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當期目錄

    2011年 第44卷 第23期 刊出日期:2011-12-01
      
    作物遺傳育種·種質資源·分子遺傳學
    雜交玉米農大108及其親本種子內生細菌群落的多樣性
    劉洋, 左山, 鄒媛媛, 王建華, 宋未
    中國農業科學. 2011, 44(23):  4763-4771.  doi:10.3864/j.issn.0578-1752.2011.23.001
    摘要 ( 907 )   PDF (368KB) ( 522 )   收藏
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    【目的】 研究不同基因型玉米對其種子內生細菌群落結構的影響。【方法】通過構建16S rDNA文庫的非培養方法,對雜交玉米組合農大108正、反交及其親本種子內生細菌群落多樣性進行研究。【結果】 兩后代種子內生細菌分別含46和42個OTU,第一優勢菌屬均為Pseudomonas,豐度分別為34.29%和34.00%;親本玉米黃C和178種子內生細菌分別含17和11個OTU,第一優勢菌屬分別為Enterobacter及Burkholderia,豐度分別為49.13%和89.72%。母本玉米黃C種子內生細菌群落中Roseateles、Enterobacter、Pseudomonas及Sphingomonas 4個菌屬與父本178種子內生細菌群落中Pseudomonas、Ralstonia、Paenibacillus及Bacillus 4個菌屬存在其正交后代種子中。母本178種子內生細菌群落中Acinetobacter、Pseudomonas、Ralstonia、Paenibacillus及Bacillus 5個菌屬與父本黃C種子內生細菌群落中Roseateles、Citrobacter、Pantoea、Pseudomonas、Stenotrophomonas及Escherichia 6個菌屬存在其反交后代種子中。【結論】遺傳相關的雜交玉米農大108正、反交后代其親本在內生細菌群落結構具有一定的關聯性。
    苯丙氨酸與UV-C對苦蕎蘆丁含量影響及相關基因表達分析
    孫朝霞, 侯思宇, 楊武德
    中國農業科學. 2011, 44(23):  4772-4780.  doi:10.3864/j.issn.0578-1752.2011.23.002
    摘要 ( 754 )   PDF (513KB) ( 653 )   收藏
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    【目的】克隆與苦蕎蘆丁生物合成相關基因序列,探討外源前體物質及UV-C輻射條件下蘆丁含量及基因表達水平的影響,為分子選育高蘆丁含量蕎麥品種奠定基礎。【方法】基于簡并引物結合3′RACE的方法,克隆苦蕎蘆丁合成途徑相關基因;高效液相色譜(HPLC)測定持續添加外源苯丙氨酸(L-phenylalanine,Phe)前體(1、2、4 mg•L-1)1—5 d和輻射時間(1、3、5、7 h)UV-C處理條件下葉片蘆丁含量的變化,qRT-PCR分析相關基因表達水平。【結果】Phe(4 mg•L-1)處理1 d,蘆丁含量(26.15 mg•gFW-1)為未處理對照(12.55 mg•gFW-1)的2倍;UV-C輻射3 h,蘆丁含量(17.36 mg•gFW-1)明顯高于對照;克隆到3個基因FtCHS,FtF3H和FtFLS-like,qRT-PCR分析表明Phe(1 mg•L-1)處理4 d,FtCHS相對表達量為對照的4.84倍,Phe(4 mg•L-1)處理5 d,FtF3H相對表達量為對照的1.06倍,Phe(2 mg•L-1)處理5 d,FtFLS-like相對表達量為對照的3.90倍;UV-C輻射1—3 h,FtCHS、FtF3H和FtFLS-like相對表達量分別高于對照。而FtFLS-like基因,僅在UV-C輻射1 h,相對表達量升高為對照的127.71倍。【結論】添加不同濃度Phe前體及不同時間UV-C輻射,蘆丁含量變化及與蘆丁合成相關基因表達量存在差異,為進一步探討蘆丁生物合成途徑及影響因素奠定基礎。
    耕作栽培·生理生化·農業信息技術
    不同栽培模式對雜交粳稻常優3號產量及養分吸收利用效率的影響
    薛亞光, 王康君, 顏曉元, 尹斌, 劉立軍, 楊建昌
    中國農業科學. 2011, 44(23):  4781-4792.  doi:10.3864/j.issn.0578-1752.2011.23.003
    摘要 ( 720 )   PDF (559KB) ( 523 )   收藏
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    【目的】旨在探討水稻高產與養分高效利用協調的栽培技術。【方法】以雜交粳稻常優3號為材料,設置未施氮處理(0N)、當地高產栽培(對照)、增產增效栽培、再高產栽培、再高效栽培和保產增效栽培等6種栽培模式,比較分析不同栽培模式下水稻產量的形成特點和養分吸收利用特征。【結果】增產增效栽培、再高產栽培、再高效栽培和保產增效栽培兩年的平均產量分別為9.5、11.5、10.7和9.0 t•hm-2,較對照分別提高了14.5%、38.6%、28.9%和8.4%。與對照相比,上述各處理的氮肥吸收利用率分別提高了39.5%、93.9%、86.1%和31.0%(相對值),氮肥農學利用率分別提高了66.5%、84.4%、98.2%和70.1%。不同栽培模式下水稻穗分化至抽穗期的氮、磷、鉀的吸收量與產量呈顯著正相關。【結論】通過栽培技術的集成優化,可以大幅度同步提高水稻的產量和養分利用效率。
    糯玉米灌漿結實期籽粒淀粉理化特性變化
    陸大雷, 閆發寶, 陸衛平
    中國農業科學. 2011, 44(23):  4793-4800.  doi:10.3864/j.issn.0578-1752.2011.23.004
    摘要 ( 605 )   PDF (626KB) ( 469 )   收藏
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    【目的】探明糯玉米籽粒淀粉理化特性在灌漿結實期的變化趨勢。【方法】以糯玉米新品種NQ01和NQ11為材料,研究其灌漿結實期(花后10、20、30和40 d)籽粒淀粉理化特性的變化。【結果】隨著灌漿進程推進,籽粒干重和淀粉含量逐漸升高,籽粒含水率、蛋白質和可溶性糖含量逐漸降低,籽粒鮮重和體積先升后降。淀粉粒隨灌漿進程逐漸增大,且以花后10—20 d增加最為明顯。結晶類型和碘結合力均表現出典型的糯性特征。差示掃描量熱法(DSC)和快速黏度分析儀(RVA)研究表明,隨著灌漿進程,轉變溫度和糊化溫度降低,熱焓值在花后20—40 d無顯著差異,但顯著高于花后10 d,回生值和黏度特征值兩品種表現不一。【結論】碘結合力、晶體類型和回復值均表現出典型的糯性特征。糯玉米灌漿結實期理化特性有顯著差異,淀粉粒大小和品質成分的變化引起了淀粉糊化和熱力學特性發生變化,但品種間變化趨勢存在差異。
    農產品追溯碼的編碼研究
    余華, 吳振華
    中國農業科學. 2011, 44(23):  4801-4806.  doi:10.3864/j.issn.0578-1752.2011.23.005
    摘要 ( 983 )   PDF (252KB) ( 595 )   收藏
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    【目的】設計一種農產品追溯碼,實現公眾不需查詢專業數據庫便可獲知企業信息的愿望。【方法】根據每個區位碼唯一對應一個漢字的特點,采用區位碼表示生產企業信息,針對碼長增加的問題設計加密算法。【結果】追溯碼由產品碼、產地碼、生產日期碼、認證類型碼等部分組成,其中產地碼由行政區劃碼與企業名稱相結合構成;通過進制轉換、劃分區段等編碼算法對產地碼、生產日期碼進行加密轉換,并將產地碼、生產日期碼中的區段標識碼與認證類型碼進行排列組合生產校驗碼后,34位的追溯碼縮短為20位。【結論】本文設計出的20位追溯碼長度較短,加密性較強,可以脫離數據庫追溯出與生產企業和農產品相關的關鍵信息,在發生農產品質量安全問題時,能夠快速準確地定位到企業以采取應急措施。
    植物保護
    枯草芽胞桿菌Bs-916的全基因組分析
    王曉宇, 羅楚平, 陳志誼, 劉永鋒, 劉郵洲, 聶亞鋒, 于俊杰, 尹小樂
    中國農業科學. 2011, 44(23):  4807-4814.  doi:10.3864/j.issn.0578-1752.2011.23.006
    摘要 ( 630 )   PDF (546KB) ( 1370 )   收藏
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    【目的】對枯草芽胞桿菌Bs-916進行全基因組測序,為今后更好挖掘和利用該菌生防潛力提供較多的分子生物學信息。【方法】通過應用比較基因組學軟件與另一測序菌株Bs168進行全基因組序列分析。【結果】Bs-916菌株全基因組大小為3 925 958 bp,GC含量為46.4%,與其它已測序全基因組芽孢桿菌相比,其GC含量最高;預測所得CDS數為4 056個,152個串聯重復區域,轉座子103個,IS(插入序列)序列數量37個, tRNA 46個,rRNA 39個;比較基因組學分析其含有8個NRPS/PKS基因簇,其中bacillomycin L,macrolactin,difficidin這3個基因簇在比較菌株Bs168中不存在;該菌還含有植酸酶基因、comAPQX及sfp等與生防因子相關的基因。【結論】Bs-916菌株全基因組含有多種抗菌物質編碼基因簇,是一類具有極大生防潛力的典型根際革蘭氏陽性菌株。該菌株全基因組序列的測定及其遺傳操作方法的可行性,有利于其次生代謝產物的開發和利用。次生代謝產物具有潛在的應用價值,有望在未來開發成獨特的農業生物工程制劑。
    光活化成分α-三聯噻吩對紅火蟻的致死作用及對其行為的影響
    劉娜, 程東美, 徐漢虹, 張志祥
    中國農業科學. 2011, 44(23):  4815-4822.  doi:10.3864/j.issn.0578-1752.2011.23.007
    摘要 ( 501 )   PDF (557KB) ( 742 )   收藏
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    【目的】明確光活化成分α-三聯噻吩(α-T)對紅火蟻(Solenopsis invicta Buren)的致死作用和行為影響。【方法】采用Potter噴霧法研究α-三聯噻吩經UVA光照后對紅火蟻的擊倒活性、致死作用及對紅火蟻行走、攀附、聚集能力的影響,并應用掃描電鏡技術探討α-三聯噻吩對紅火蟻光活化影響的作用機理。【結果】100 μg•mL-1 α-三聯噻吩經UVA光照90、120和180 min后,對中型工蟻的擊倒率分別為93.08%、98.29%和100%,顯著高于藥劑黑暗處理90、120和180 min后對中型工蟻的擊倒率7.41%、18.52%和25.93%;100 μg•mL-1 α-三聯噻吩經UVA光照處理30 min,并黑暗放置1、30、60、90、120、150和180 min后,中型工蟻的死亡率分別為6.25%、10.42%、18.75%、29.17%、37.50%、43.75%和52.08%;行走率分別為25.26%、18.75%、10.67%、6.58%、2.83%、2.08%和0;對倒置一次性塑料杯的附著率分別為20.83%、12.50%、6.17%、4.17%、2.01%、1.96%和0;聚集率分別為20.78%、17.19%、10.94%、15.63%、14.06%、27.08%和37.50%;100 μg•mL-1 α-三聯噻吩UVA光照處理30 min后,黑暗放置30 min,中型工蟻觸角棒節的毛形感受器和刺形感受器的形態發生顯著變化,大部分從中下部發生彎曲,呈倒伏狀態,并出現明顯指向雜亂的現象。【結論】α-三聯噻吩對紅火蟻中型工蟻具有良好的擊倒活性和一定的致死作用,顯著降低其行走能力、對杯壁的攀附能力及聚集能力,顯著改變觸角感受器的形態及指向,光活化成分有望成為防治紅火蟻的安全環保新手段。
    土壤肥料·節水灌溉·農業生態環境
    直播冬油菜干物質積累及氮磷鉀養分的吸收利用
    劉曉偉, 魯劍巍, 李小坤, 卜容燕, 劉波, 次旦
    中國農業科學. 2011, 44(23):  4823-4832.  doi:10.3864/j.issn.0578-1752.2011.23.008
    摘要 ( 658 )   PDF (690KB) ( 616 )   收藏
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    【目的】了解高產直播冬油菜的養分吸收和利用規律。【方法】高產栽培條件下,在冬油菜整個生育期內定期取樣,測定油菜各部位干物質量和養分含量,計算各生育時期氮、磷、鉀養分積累量,明確甘藍型冬油菜在4 500 kg•hm-2產量條件下的干物質積累及氮、磷、鉀養分吸收利用規律。【結果】直播冬油菜總干物質積累呈“S”形曲線,表現為薹花期>苗期>角果成熟期。根、莖、綠葉、落葉的干物質量分別在播種后185、200、130、230 d達最大值,干物質量分別為2 286、5 450、2 306、2 162 kg•hm-2。各器官氮含量(籽粒除外)隨生育時期的推進逐漸降低,苗期變化平緩,蕾薹期后降幅較大。莖、綠葉中磷含量苗期略有上升,蕾薹期后迅速降低。根、落葉、角殼中磷含量則持續下降。根、莖中鉀含量在苗期波動較大,蕾薹期后迅速降低。葉片中鉀含量在苗期略有降低,其后一直穩定。落葉中鉀含量一直波動變化,無明顯規律。氮、鉀的積累規律相似,出苗后持續增加,花期達最大值,而后略有下降,兩者積累量均表現為苗期>蕾薹期>花期。整個生育期磷積累量持續上升,表現為角果期>苗期>薹花期。高產栽培條件下直播油菜N、P、K最大養分需求量分別為217.6、39.9、219.8 kg•hm-2,需求比例為1.00﹕0.18﹕1.01。【結論】除落葉和生殖器官外,各器官干物質積累量、養分含量、養分積累量均呈現苗期升高花期后降低的變化趨勢。根、莖、葉中的部分養分在花期后會轉移到籽粒中,保證直播冬油菜花期前充足的養分供給是高產的前提。
    聚類、粗糙集與決策樹的組合算法在地力評價中的應用
    陳桂芬, 馬麗, 董瑋, 辛敏剛
    中國農業科學. 2011, 44(23):  4833-4840.  doi:10.3864/j.issn.0578-1752.2011.23.009
    摘要 ( 796 )   PDF (304KB) ( 678 )   收藏
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    【目的】地力評價方法大多數有一定的主觀性,較少考慮土壤各屬性間的依賴關系。論文旨在采用數據挖掘方法,尋求地力等級劃分的新方法。【方法】結合農安縣耕地調查數據,應用K-means聚類方法、Johnson粗糙集屬性約簡算法與C4.5決策樹算法相結合的優化算法評價地力等級。【結果】使用K-means聚類方法,得到最佳學習樣本數;使用粗糙集屬性約簡和決策樹相結合的方法,去掉了冗余屬性7個,決策樹模型共有節點317個,其中葉節點個數為159個,生成規則159條,模型準確率為82.08%。與未聚類和未約簡的方法相比,決策樹結點個數減少41.62%。【結論】使用該組合算法,在保證模型準確率的同時,降低了算法的時間和空間復雜性,提高了挖掘效率。
    園藝
    矮化中間砧富士蘋果初夏土施15N-尿素的吸收分配特性
    韓明玉, 張芳芳, 張立新, 劉長虹, 趙彩平
    中國農業科學. 2011, 44(23):  4841-4847.  doi:10.3864/j.issn.0578-1752.2011.23.010
    摘要 ( 493 )   PDF (307KB) ( 508 )   收藏
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    【目的】為富士蘋果生產合理施氮肥提供理論依據。【方法】以5年生大田栽培紅富士蘋果(基砧為秋子,中間砧為M26)為試材,以初夏土施15N-尿素為手段,研究2年不同時期主要器官對15N-尿素的吸收分配特性。【結果】初夏施肥后1個月,根系吸收了一定量的氮,但對新生器官供應較少。隨著物候期的推進,新生器官15N肥分配勢逐步增強,其中新梢吸收分配15N能力最強,其次為葉片和果實,采收期根系吸收分配15N能力又顯著回升。施肥翌年各主要器官吸收氮來自肥料氮的百分數均顯著高于施肥當年。在果實采收期,一年生器官、多年生枝干和根系15N分配率當年分別為23.5%、40.4%、36.1%,翌年分別為27.7%、34.9%、37.4%。【結論】初夏施氮,主要滿足了樹體當年后期新梢生長發育對氮的需要,同時利于樹體積累貯藏營養。初夏按本試驗方法施氮肥,采收期樹體的當年氮肥利用率為56.19%。
    歐李八氫番茄紅素合成酶cDNA克隆、序列分析及在大腸桿菌中的功能表達
    張建成, 杜俊杰, 劉和, 王鵬飛, 薛曉芳, 穆霄鵬, 陳俊奇
    中國農業科學. 2011, 44(23):  4848-4857.  doi:10.3864/j.issn.0578-1752.2011.23.011
    摘要 ( 487 )   PDF (918KB) ( 453 )   收藏
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    【目的】克隆、分析歐李[Cerasus humilis(Bge)Sok]八氫番茄紅素合成酶(phytoene synthase,PSY)基因,并利用大腸桿菌異源表達體系驗證其功能。【方法】以歐李果實中分離的總RNA為模板,通過RT-PCR擴增到PSY cDNA中間片段,再利用RACE技術獲得該基因cDNA全長并分析其序列;然后利用PCR技術獲得歐李PSY cDNA編碼區全長,將其克隆到原核表達載體pET-28a(+),獲得重組質粒pET-ChPSY,轉化大腸桿菌BL21(DE3)誘導表達,并利用工程菌株驗證融合蛋白6×His-PSY的催化活性。【結果】歐李PSY cDNA全長1 559 bp,最大開放讀碼框為1 194 bp,可編碼398個氨基酸,命名為ChPSY。核酸序列及其推導的氨基酸序列與已知其它植物PSY核酸、氨基酸序列之間的相似性分別在70%和65%以上,并且發現歐李PSY的N末端存在1—55個氨基酸殘基組成的轉運肽信號序列,在37—58和219—240氨基酸區域包含2個跨膜結構域。SDS-PAGE分析表明,原核表達獲得了具有較高表達水平的融合蛋白6×His-PSY,相對分子量約為45.8 kD。通過大腸桿菌異源表達證實ChPSY可編碼一個功能蛋白,促進工程菌株中β-胡蘿卜素含量增加。【結論】該研究成功地克隆了歐李PSY cDNA全長并在大腸桿菌中功能表達,為進一步研究該酶蛋白特性和歐李果實類胡蘿卜素的合成機制奠定了基礎。
    貯藏·保鮮·加工
    擬莖點霉侵染對龍眼果實采后果皮褐變和活性氧代謝的影響
    陳藝暉, 林河通, 林藝芬, 張居念, 趙云峰
    中國農業科學. 2011, 44(23):  4858-4866.  doi:10.3864/j.issn.0578-1752.2011.23.012
    摘要 ( 535 )   PDF (392KB) ( 465 )   收藏
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    【目的】研究擬莖點霉侵染對龍眼果實采后果皮褐變和活性氧代謝的影響。【方法】采后龍眼果實用擬莖點霉孢子懸浮液(濃度為104個孢子/mL)浸泡接種5 min,以無菌水處理的龍眼果實為對照。經過處理的果實在(28?1)℃、相對濕度90%下貯藏,貯藏期間定期測定果實病害指數、果皮褐變指數、MDA含量、 產生速率、活性氧清除酶(SOD、CAT、APX)活性和內源抗氧化物質(AsA、GSH)含量的變化。【結果】與對照果實相比,擬莖點霉侵染提高了龍眼果實病害指數和果皮褐變指數。同時,擬莖點霉侵染促進龍眼果皮 產生速率增加,且在整個侵染過程維持較高水平;擬莖點霉侵染0—2 d內的果皮GSH含量和APX活性明顯下降而SOD和CAT活性快速上升,侵染2—5 d內的果皮APX活性快速上升而SOD和CAT活性快速下降,侵染5 d后的果皮SOD和APX活性快速下降;在整個侵染過程的果皮AsA含量快速下降,而MDA含量增加。【結論】擬莖點霉侵染導致龍眼果皮活性氧清除能力下降而積累大量活性氧,大量的活性氧對細胞膜結構的破壞會引起細胞區室化功能的喪失,使多酚氧化酶與酚類物質接觸,其結果引起酚類物質的酶促氧化和黑褐色高聚物的形成而導致龍眼果皮褐變。
    海藻糖在釀酒酵母抗銅脅迫中的作用
    趙育, 李海蘭, 杜君, 戰吉宬
    中國農業科學. 2011, 44(23):  4867-4873.  doi:10.3864/j.issn.0578-1752.2011.23.013
    摘要 ( 545 )   PDF (482KB) ( 579 )   收藏
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    【目的】研究銅脅迫下,釀酒酵母胞內海藻糖的積累情況及海藻糖對釀酒酵母的保護作用,為探討銅脅迫下釀酒酵母的防御保護機制提供理論依據。【方法】以改良模擬葡萄汁為發酵培養基,分別對菌株AWRI、BH8和Freddo進行直接銅脅迫處理(Cu2+濃度為1.00 mmol•L-1)、熱激預處理(37oC,1 h)、再銅脅迫處理,同時,設定無銅培養為對照。測定各種處理下釀酒酵母的存活率、胞內海藻糖的積累和6-磷酸海藻糖合成酶(TPS1)酶活性的變化。【結果】與對照相比,1.00 mmol•L-1Cu2+脅迫處理使酵母細胞內海藻糖的含量增加,TPS1酶活性提高。熱激預處理可誘導海藻糖的積累,且銅脅迫下細胞的存活率也顯著高于直接銅脅迫處理。相同處理條件下,菌株Freddo胞內海藻糖的含量最多,細胞存活率也最高。【結論】銅脅迫處理可誘導胞內海藻糖的積累,并且這一積累對銅脅迫下的釀酒酵母起到一定的保護作用。
    畜牧·資源昆蟲
    日糧添加高水平硫酸鋅和納米氧化銅對雞臟器組織鋅銅沉積的影響
    潘娜, 朱風華, 王友令, 陳甫, 趙才兵, 朱連勤
    中國農業科學. 2011, 44(23):  4874-4881.  doi:10.3864/j.issn.0578-1752.2011.23.014
    摘要 ( 730 )   PDF (304KB) ( 465 )   收藏
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    【目的】研究高鋅(硫酸鋅)常銅(納米氧化銅)日糧對雞臟器組織銅鋅含量的影響,探討Zn2+與納米氧化銅在消化道吸收時的互作關系。【方法】選取1日齡SPF白萊航蛋用公雛120只,隨機分為4組,每組5個重復。1組為對照組,飼喂基礎日糧(以納米氧化銅的形式添加銅8 mg•kg-1);2—4組為高鋅組,以ZnSO4•7H2O的形式分別在基礎日糧中添加鋅250、500和1 000 mg•kg-1。【結果】日糧添加鋅250—1 000 mg•kg-1,受試雞肝、腺胃、十二指腸和空腸中鋅和金屬硫蛋白含量顯著高于對照組(P<0.01或P<0.05),雞十二指腸銅含量極顯著高于對照組(P<0.01)。日糧添加鋅1 000 mg•kg-1時,空腸銅含量極顯著高于對照組和日糧鋅添加組(鋅添加量分別為:250和500 mg•kg-1,P<0.01)。試驗至42 d,日糧添加鋅500和1 000 mg•kg-1時,雞肝臟銅含量極顯著高于對照組和日糧鋅添加組(鋅添加量為:250 mg•kg-1,P<0.01)。日糧鋅水平與雞肝臟、十二指腸、空腸和腺胃鋅含量呈顯著正相關(P<0.05),與十二指腸、空腸銅含量呈顯著正相關(P<0.05),與肝臟銅含量呈正相關(P>0.05),與十二指腸、腺胃和空腸金屬硫蛋白含量呈正相關(P>0.05)。肝臟金屬硫蛋白含量和銅含量呈極顯著正相關(P<0.01);十二指腸、空腸金屬硫蛋白含量和銅含量呈正相關(P>0.05)。【結論】日糧添加高水平硫酸鋅沒有拮抗雞對納米氧化銅的消化吸收,納米氧化銅在消化道可能是以納米顆粒的形式吸收。
    合生素對肉仔雞腸道微生物區系的影響
    楊會玲, 高玉鵬, 周利勇, 許堯興, 李艷麗, 許少春
    中國農業科學. 2011, 44(23):  4882-4891.  doi:10.3864/j.issn.0578-1752.2011.23.015
    摘要 ( 695 )   PDF (446KB) ( 558 )   收藏
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    【目的】研究合生素對肉仔雞盲腸微生物區系的影響。【方法】選擇1日齡肉仔雞450只,隨機分成5個日糧處理,分別為基礎日糧、基礎日糧+抗生素、基礎日糧+益生素、基礎日糧+益生元、基礎日糧+合生素。每個處理3個重復,每個重復30只。在21和42日齡,每個重復選擇4只屠宰,無菌采集盲腸內容物,提取細菌基因組總DNA,PCR擴增16s rDNA,用DGGE方法分析盲腸細菌群落結構的變化,用實時熒光定量PCR檢測腸道中總菌、乳酸桿菌、雙歧桿菌和大腸桿菌數量。【結果】在21和42日齡,日糧添加合生素比單獨應用益生素、益生元或抗生素提高了肉仔雞的平均日增重和飼料轉化率(P<0.05),肉仔雞盲腸DGGE條帶數(菌群豐富程度)均高于對照組、抗生素組、益生素組、益生元組;基因測序分析發現肉仔雞盲腸中特異條帶主要是不可培養細菌。合生素能促進盲腸總菌數、雙歧桿菌和乳酸桿菌的增殖,抑制大腸桿菌數量。【結論】合生素對肉仔雞促生長的效用與其對盲腸菌群的調控作用有關,且合生素的效果優于益生素、益生元或抗生素。
    外源反-10,順-12共軛亞油酸對體外培養牛乳腺上皮細胞SREBP-1基因表達和蛋白質合成的影響
    王紅芳, 劉紅云, 楊維仁, 劉建新, 楊在賓
    中國農業科學. 2011, 44(23):  4892-4901.  doi:10.3864/j.issn.0578-1752.2011.23.016
    摘要 ( 513 )   PDF (507KB) ( 569 )   收藏
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    【目的】旨在觀察反-10,順-12,共軛亞油酸(t10c12 CLA)對牛乳腺上皮細胞中甾醇調控元件結合蛋白(SREBP-1)基因的表達和蛋白質加工的影響。【方法】本試驗使用組織塊培養法獲得奶牛乳腺上皮細胞,使用不同濃度t10c12 CLA處理乳腺上皮細胞后,用油紅染色法檢測胞質內的脂滴分布,Trizol法提取細胞總RNA,熒光定量PCR法測定相關基因的表達量,試劑盒法提取細胞總蛋白,進行Western blotting。【結果】隨t10c12 CLA添加量的增加,細胞質內甘油三酯的含量逐漸降低。與對照組相比,75、112.5和150 μmol•L-1 t10c12 CLA均對胞質內甘油三酯的積累有顯著抑制作用(P<0.05)。t10c12 CLA 的添加對SREBP-1基因和參與SREBP-1蛋白加工調節基因的表達均無顯著性影響(P>0.05)。根據蛋白質電泳結果推測,t10c12 CLA對SREBP-1前體蛋白的合成并無影響,可能對SREBP-1的加工活化產生抑制作用或對其分解產生促進作用。【結論】t10c12 CLA能抑制胞質內甘油三酯的積累,對SREBP-1基因的表達、蛋白質翻譯均無影響,可能影響其加工活化過程和活性蛋白的降解過程。
    西藏牦牛mtDNA COⅢ全序列測定及系統進化關系
    趙上娟, 陳智華, 姬秋梅, 柴志欣, 張成福, 信金偉, 鐘金城
    中國農業科學. 2011, 44(23):  4902-4910.  doi:10.3864/j.issn.0578-1752.2011.23.017
    摘要 ( 565 )   PDF (469KB) ( 529 )   收藏
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    【目的】探討西藏牦牛的遺傳多樣性和類群間的系統進化關系,為西藏牦牛遺傳資源的合理保護和利用提供理論依據。【方法】對11個西藏牦牛類群111個個體的mtDNA COⅢ的全序列進行測定,用多種生物信息學軟件分析牦牛類群的遺傳多樣性和它們間的親緣關系及分類。【結果】①西藏11個牦牛類群的mtDNA COⅢ全序列長度均為781 bp,基因間沒有內含子,共編碼260個氨基酸,啟始密碼子AUG(ATG),含一個游離堿基。4種核苷酸的平均比例分別為29.2%(T)、29.4%(C)、26.1%(A)和15.2%(G),有一定的偏倚性。②發現西藏牦牛的mtDNA COⅢ共有18種單倍型,11個牦牛類群的單倍型多樣性值在0.378—0.844。表明,西藏牦牛具有較豐富的mtDNA COⅢ遺傳多樣性。③在mtDNA COⅢ的20種氨基酸組成中,亮氨酸平均含量最多,為11.92%,賴氨酸和半胱氨酸平均含量最少,為0.77%。堿性氨基酸、酸性氨基酸、親水性氨基酸和疏水性氨基酸的含量分別為11.15%、4.62%、29.61%和54.61%。④從mtDNA COⅢ來看,西藏11個牦牛類群可分為3大類,即帕里牦牛(PL)系、巴青牦牛(BQ)系、斯布牦牛(SB)系。【結論】西藏牦牛有豐富的遺傳多樣性,可分為3大類;結果支持將牦牛劃分為牛亞科中一個獨立屬(牦牛屬,Poephagus)的觀點。
    中華蜜蜂csd多態性分析
    劉志勇, 王子龍, 王歡, 曾志將
    中國農業科學. 2011, 44(23):  4911-4917.  doi:10.3864/j.issn.0578-1752.2011.23.018
    摘要 ( 656 )   PDF (534KB) ( 503 )   收藏
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    【目的】分析不同地理群體中華蜜蜂(Apis cerana cerana)csd的多態性。【方法】以吉林長白山、海南海口、廣西南寧、湖北神農架和江西靖安5個省市的中蜂工蜂為試驗材料,提取每個工蜂樣品的基因組DNA,對csd 3區進行PCR擴增、克隆和測序,分析csd的多態性。【結果】對中國5個省市的中蜂csd 3區基因組序列進行了克隆測序,獲得32條csd基因單倍型,其中吉林長白山和江西靖安群體csd的多態性顯著高于其它群體,而吉林長白山群體和江西靖安群體之間,廣西南寧群體、海南海口群體和湖北神農架群體之間csd的多態性沒有顯著差異。利用csd進行群體分析表明江西靖安中蜂與吉林長白山中蜂的核苷酸分歧度和遺傳距離均最大,湖北神農架中蜂與廣西南寧中蜂之間核苷酸分歧度和遺傳距離最小。系統進化樹表明來自5個地理群體的單倍型在進化樹上混雜在一起,并沒有按照地理來源分為5支。【結論】中華蜜蜂csd在各個地理群體中均具有很高的多態性,并且多態性水平在群體間有差異。
    獸醫
    豬圓環病毒2型不同基因型毒株感染性克隆的構建及拯救毒株的體外生物學特性
    郭龍軍, 陸月華, 黃立平, 危艷武, 劉長明
    中國農業科學. 2011, 44(23):  4918-4925.  doi:10.3864/j.issn.0578-1752.2011.23.019
    摘要 ( 477 )   PDF (545KB) ( 544 )   收藏
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    【目的】中國豬群中豬圓環病毒2型(PCV2)感染存在不同基因型毒株(PCV2a、PCV2b和PCV2d),有必要闡明不同基因型PCV2毒株的致病性差異。【方法】采用感染性克隆技術構建了不同基因型代表性毒株,對拯救的毒株進行體外生物學特性試驗。【結果】構建了4個不同基因型的PCV2感染性分子克隆,經轉化細胞后拯救4個克隆毒株,經核酸序列分析、病毒形態學觀察、免疫過氧化物酶單層細胞試驗(IPMA)等證實屬于不同基因型的PCV2毒株;拯救的毒株均通過細胞連續傳10代,病毒增殖能力穩定,毒價均可達到105.0TCID50•mL-1;用具有中和病毒活性的單克隆抗體(1D2株)進行抗原捕獲ELISA檢測,拯救的PCV2a/rCL毒株與該單抗產生特異性反應,另3個克隆毒株(PCV2b/rYJ、rJF和PCV2d/rBDH)與該單抗均無反應,表明不同基因型代表毒株抗原性不同。【結論】中國豬群中PCV2流行毒株基因組及ORF2長度存在差異,其病毒抗原特性不同,構建和拯救了4個代表不同基因型PCV2克隆毒株,為進一步研究其致病性差異奠定了基礎。
    鼠李糖乳酸桿菌對Caco-2細胞抗氧化功能的影響
    崔志文, 黃琴, 黃怡, 吳紅照, 文靜, 李衛芬
    中國農業科學. 2011, 44(23):  4926-4932.  doi:10.3864/j.issn.0578-1752.2011.23.020
    摘要 ( 613 )   PDF (309KB) ( 655 )   收藏
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    【目的】研究鼠李糖乳酸桿菌(Lactobacillus rhamnosus)對氧化應激狀態下Caco-2細胞抗氧化功能的影響。【方法】將培養的Caco-2細胞分為4組:對照組和氧化應激組(在培養液中加入100 µmol•L-1 H2O2),處理組Ⅰ和處理組Ⅱ在氧化應激條件下分別添加鼠李糖乳酸桿菌(約108 CFU•mL-1)和抗氧化劑特丁基對苯二酚(TBHQ) (2.75 µg•mL-1)各1 mL。Caco-2細胞培養至12和48 h時分別測定其上清液和裂解液的抗氧化活性。【結果】添加鼠李糖乳酸桿菌減輕了Caco-2細胞氧化受損,使細胞培養上清中的總抗氧化力(T-AOC)顯著高于氧化應激組:12 h時顯著提高了細胞培養上清谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-Px)(P<0.01)、過氧化氫酶(CAT)(P<0.01)活力以及細胞裂解液中超氧化物酶(SOD)活力(P<0.01)和還原型谷胱甘肽(GSH)含量(P<0.05),48 h時顯著提高了細胞培養上清液抗O2- (ASAFR) (P<0.01)、GSH-Px(P<0.01)、CAT(P<0.01)、SOD活力(P<0.01)和細胞裂解液中過氧化物酶(POD)活力(P<0.01),丙二醛(MDA)含量顯著降低(P<0.01)。添加TBHQ組12 h時細胞上清中T-AOC(P<0.01)和CAT活性(P<0.01)及細胞裂解液中GSH含量(P<0.01)顯著高于氧化應激組,而處理48 h后相應指標低于氧化應激組;此時,細胞培養上清液中MDA含量極顯著降低(P<0.01),抗O2-、SOD、GSH-Px、POD活力和細胞裂解液中POD活力顯著升高(P<0.05)。【結論】在體外條件下,鼠李糖乳酸桿菌可以提高氧化應激狀態下Caco-2細胞的抗氧化功能。
    農業經濟與管理
    提高農業科技的自主創新能力
    信乃詮
    中國農業科學. 2011, 44(23):  4933-4938.  doi:10.3864/j.issn.0578-1752.2011.23.021
    摘要 ( 502 )   PDF (241KB) ( 541 )   收藏
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    以科學發展觀為指導,深刻分析農業科技創新面臨的形勢,研究提出“十二五”農業科技的主要任務,深入探討農業科技創新相關的理論問題:即自主創新與引進先進技術、自主創新與知識產權保護、原始創新集成創新和引進消化吸收再創新、自主創新與深化科技體制改革、自主創新與人才隊伍建設、自主創新與科技投入、自主創新與管理體制改革等,努力開創農業科技工作的新局面。
    研究簡報
    利用酵母雙雜交系統篩選感病番茄中蔬四號與無毒蛋白AvrPto、AvrPtoB互作的蛋白
    張月娟, 趙廷昌, 楊玉文
    中國農業科學. 2011, 44(23):  4939-4944.  doi:10.3864/j.issn.0578-1752.2011.23.022
    摘要 ( 527 )   PDF (427KB) ( 730 )   收藏
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    【目的】利用酵母雙雜交系統在感病番茄中蔬四號中篩選分別與AvrPto、AvrPtoB互作的蛋白,研究AvrPto、AvrPtoB作為毒性因子在感病番茄中的作用通路。【方法】提取感病番茄中蔬四號的總RNA,合成中蔬四號cDNA文庫,分別構建AvrPto和AvrPtoB的誘餌載體,從中蔬四號cDNA文庫中篩選分別與AvrPto、AvrPtoB互作的蛋白,并對陽性克隆進行分析和鑒定。【結果】最終篩選到7個與AvrPto互作的蛋白,2個與AvrPtoB互作的蛋白,核酮糖-1,5-二磷酸(RuBP)羧化酶/加氧酶小亞基和AvrPto、AvrPtoB都能夠互作,說明AvrPto、AvrPtoB參與破壞植物的光合作用;另外與AvrPto互作的蛋白質還包括葉綠體原卟啉原氧化酶、葉綠體醛縮酶、葉綠體延伸因子TufA、翻譯延伸因子等參與植物光合作用蛋白。【結論】分析篩選到的蛋白主要是參與植物光合作用的蛋白,推測AvrPto、AvrPtoB通過與植物光合作用有關的蛋白互作,或者影響卡爾文循環,或者影響葉綠素和相關蛋白質的合成,從而破壞植物光合作用,促進侵襲位點葉肉細胞衰老、死亡,進而引起壞死癥狀。
    幾種鈍綏螨ITS基因片段的序列分析
    鄒志文, 陳芬, 夏斌, 吳瑜, 張宇
    中國農業科學. 2011, 44(23):  4945-4951.  doi:10.3864/j.issn.0578-1752.2011.23.023
    摘要 ( 777 )   PDF (531KB) ( 606 )   收藏
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    【目的】通過分析比較鈍綏螨ITS基因片段,探討其作為分子手段應用于種類鑒定,同時應用此分子標記來分析鈍綏螨的親緣關系,為研究其系統發育和完善分類系統提供參考。【方法】對采自江西桔園的尼氏真綏螨、江原鈍綏螨、津川鈍綏螨和東方鈍綏螨進行總DNA提取,PCR擴增,測序,并從GenBank中下載5種鈍綏螨的ITS序列,應用軟件分析ITS片段長度、A+T%含量、變異位點和進化關系。【結果】得到總長度為644—655 bp的ITS序列片段,序列中A+T堿基比例較高,為58.2%。整個ITS基因片段存在204個堿基變異位點(ITS1:172;ITS2:22;5.8S:10)和32個堿基插入/缺失。真綏螨屬的尼氏真綏螨和卵圓真綏螨的分類地位較近,遺傳距離為0.013;而小新綏螨屬的4個種與鈍綏螨屬的3個種在構建系統發育樹時未能明顯地分為2支,其中胡瓜新小綏螨和東方鈍綏螨的遺傳距離最近,為0.083。【結論】ITS序列片段分析結果支持尼氏真綏螨和卵圓真綏螨現在的分類地位,而小新綏螨屬與鈍綏螨屬似乎未達到屬間差異,其分類地位有待進一步確定。
    超表達番茄GDP-D-甘露糖焦磷酸化酶基因馬鈴薯對溫度脅迫的響應
    李超漢, 李青竹, 史慶華, 白龍強, 郭曉青, 李霞, 于賢昌
    中國農業科學. 2011, 44(23):  4952-4961.  doi:10.3864/j.issn.0578-1752.2011.23.024
    摘要 ( 554 )   PDF (540KB) ( 573 )   收藏
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    【目的】研究番茄GDP-甘露糖焦磷酸化酶基因(GMPase)在馬鈴薯中的超表達對其抵御溫度脅迫能力的影響。【方法】利用已經獲得的超表達番茄GMPase的兩個轉基因馬鈴薯株系,用野生型馬鈴薯作對照,比較其在常溫(25/20℃)、溫度脅迫(10/5℃低溫處理3 d,35/30℃高溫處理3 d)及25/20℃恢復3 d后GMPase的相對表達量、抗壞血酸(AsA)含量及其相關生理指標的變化。【結果】在常溫、溫度脅迫與恢復階段,與野生型植株相比,轉基因馬鈴薯植株具有較高的GMPase相對表達量、GMPase活性、AsA和脫氫抗壞血酸(DHA)含量;高溫和低溫脅迫后,轉基因馬鈴薯的脫氫抗壞血酸還原酶(DHAR)、單脫氫抗壞血酸還原酶(MDAHR)和抗壞血酸過氧化物酶(APX)活性均明顯提高,丙二醛(MDA)和H2O2含量及細胞質膜透性均明顯降低。【結論】番茄GMPase在馬鈴薯中的超表達可能有提高馬鈴薯植株抵御溫度脅迫的能力。
    農戶測土配方施肥技術采納行為研究——基于山東省棗莊市薛城區農戶調研數據
    韓洪云, 楊增旭
    中國農業科學. 2011, 44(23):  4962-4970.  doi:10.3864/j.issn.0578-1752.2011.23.025
    摘要 ( 851 )   PDF (295KB) ( 657 )   收藏
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    【目的】研究農戶逐步采納測土配方施肥技術行為的技術效果及其影響因素。【方法】利用實地調研數據,采用T檢驗和Bivariate Probit計量模型進行實證研究。【結果】樣本地區農戶“未采納”、“部分采納”和“完全采納”測土配方施肥技術行為在技術效果上存在顯著差異。地塊特征、技術指導對農戶“部分采納”測土配方施肥技術的行為呈顯著正相關;農戶的年齡對農戶“完全采納”該技術呈顯著負相關;而農業收入比重、農戶的耕地面積、施肥觀念、技術理解能力、技術指導、技術獲得對農戶“完全采納”該技術的行為呈顯著正相關。【結論】農戶采納測土配方施肥技術具有顯著的增收效應。農戶耕地采用平均分地的分配方式、與農技人員聯系不方便會導致農戶“未采納”測土配方施肥技術;而農戶的年齡偏高、農業收入比重相對較低、耕地面積相對較小、具有傳統施肥觀念、未能全面理解測土配方施肥技術和缺失配方卡是農戶“部分采納”該技術的重要原因。
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