試驗篩選出3種誘導頻率較高的培養基;以開花前1日及當日的胚珠誘導頻率較高;秋播材料誘導效果最好。
    蘋果加工品種遺傳多樣性分析
    宋燁,翟衡,姚玉新,李明,杜遠鵬
    中國農業科學. 2006, 39(01):  139-144 . 
    摘要 ( 1007 )   PDF (297KB) ( 801 )   收藏
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    【目的】增進對加工專用蘋果品種的了解,為加工蘋果育種提供依據。【方法】利用12對微衛星(SSR)標記,通過聚類分析和主坐標分析,研究了18個蘋果加工品種和2個鮮食品種的遺傳差異。【結果】聚類分析結果將供試品種分為4大類群,第1類是高酸品種酸王,該品種與其它加工品種相似系數均小于0.42;第2類是龍豐和鈴鐺果,都含有中國小蘋果的遺傳因子;第3類包括大比耐、苦緋甘、苦開麥、美那和甜格力,都是單寧含量高的釀酒品種;第4類包括12個品種,主要是制汁品種和鮮食品種。各品種的相似系數分布在0.14~0.83之間。利用主坐標分析也將供試品種分為4大類群。兩種分析都表明,加工品種之間存在豐富的遺傳多樣性。【結論】釀酒品種與鮮食及制汁品種之間、中國小蘋果與西歐小蘋果之間有較大的遺傳差異,而制汁品種與鮮食品種的遺傳背景較為接近。
    草莓植株中病毒dsRNA的分離和鑒定
    李賀,代紅艷,張志宏,高秀巖,杜國棟,張馨宇,張志宏,高秀巖,杜國棟,張馨宇
    中國農業科學. 2006, 39(01):  145-152 . 
    摘要 ( 1013 )   PDF (888KB) ( 1011 )   收藏
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    【目的】病毒核酸分離是病毒基因組解析的基礎,本研究旨在建立草莓病毒的dsRNA分離方法,獲得草莓主要病毒的部分基因組序列。【方法】采用改進的dsRNA分離方法,對草莓病毒指示植物和栽培品種中的病毒dsRNA進行分離,通過瓊脂糖凝膠電泳和RT-PCR來鑒定。【結果】不同草莓品種中病毒dsRNA的含量不同,試管苗葉片中dsRNA含量高于露地苗幼葉,而露地苗幼葉中dsRNA含量明顯高于完全成熟葉。dsRNA對DNase Ⅰ具有很強的耐性;當酶解緩沖液中含0.5 mol·L-1 NaCl時,dsRNA對RNase A具有較強的耐性。利用DNA凝膠回收試劑盒,能夠有效回收凝膠中的dsRNA片段。應用RT-PCR技術,從凝膠回收的dsRNA及DNase Ⅰ/RNase A兩酶酶解處理后的dsRNA中分別擴增出草莓斑駁病毒和草莓輕型黃邊病毒的特異片段。【結論】建立了從草莓植株中分離和鑒定病毒dsRNA的完整技術體系,為草莓病毒中國分離物的基因組解析奠定了重要基礎。
    黑米抗氧化活性成分的分離純化和結構鑒定
    張名位,郭寶江,張瑞芬,池建偉,魏振承,徐志宏,張 雁
    中國農業科學. 2006, 39(01):  153-160 . 
    摘要 ( 1567 )   PDF (425KB) ( 1492 )   收藏
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    【目的】分離、純化和鑒定黑米抗氧化的主要活性成分。【方法】以體外總抗氧化能力為活性跟蹤指標,對黑米抗氧化提取物用石油醚、氯仿、乙酸乙酯和正丁醇等不同極性溶劑萃取分部后得到抗氧化能力最強的部分,再用Sephadex LH-20分離得到抗氧化主活性成分,采用紫外-可見光譜、紅外光譜、ESI-MS質譜和核磁共振(1HNMR和13CNMR)波譜法對其進行結構解析。【結果】黑米抗氧化提取物的5種溶劑萃取物以水部和正丁醇部的抗氧化能力最強,其總抗氧化能力分別為383和392 ku·g-1,其中,從水部可得到4種抗氧化主活性成分,總抗氧化能力分別為976、878、1 134和1 087 ku·g-1。波譜結構解析表明,4種成分均為花色苷類化合物,分別是錦葵素、天竺葵素-3.5-二葡萄糖苷、矢車菊素-3-葡萄糖苷和矢車菊素-3, 5-二葡萄糖苷。【結論】花色苷類化合物是黑米抗氧化作用的主要物質基礎。
    畜牧·獸醫·資源昆蟲
    利用實時定量PCR對瘤胃甲酸甲烷桿菌定量方法的建立與應用
    趙玉華,王加啟
    中國農業科學. 2006, 39(01):  161-169 . 
    摘要 ( 916 )   PDF (320KB) ( 965 )   收藏
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    【目的】解決傳統微生物評價方法存在的弊端,尋找快速、準確、靈敏的瘤胃微生物評價的新方法。【方法】利用實時定量PCR技術,以16S rDNA為靶序列,建立了瘤胃甲酸甲烷桿菌(Methanobacterium formicicum)的分子定量方法。【結果】采用本文所設計的引物、探針以及相應的PCR反應體系,檢測極限可達到30拷貝(15個甲酸甲烷桿菌),與傳統檢測方法相比要更為迅速、靈敏。采用實時定量PCR技術所測得的細菌數量與采用傳統的最大或然數記數法所測的細菌數量具有很高的相關性(r=0.957,P<0.01),表明采用實時定量PCR方法能夠準確反映瘤胃微生物數量的變化。利用所建立的方法對利魯雜交肉牛和荷斯坦奶牛瘤胃液中甲酸甲烷桿菌進行了定量檢測。結果表明,利魯雜交肉牛瘤胃液中的甲酸甲烷桿菌濃度是荷斯坦奶牛的5.6倍。【結論】利用實時定量PCR技術建立的瘤胃甲酸甲烷桿菌的分子定量方法能夠準確反映瘤胃微生物數量的變化。
    不同BMPRIB基因型小尾寒羊同期發情處理后FSHR和LHR表達量的研究
    賈存靈,李寧,魏澤輝,朱曉萍,劉海英,賈志海
    中國農業科學. 2006, 39(01):  170-175 . 
    摘要 ( 753 )   PDF (447KB) ( 886 )   收藏
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    【目的】根據小尾寒羊BMPRIB突變位點進行基因分型。研究發情期小尾寒羊BMPRIB基因型(BB、AB和AA)與FSHR和LHR mRNA表達量的關系。【方法】利用半定量PCR技術。【結果】在發情期BB型右側卵巢FSHR 的mRNA水平(1.14±0.11)顯著高于AA(0.44±0.11)和AB(0.36±0.08)型(P<0.01),但左側卵巢在基因型間無顯著性差異;BB型右側卵巢LHR的mRNA水平(0.42±0.02)也顯著高于AA(0.23±0.02)和AB(0.25±0.04)型(P<0.01),左側卵巢各基因型間無顯著性差異。【結論】FSHR和LHR的mRNA的高表達量可能是引起小尾寒羊較高的產羔數的原因之一。
    大腸桿菌vpr基因突變株的蛋白表達及功能研究
    孫建和,嚴亞賢,陸承平
    中國農業科學. 2006, 39(01):  176-180 . 
    摘要 ( 1471 )   PDF (414KB) ( 850 )   收藏
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    【目的】進一步確定vpr基因及相關蛋白的功能。【方法】在獲得vpr同源基因突變株MC1061△vpr的基礎上,構建了vpr基因突變株的回復株MC1061-C,并進行了噬菌體裂解試驗、細胞壁吸附試驗、蛋白表達和印跡試驗。【結果】親本株MC1061和回復株MC1061-C對VT2噬菌體C43b的裂解敏感,突變株MC1061△vpr抵抗噬菌體C43 d的裂解。噬菌體吸附細胞壁試驗中,吸附30 min后,親本株和回復株的上清液中分別存在6.4%和 5.2%的游離噬菌體,吸附到90 min時未有大量的游離噬菌體釋放。噬菌體與突變株的細胞壁吸附30 min后,上清液中有85.4%的游離噬菌體存在,表明VT2噬菌體能與親本MC1061和回復株MC1061-C的細胞壁不可逆吸附,但不能與突變株MC1061△vpr的細胞壁發生不可逆吸附。在蛋白表達中,Western blot顯示回復株和親本株均能轉印出特異性90 000蛋白主帶,而突變株沒有。【結論】vpr基因表達的分子量為90 000的Vpr蛋白與VT2噬菌體的裂解敏感性有關,可能是VT2噬菌體的裂解受體。
    應用重組抗原建立檢測牛傳染性胸膜肺炎的間接ELISA方法
    辛九慶,高玉龍,李媛,王硯范,錢愛東
    中國農業科學. 2006, 39(01):  181-186 . 
    摘要 ( 1072 )   PDF (404KB) ( 742 )   收藏
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    【目的】絲狀支原體絲狀亞種SC(Mycoplasma mycoides subsp mycoides SC,MmmSC)是引起牛傳染性胸膜肺炎(contagious bovine pleuropneumonia,CBPP)的病原體。成熟的脂蛋白LppQ N端是親水性的,在自然感染和人工感染時,特異性免疫反應產生早,持續時間長,抗體滴度高,因此有理由相信脂蛋白LppQ N端片段將有可能成為一種理想的CBPP診斷抗原。【方法】由于TGA密碼子在支原體中編碼色氨酸(Trp),而在細菌中則為終止密碼子,故利用一步重疊延伸PCR突變方法體外誘變中國生產抗原用毒株HVRI Ⅹ的lppQ基因進行原核表達,利用重組抗原建立間接ELISA方法。【結果】序列分析表明,將lppQ基因第198位的A成功突變為G, 并將突變后的脂蛋白LppQ N端基因片段插入原核表達載體pET32a的多克隆位點,構建了原核表達載體。重組菌經誘導后,表達出了分子量約為42 kD、帶有6個組氨酸標簽的重組融合蛋白,純化后蛋白質純度高達95%,Western blot結果顯示,重組蛋白具有很好的免疫活性。將純化的蛋白質稀釋至0.35 ?g·ml-1,包被酶標反應板,優化反應條件,P/N為4.8(0.934/0.193)。應用TG-ROC統計軟件分析確定陰陽性血清臨界OD值為0.376,敏感性為95.8%(46/48), 特異性為98.9%(161/163)。應用間接ELISA和補體結合試驗(CFT)對來自3個省自治區3 817頭份牛血清進行了檢測。【結論】Kappa值為0.63,兩種方法存在中、高度一致性。
    熒光定量RT-PCR法檢測運輸應激豬熱休克蛋白mRNA轉錄水平
    李玉保,鮑恩東,王志亮,趙茹茜
    中國農業科學. 2006, 39(01):  187-192 . 
    摘要 ( 1124 )   PDF (353KB) ( 859 )   收藏
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    【目的】探討應激時熱休克蛋白mRNA轉錄水平的變化。【方法】根據HSP90、HSP70和GAPDH mRNA序列,設計并合成引物,將PCR擴增的基因片段克隆到pGEM-T載體,重組質粒經篩選、鑒定,體外轉錄出RNA,梯度稀釋作為陽性模板,用于標準曲線的制定和樣品檢測,建立了一步法實時熒光定量RT-PCR技術平臺,并用于檢測長途運輸豬心臟和肝臟中HSP70及HSP90 mRNA轉錄水平的改變。【結果】經1、2、4、6和10 h的運輸應激后,組織中HSP70 mRNA的轉錄水平隨著運輸應激時間的延長一直呈現出上升的趨勢,運輸應激到10 h時HSP70 mRNA的轉錄水平升到最高,肝臟和心臟組織中HSP70 mRNA的轉錄水平分別為對照組的2.5和4.1倍;HSP90 mRNA的轉錄水平則隨著運輸應激時間的延長呈下降趨勢。【結論】運輸應激可以影響HSP mRNA轉錄水平的變化,并且對不同家族的HSP mRNA轉錄水平的影響不同;HSP70 mRNA的轉錄水平有望成為豬運輸應激的判定指標之一。
    研究簡報
    一個耐鹽小麥-多枝賴草二體異附加系外源染色體的鑒定
    葛榮朝,張敬原,趙寶存,黃占景,沈銀柱,趙茂林
    中國農業科學. 2006, 39(01):  193-198 . 
    摘要 ( 1320 )   PDF (368KB) ( 472 )   收藏
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    【目的】對附加系Line15進行耐鹽性驗證,并了解其外源多枝賴草染色體的遺傳背景。【方法】利用含0.4%(w/w)NaCl的人工模擬鹽池進行耐鹽性鑒定,并對Line15根尖細胞、花粉母細胞的染色體數目進行檢測,進而利用熒光原位雜交和微衛星標記技術對其遺傳物質進行進一步鑒定。【結果】小麥-多枝賴草雜交后代Line15為一個具有較高耐鹽特性的材料,其染色體組成為2n=44=22 II,屬于一個小麥-多枝賴草二體異附加系。根據SSR檢測結果表明,Line15附加的一對多枝賴草染色體與小麥的第2部分同源群長臂、第3部分同源群著絲粒和第7部分同源群短臂密切相關。【結論】對小麥-多枝賴草二體異附加系Line15進行了生理、細胞和分子水平的系統檢測,較全面地揭示了Line15耐鹽性的具體來源。
    新疆南部棉區棉鈴蟲發生趨勢及Bt棉花的控制效率
    李號賓,吳孔明,楊秀榮,徐遙,姚舉,汪飛,馬祁
    中國農業科學. 2006, 39(01):  199-205 . 
    摘要 ( 1032 )   PDF (441KB) ( 1097 )   收藏
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    【目的】新疆南部棉花種植區已發展成為中國棉花產業的重要基地。作為棉花生產的重要影響因素,棉鈴蟲具有在新疆南部猖獗危害的生物學基礎。【方法】本文報道了南疆棉鈴蟲發生趨勢及轉Bt基因抗蟲棉對棉鈴蟲控制效率的研究結果。【結果】1993~2004年對麥田一代棉鈴蟲幼蟲數量變化的監測顯示,1997年后棉鈴蟲的發生危害逐年上升,表明南疆糧棉混作區種植制度的改革已導致棉鈴蟲成為農業生產的重要害蟲。2002~2004年對抗蟲棉GK19(表達Cry1A殺蟲蛋白)、SGK321(表達Cry1A 和 CpTI殺蟲蛋白)和對照品種棉鈴蟲種群動態的研究顯示,二代棉鈴蟲是南疆地區棉花的主要危害代別,抗蟲棉花對幼蟲的控制效率可達75%以上。在棉鈴蟲發生中等年份,轉基因抗蟲棉花可有效地控制棉鈴蟲的危害。【結論】鑒于棉鈴蟲的嚴重危害,南疆地區有必要發展基于Bt棉花的棉花害蟲綜合防治技術。
    山楂加工中還原型VC和氧化型VC含量變化的研究
    高愿軍,高 晗,郝莉花,郝亞勤,南海娟,李元瑞
    中國農業科學. 2006, 39(01):  206-209 . 
    摘要 ( 775 )   PDF (227KB) ( 710 )   收藏
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    【目的】研究山楂加工過程中還原型VC和氧化型VC含量的變化。【方法】通過觀測山楂打漿、糖煮和干燥工序中還原型VC和氧化型VC含量的變化,來研究其變化規律。【結果】應用EDTA 二鈉和茶多酚處理能控制打漿中還原型VC損失,添加六偏磷酸鈉可控制氧化型VC損失。真空糖煮比常壓糖煮有利于山楂還原型VC含量的保持,但對氧化型VC含量影響不大。干燥對山楂還原型VC與氧化型VC含量均有顯著影響。真空干燥和微波干燥有利于山楂還原型VC含量的保持。【結論】山楂果實含有較多的氧化型VC,其在加工過程中變化較明顯,對山楂制品的總VC含量有顯著影響。
    豬源馬鏈球菌獸疫亞種中國分離株類M基因特性分析
    范紅結,陸承平,唐家琪
    中國農業科學. 2006, 39(01):  210-214 . 
    摘要 ( 756 )   PDF (268KB) ( 793 )   收藏
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    【目的】闡明國內不同區域豬源馬鏈球菌獸疫亞種分離株類M基因的特性,為疫苗研制提供指導。【方法】利用PCR技術,擴增國內9省市從1974~2003年分離的9株馬鏈球菌獸疫亞種類M基因,并進行克隆、測序及序列分析。【結果】發現7株類M基因長度為1 137 bp,含一個閱讀框,CG-74-63和CP-0104株的長度分別為1 143 bp及1 125 bp。除1株關節炎分離株CP-0104外,引致敗血癥的8株菌類M基因的核苷酸同源性高達95.4%~99.9%,推導的相應氨基酸序列同源性高達92.1%~100%。9株豬源菌與馬源菌株及人源菌株類M基因的核苷酸同源性分別為81.6%~87.0%、81.7%~91.8%。9株豬源分離株類M蛋白信號肽、C末端細胞錨定區的序列均高度同源;除CP-0104外,其余8株高變區高度同源。【結論】國內不同區域豬源馬鏈球菌獸疫亞種分離株類M基因同源性高。
    SYBR GreenI模式熒光RT-PCR鑒別新城疫病毒毒力
    弋英,陳繼明,王志亮,孫承英,鮑恩東
    中國農業科學. 2006, 39(01):  215- . 
    摘要 ( 1143 )   PDF (269KB) ( 801 )   收藏
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    【方法】根據NDV的F蛋白裂解位點附近的序列,設計分別對應于NDV強毒和弱毒的兩對引物,然后用SYBR Green I模式的熒光RT-PCR方法比較兩對引物對同一NDV的RNA擴增效率以及擴增產物的Tm值,來區分NDV的毒力。【結果】對8株NDV進行檢測并測定其雞胚平均致死時間(MDT),熒光RT-PCR方法的檢測結果和MDT測定的結果完全一致,說明此熒光RT-PCR法可用于NDV毒力檢測。
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