Please wait a minute...
廣告服務

當期目錄

    2013年 第46卷 第16期 刊出日期:2013-08-15
      
    作物遺傳育種·種質資源·分子遺傳學
    基于QTL定位分析策略的一般配合力遺傳基礎研究
    胡文明, 徐揚, 張恩盈, 徐辰武
    中國農業科學. 2013, 46(16):  3305-3313.  doi:10.3864/j.issn.0578-1752.2013.16.001
    摘要 ( 375 )   PDF (610KB) ( 687 )   收藏
    參考文獻 | 相關文章 | 多維度評價
    【目的】一般配合力(GCA)是評價親本利用價值的重要指標。研究GCA的遺傳基礎及GCA相關QTL(QTLGCA)定位的可行性,為雜交育種提供技術參考。【方法】以雙親雜交衍生的重組自交系(RIL)為被測系、若干個隨機選擇的純系為測驗系的NCII交配設計以及QTL定位策略,系統研究GCA的遺傳組成、影響QTLGCA定位的因素以及QTLGCA與性狀本身QTL之間的關系。【結果】若性狀受1對等位基因控制,RIL的GCA以及QTLGCA定位均與控制性狀本身基因位點的加性效應、顯性效應以及測驗系等位基因的頻率有關;若性狀受2對加/顯性的等位基因控制,則GCA估計及QTLGCA定位均與基因間是否連鎖無關,其影響因素與性狀受一個基因控制時相同;若性狀受2對互作基因控制,GCA及QTLGCA定位均與測驗系等位基因頻率和性狀本身QTL的主效應以及基因間互作效應有關,此外,GCA效應估計還與基因間是否連鎖有關。【結論】無論是GCA效應估計還是QTLGCA定位,測驗系等位基因頻率和性狀本身QTL效應大小都是重要的影響因素。此外,QTLGCA與性狀本身QTL的差異還取決于性狀的遺傳結構以及QTL定位方法的選擇。
    植物基因組上游開放閱讀框的挖掘方法及其翻譯調控
    王庭璋, 胡望雄, 徐建紅, 薛慶中
    中國農業科學. 2013, 46(16):  3314-3323.  doi:10.3864/j.issn.0578-1752.2013.16.002
    摘要 ( 316 )   PDF (656KB) ( 995 )   收藏
    參考文獻 | 相關文章 | 多維度評價
    基因組中約有20%的基因具有上游開放閱讀框(upstream open reading frame,uORF),它位于成熟mRNA 5'端非編碼區(5'-UTR)。本文簡介了uORF同源群的挖掘方法、分類和進化,以及調控下游mORF翻譯的研究進展。植物(擬南芥和水稻等)和昆蟲(果蠅等)基因組中普遍存在保守肽uORFs,并且在序列多樣性方面有相似之處。但它們在平均長度、基因組聚類、與甲基轉移酶的關聯性上有所不同。植物uORF的長度通常短于昆蟲uORF。借助擬南芥和水稻全長cDNA序列比較,不同的uORF同源群對其下游如轉錄因子,信號轉導因子、發育信號分子和翻譯起始因子eIF5等編碼基因的mORF具有調控功能。對于真核生物基因組中包含CHCH域的uORF進行貝葉斯系統發育分析,結果表明,同源群8-like分屬5個物種(綠藻、節肢動物、線蟲、無脊椎動物和真菌)。在真核生物生長、發育和生理過程中,uORF通常作為反式因子對mORF表達起調節器作用,例如,在植物蔗糖、多胺、磷脂酰膽堿,以及甲基轉移酶反應中,相當大比例的uORF參與介導mORF的翻譯調控。
    耕作栽培·生理生化·農業信息技術
    農用生物炭研究進展與前景
    陳溫福, 張偉明, 孟軍
    中國農業科學. 2013, 46(16):  3324-3333.  doi:10.3864/j.issn.0578-1752.2013.16.003
    摘要 ( 533 )   PDF (610KB) ( 2240 )   收藏
    參考文獻 | 相關文章 | 多維度評價
    生物炭以其良好的解剖結構和理化性質,廣泛的材料來源和廣闊的產業化發展前景,成為當今農業、能源與環境等領域的研究熱點。本文綜合分析、評述了生物炭在土壤、作物、農田生態系統等領域應用的主要研究進展及其未來保障中國糧食安全的重要意義,從低碳、循環、可持續視角,客觀、辯證地探討了生物炭在農業上的應用價值及其產業化發展前景。生物炭在修復土壤障礙,提升耕地生產性能和作物生產能力,促進農業可持續發展和保障國家糧食安全等方面具有重要現實意義和應用價值,本文結合中國國情,提出了進一步深入研究與開發生物炭產業的方向與建議,旨在為中國生物炭產業的健康發展提供參考。
    區域氣候模型數據修訂方法及其在作物模擬中的應用
    呂尊富, 劉小軍, 湯亮, 劉蕾蕾, 曹衛星, 朱艷
    中國農業科學. 2013, 46(16):  3334-3343.  doi:10.3864/j.issn.0578-1752.2013.16.004
    摘要 ( 302 )   PDF (793KB) ( 513 )   收藏
    參考文獻 | 相關文章 | 多維度評價
    【目的】建立一種修訂區域氣候模型所生成數據的方法,為作物模型在未來氣候情景下的應用研究提供技術支持。【方法】 選取徐州、淮安、鄭州、濰坊、石家莊5個生態點,利用各地點1960—1993年的歷史氣象數據,對區域氣候模型RegCM3所生成的1994—2010年降雨頻率、逐日降雨量、太陽輻射、最高氣溫、最低氣溫等氣象要素進行修訂。【結果】與修訂前的RegCM3數據相比,修訂后的RegCM3月平均降雨量、溫度、太陽輻射等氣象要素與實際觀測數據更加一致;修訂后5個生態點1994—2010年的逐月降雨量、溫度、太陽輻射等氣象要素參數以及逐日降雨量、溫度、太陽輻射等數據的概率分布,與實際觀測數據更加吻合,尤其是RegCM3生成數據中的極端高溫和高頻率降水得到了較好的修正,反映降雨頻率的連續干旱天數與實測數據也更趨一致。基于修訂后RegCM3逐日氣象數據在5個生態點的WheatGrow模型模擬產量與實測產量之間的決定系數和標準根均方差分別達0.72和10.5%,比修訂前分別增加了0.35、降低8.2%左右。【結論】采用本研究所構建的方法來修訂RegCM3生成的未來氣象數據,并將修訂后的氣象數據輸入作物模型,可以提高未來情景下作物模型預測的可靠性。
    植物保護
    稻曲病菌突變體B-726生物學性狀分析及其T-DNA插入位點側翼序列的克隆
    黃磊, 俞咪娜, 胡建坤, 于俊杰, 尹小樂, 聶亞鋒, 陳志誼, 劉永鋒
    中國農業科學. 2013, 46(16):  3344-3353.  doi:10.3864/j.issn.0578-1752.2013.16.005
    摘要 ( 321 )   PDF (756KB) ( 1008 )   收藏
    參考文獻 | 相關文章 | 多維度評價
    【目的】分析稻曲病菌T-DNA插入突變體庫中致病力減弱突變菌株B-726的生物學性狀,分析其T-DNA插入位點的側翼序列,克隆因外源基因插入被破壞正常表達的基因,為明確該基因在稻曲病菌致病過程中的作用奠定基礎,并為稻曲病防治新途徑的制定提供理論依據。【方法】通過測定突變菌株B-726生長速率、產孢能力及致病力檢測,分析其生物學性狀;Southern雜交分析B-726外源基因插入的拷貝數;利用HiTail-PCR 獲得T-DNA插入位點的側翼序列;運用RACE-PCR技術,克隆與插入位點毗鄰的基因全長;用半定量RT-PCR分析該基因表達情況。【結果】突變菌株B-726與野生菌株P1相比致病力極顯著下降,產孢能力、生長速率顯著下降。Southern雜交結果顯示T-DNA在菌株B-726中以單拷貝形式插入。經過序列分析發現,T-DNA插入在1個命名為Uvt-726上游344 bp處,半定量PCR結果表明,Uvt-726在B-726表達量較P1顯著下降。【結論】克隆了1個可能與稻曲病菌致病力相關的基因,推斷該基因在稻曲病菌致病過程中起著重要的作用。
    68個主推小麥品種的白粉病抗性分析及基因推導
    楊立軍, 曾凡松, 龔雙軍, 史文琦, 張學江, 汪華, 向禮波, 喻大昭
    中國農業科學. 2013, 46(16):  3354-3368.  doi:10.3864/j.issn.0578-1752.2013.16.006
    摘要 ( 310 )   PDF (818KB) ( 631 )   收藏
    參考文獻 | 相關文章 | 多維度評價
    【目的】對中國68個主推小麥品種進行抗白粉病分析和基因推導,為白粉病流行預警和防治提供依據。【方法】2011年春季在西南、西北、長江中下游、華北、黃淮和新疆麥區等12個省(自治區)采集1 094個單孢子堆白粉病菌株,并用每個菌株分別接種68個品種離體葉段進行抗感性測定;應用NTSYSpc2.10e軟件對表型抗感性數據進行UPGAMA(unweighted pair group arithmetic mean analysis)聚類分析;用實驗室長期收集保存的31個毒譜不同的菌株作為鑒別菌株對30個含已知抗白粉病基因材料和68個主推品種的離體葉段進行接種,比較68個品種和單基因材料對31個鑒別菌株的抗性譜,從而推導68個主推品種所含的抗白粉病基因。【結果】抗性測定結果表明,品種間抗譜存在明顯差異。內麥8號、內麥9號和綿麥37抗譜寬,對各省菌群的抗性頻率均大于99%;濟麥22、揚麥11、揚麥12、揚麥13和輪選987等5個品種抗性頻率在70%—90%;有54個品種的抗性頻率小于40%,占供試品種總數的79.4%,表明大部分主推品種的抗性已被克服。某品種對該品種推廣種植區域菌群的抗性頻率低于對其它非種植區域菌群的抗性頻率。聚類分析可將68個品種分成4大類,第I類包括6個品種,其中5個品種抗性頻率在40%—70%;第II類包括7個品種,抗性頻率均大于70%;第III類包括54個品種,抗性頻率均小于40%;第IV類包括1個品種,抗性頻率為46.1%;聚類顯示來自于同一省的品種、抗性頻率相近的品種具有相似或相近的抗性遺傳背景。基因推導表明,內麥8號、內麥9號含有Pm21,偃展4110、新麥208和揚麥11均含有Pm4b;濟麥22含有Pm2+ta;其余品種含有其它未知抗白粉病因子。【結論】當前中國主推小麥品種中近80%的品種對全國白粉病菌群的抗性頻率不高,特別是就單個品種而言,對該品種種植區的白粉菌群抗性頻率更低,存在小麥白粉病在條件適合時暴發流行的風險,必須加強病害預警。同省品種的抗性頻率聚類大多聚到同一組,說明同省品種的抗源異質性不高,中國小麥白粉病育種應該引進更豐富抗源。
    單端孢酶烯3-O-乙酰轉移酶編碼基因Tri101的 原核表達及多克隆抗體制備
    董飛, 祭芳, 吳季榮, 殷憲超, 徐劍宏, 史建榮
    中國農業科學. 2013, 46(16):  3369-3376.  doi:10.3864/j.issn.0578-1752.2013.16.007
    摘要 ( 292 )   PDF (639KB) ( 570 )   收藏
    參考文獻 | 相關文章 | 多維度評價
    【目的】克隆Tri101并通過原核表達獲得純化蛋白,通過免疫SPF大白兔獲得高效價、高靈敏度的多克隆抗體,為Tri101蛋白及轉Tri101作物的檢測提供抗體基礎。【方法】以禾谷鐮刀菌(Fusarium graminearium)F3210為材料,PCR法獲得Tri101并連接至表達載體pET29a(+),將重組表達載體轉化大腸桿菌BL21(DE3)后利用IPTG進行誘導表達。利用純化表達產物制備多克隆抗體。【結果】SDS-PAGE分析結果表明,Tri101在大腸桿菌BL21(DE3)中得到表達,重組蛋白大小為50 kD左右,以包涵體形式存在。利用HisTrap親和柱純化重組蛋白,最佳咪唑洗脫濃度為200 mmol•L-1。采用煙草蝕紋病毒蛋白酶切除重組蛋白中的His標簽,酶切產物經HisTrap親和柱再次純化后免疫SPF大白兔,制備多克隆抗體。經ELISA法檢測抗體效價為1﹕12 000,檢測靈敏度為0.05×10-6 µg•mL-1。Western blotting結果證明制備的多克隆抗體對Tri101具有較好的專一性。【結論】通過Tri101的克隆及原核表達,獲得了純化的融合蛋白,通過免疫動物制備了兔源多克隆抗體,可用于Tri101蛋白及轉Tri101小麥的檢測。
    河北邢臺和江蘇南京地區棉蚜對丁硫克百威和吡蟲啉的抗性
    王娜, 郎志飛, 賀康, 李飛
    中國農業科學. 2013, 46(16):  3377-3383.  doi:10.3864/j.issn.0578-1752.2013.16.008
    摘要 ( 320 )   PDF (581KB) ( 613 )   收藏
    參考文獻 | 相關文章 | 多維度評價
    【目的】對河北邢臺和江蘇南京地區棉蚜(Aphis gossypii Glover)進行抗性監測,了解棉蚜對丁硫克百威和吡蟲啉的抗性發展情況,為抗性治理提供理論依據。【方法】以用藥水平最低的新疆南疆種群作為相對敏感種群,通過室內毒力測定、離體酶活力測定、相對表達量分析,研究新疆南疆、河北邢臺及江蘇南京3個地區棉蚜對丁硫克百威和吡蟲啉潛在的代謝抗性機制。【結果】河北邢臺和江蘇南京地區的棉蚜對丁硫克百威仍處于敏感階段;但對吡蟲啉的抗性已有所發展,抗性水平分別為4.87和8.72倍,為低水平抗性階段。解毒代謝酶活力對比研究發現,3個地區田間種群之間多功能氧化酶、酯酶及谷胱甘肽轉移酶的活力均存在顯著差異,江蘇南京種群的酯酶活力顯著高于新疆南疆種群。定量PCR分析表明,河北邢臺地區棉蚜的羧酸酯酶表達量較高,是新疆種群棉蚜的3.28倍。【結論】田間棉蚜已對吡蟲啉產生了低水平的抗性,酯酶活力升高在棉蚜對吡蟲啉低水平抗性形成中發揮作用。
    南方根結線蟲乳酸脫氫酶基因克隆及其沉默效應分析
    梅眉, 黃永紅, 茆振川, 劉志敏, 謝丙炎
    中國農業科學. 2013, 46(16):  3384-3391.  doi:10.3864/j.issn.0578-1752.2013.16.009
    摘要 ( 251 )   PDF (890KB) ( 577 )   收藏
    參考文獻 | 相關文章 | 多維度評價
    【目的】對南方根結線蟲乳酸脫氫酶基因(mildh)進行克隆分析,并探索mildh沉默對南方根結線蟲(Meloidogyne incognita)病害的抑制作用。【方法】在前期研究中,利用生物信息學方法在線蟲全基因組中預測了一些線蟲RNA干擾(RNAi)表型基因。本研究以預測的線蟲ldh設計特異引物克隆南方根結線蟲中mildh。對克隆到的mildh序列進行了特征分析后,利用病毒誘導的基因沉默(VIGS)技術,將其導入番茄植株,并接種南方根結線蟲,研究mildh基因沉默對根結線蟲根結數量影響。【結果】克隆到的mildh包含1個完整的編碼框序列,編碼315個氨基酸。該基因與預測到的mildh核苷酸序列一致性高達94.9%,所編碼的氨基酸一致性高達95.5%。構建煙草脆裂病毒(Tobacco rattle virus,TRV)介導的沉默載體pTV-mildhi,并用該沉默載體對番茄植株進行處理后,接種南方根結線蟲。60 d后統計發現,pTV-mildhi處理的番茄植株上根結數分別比空載體對照減少48.6%,比清水對照降低48.4%。【結論】mildh基因沉默對南方根結線蟲具有顯著的抑制作用,也說明mildh可能參與根結線蟲的致病性,該研究對線蟲的病理學研究及線蟲病害防控研究提供了新的理論基礎。
    土壤肥料·節水灌溉·農業生態環境
    長期施肥對中性紫色水稻土氮素礦化和硝化作用的影響
    秦子嫻12, 張宇亭12, 周志峰12, 石孝均12, 郭濤12
    中國農業科學. 2013, 46(16):  3392-3400.  doi:10.3864/j.issn.0578-1752.2013.16.010
    摘要 ( 371 )   PDF (622KB) ( 545 )   收藏
    參考文獻 | 相關文章 | 多維度評價
    【目的】揭示長期施肥對中性紫色水稻土生態系統氮素內循環礦化及硝化特征的影響,探索維持紫色水稻土長期供氮潛力的途徑。【方法】利用重慶市北碚區21年的中性紫色水稻土長期定位試驗,通過淹水密閉培養-間歇淋洗法研究長期施肥對土壤氮素礦化特性的影響,并測定了不同施肥措施下土壤硝化細菌數量、氨氧化潛勢及硝化強度的變化。【結果】與長期不施肥對照相比,單施化肥(除單施氮肥)、有機肥或有機無機配施顯著提高了土壤累積礦化氮量和氮素礦化勢(N0),氮磷鉀肥配施有機肥處理累積礦化氮量最高達164.43 mg•kg-1,氮素礦化勢相比CK處理增加了59.29%,而含氯氮磷鉀肥配施有機肥增加累積礦化氮量和氮素礦化勢幅度顯著低于氮磷鉀肥配施有機肥處理;不同施肥(除氮磷鉀肥與單施有機肥)顯著提高了氮素礦化速率常數(k)。施用氮肥處理顯著提高了土壤硝化細菌數量,尤其是氮磷鉀肥配施有機肥處理最高為CK處理的74.25倍;土壤氨氧化潛勢和硝化強度表現出一致的趨勢,均是氮磷鉀肥配施有機肥處理最高而含氯氮磷鉀肥配施有機肥顯著低于不施肥對照處理。相關分析表明,土壤氨氧化潛勢和硝化強度與土壤pH呈顯著正相關關系(P<0.05)。【結論】氮磷鉀肥配施有機肥是提高紫色水稻土供氮潛力及改善有機氮品質的有效手段,含氯化肥抑制了硝化過程,可充當硝化抑制劑使用。
    深旋松耕作法對華北缺水區壤質黏潮土物理性狀及作物生長的影響
    楊雪1, 逄煥成1, 李軼冰1, 任天志1, 董國豪2, 郭智慧2, 王湘峻2
    中國農業科學. 2013, 46(16):  3401-3412.  doi:10.3864/j.issn.0578-1752.2013.16.011
    摘要 ( 293 )   PDF (600KB) ( 557 )   收藏
    參考文獻 | 相關文章 | 多維度評價
    【目的】針對華北高產農區連年旋耕導致耕層變淺、犁底層變厚變硬、耕層生產能力下降的問題,探討深旋松耕作法在華北地區作物生產上的可行性。【方法】在河北吳橋地區設置了4種耕作處理,即傳統旋耕15 cm、間隔深松耕30 cm、深旋松耕30 cm、深旋松耕50 cm,研究大田條件下不同耕作方法對土壤性質與作物產量的影響。【結果】(1)不同耕作處理對土壤蓄水量的影響較大,深旋松耕處理表現出利于降水入滲、儲蓄更多水分的優勢,并且越是干旱的時段,表現越突出。在冬小麥返青期深旋松耕處理土壤蓄水量均極顯著高于旋耕處理和間隔深松處理,其中深旋松耕50 cm處理的0—50 cm土層土壤蓄水量分別比旋耕處理和間隔深松處理增加11.69 mm和10.56 mm,提高12.21%和10.90%。(2)不同耕作方法對土壤容重影響很大,耕作一年半之后,深旋松耕兩個處理在0—30 cm土層容重顯著低于深松和旋耕兩個處理,其中深旋松耕30 cm在20—30 cm土層容重分別比深松和旋耕低了13.67%和13.99%,深旋松耕50 cm在20—30 cm土層分別比深松和旋耕低了14.20%和14.51%,30—50 cm土層深旋松耕50 cm土層依然顯著低于其他處理,其中,40—50 cm土層分別比深松和旋耕低了22.66%和22.80%,深松處理在冬小麥播前略低于旋耕處理,之后的時期則與旋耕處理間幾乎沒有差異。(3)耕作方式的不同對土壤性質有影響,并進而影響作物群體LAI、干物質積累和灌漿速率以及產量的形成,對冬小麥季影響最為顯著,其中冬小麥花期深旋松耕50 cm處理的群體LAI分別比旋耕處理和間隔深松處理提高51.98%和39.22%,干物質積累量分別比旋耕和間隔深松處理提高26.78%和16.92%,冬小麥灌漿30 d時深旋松耕50 cm分別比深松和旋耕的籽粒干重提高10.37%和11.40%。(4)所有耕作處理中,深旋松耕土壤耕作處理的作物產量顯著高于深松耕作和旋耕耕作,其中耕作一年半后夏玉米季深旋松耕50 cm處理產量達到了13 822.68 kg•hm-2,深旋松耕30 cm處理產量也達到了13 127.87 kg•hm-2,均顯著高于旋耕處理,對比旋耕處理分別增產38.19%、31.24%。【結論】考慮生態經濟等因素的綜合考慮,深旋松耕30 cm處理為最適合華北缺水區的耕作方法。
    園藝
    應用抑制性差減雜交技術篩選錦橙CTV應答基因
    程春振12, 曾繼吾2, 貝學軍12, 吳波12, 陽佳位3, 張永艷12, 姜波2, 朱世平1, 閆樹堂1, 鐘云2, 鐘廣炎2
    中國農業科學. 2013, 46(16):  3413-3423.  doi:10.3864/j.issn.0578-1752.2013.16.012
    摘要 ( 277 )   PDF (704KB) ( 686 )   收藏
    參考文獻 | 相關文章 | 多維度評價
    【目的】探討易感柑橘衰退病病毒(Citrus tristeza virus,CTV)品種錦橙CTV應答分子機理,篩選和分析CTV應答基因。【方法】以嫁接CTV強毒株TRL514的錦橙陽性材料葉片為試驗方(Tester),用嫁接無毒枝條的CTV陰性錦橙葉片為驅動方(Driver),構建CTV侵染的錦橙的正向差減文庫。【結果】隨機挑選850個陽性克隆測序,其中742條測序成功,去除載體片段和接頭序列后得到有效EST 692條。將所有EST序列對應到柑橘的預測基因組轉錄物,共涉及137個柑橘基因。應用BLAST2GO對這些特異性表達的基因進行功能歸類和KEGG分析。結果表明,受CTV侵染的影響,錦橙能量代謝相關基因上調明顯,與光合器官碳固定、氮代謝、淀粉和蔗糖代謝等途徑相關的EST出現頻率較高。另外,與抗逆防御以及苯基丙氨酸合成、類苯基丙烷代謝、類胡蘿卜素合成等與植物防御素類物質合成密切相關的代謝途徑相關基因較多。【結論】由于CTV的侵染,CTV易感品種錦橙基礎代謝改變明顯,須通過增強能量代謝和提高自身防御能力來維持自身生長和發育。
    貯藏·保鮮·加工
    殼聚糖處理對‘早紅考密斯’梨虎皮病抑制和貯藏品質的影響
    王寶剛, 侯玉茹, 李文生, 楊軍軍, 石磊, 楊媛, 馮曉元
    中國農業科學. 2013, 46(16):  3424-3431.  doi:10.3864/j.issn.0578-1752.2013.16.013
    摘要 ( 322 )   PDF (728KB) ( 466 )   收藏
    參考文獻 | 相關文章 | 多維度評價
    【目的】探索西洋梨貯藏過程中虎皮病的控制方法及發病規律。【方法】以‘早紅考密斯’梨為試材,研究水溶性和酸溶性殼聚糖處理對‘早紅考密斯’梨低溫(0±0.5)℃貯藏期間虎皮病的抑制效果以及品質的影響。【結果】虎皮病的發生會導致‘早紅考密斯’梨果皮細胞質壁分離、死亡,形成褐色或黑色病斑。在貯藏第120天時,1.0% 酸溶性殼聚糖和1.0% 水溶性殼聚糖處理的果實虎皮病發生率分別比對照低63.89%和44.44%。酸溶性和水溶性殼聚糖處理均降低了梨果皮中α-法尼烯的生成及氧化產物共軛三烯的積累,降低了膜脂過氧化作用。同時,還降低了梨果實呼吸強度水平,促進了還原糖的積累,抑制了貯藏前期可滴定酸的下降。【結論】采后殼聚糖處理能夠有效地抑制貯藏期間‘早紅考密斯’梨虎皮病的發生,并且酸溶性殼聚糖處理抑制虎皮病效果優于水溶性殼聚糖。殼聚糖處理可以作為一種有效而方便的方法用于生產上‘早紅考密斯’梨虎皮病的防治。
    固體進樣元素分析技術在農產品質量安全中的應用
    毛雪飛1, 劉霽欣2, 王敏1, 錢永忠1
    中國農業科學. 2013, 46(16):  3432-3443.  doi:10.3864/j.issn.0578-1752.2013.16.014
    摘要 ( 349 )   PDF (690KB) ( 759 )   收藏
    參考文獻 | 相關文章 | 多維度評價
    固體進樣分析技術無需消解處理,可有效降低方法檢出限(直接固體進樣)、簡化前處理、避免痕量元素損失,更加環保和安全,是農產品元素檢測技術的重要分支,在現場、快速檢測領域具有廣闊的發展前景。本文簡要概述了固體進樣分析技術配套的樣品制備和進樣方式、樣品導入和分析技術的研究現狀,對樣品均勻性和基體干擾等瓶頸問題進行了探討;重點對直接固體進樣和懸浮液進樣方式,以及電熱蒸發、激光燒蝕、樣品直接插入、中子活化、X熒光等技術在農產品重金屬和其它元素檢測中的應用進行了綜述。
    畜牧·獸醫·資源昆蟲
    42—62日齡康貝爾麻鴨蛋氨酸和賴氨酸的需要量
    葉慧, 鄔愛姬, 鄧遠帆, 王文策, 楊琳
    中國農業科學. 2013, 46(16):  3444-3451.  doi:10.3864/j.issn.0578-1752.2013.16.015
    摘要 ( 306 )   PDF (558KB) ( 432 )   收藏
    參考文獻 | 相關文章 | 多維度評價
    【目的】研究飼糧蛋氨酸和賴氨酸添加水平對康貝爾麻鴨生產性能、屠宰性能、抗氧化功能等的影響,探討42—62日齡康貝爾麻鴨的蛋氨酸與賴氨酸需要量。【方法】選用42日齡健康的康貝爾麻鴨936只,根據體重隨機分成9組,每組4個重復,每個重復26只鴨。試驗為蛋氨酸與賴氨酸3×3處理設計,蛋氨酸水平分別為0.28%、0.38%、0.48%,賴氨酸水平分別為0.58%、0.73%、0.88%。試驗周期為21 d。【結果】飼糧蛋氨酸與賴氨酸交叉作用對麻鴨生產性能無顯著影響(P>0.05);飼糧蛋氨酸與賴氨酸交叉作用對麻鴨屠宰率影響顯著(P<0.05);飼糧中蛋氨酸與賴氨酸水平的變化對麻鴨肝臟SOD活力和GSH-Px活力有顯著影響(P<0.05),其中以蛋氨酸水平為0.38%,賴氨酸水平為0.88%組效果最好,但對MDA含量無顯著影響(P>0.05)。【結論】在飼糧蛋氨酸水平為0.28%—0.48%、賴氨酸水平為0.58%—0.88%范圍內42—62日齡康貝爾麻鴨生產性能不受該兩種限制性氨基酸影響,但飼糧中適宜蛋氨酸和賴氨酸的比例可改善肉鴨屠宰性能,提高機體抗氧化功能;在飼糧代謝能水平為11.49 MJ•kg-1且粗蛋白質水平為16.44%時,42—62日齡康貝爾麻鴨飼糧蛋氨酸推薦總量為0.38%,賴氨酸推薦總量為0.73%。
    黑色素細胞中過量表達miR-137對TYRP-1和TYRP-2的影響
    馬淑慧, 薛霖莉, 徐剛, 侯亞琴, 耿建軍, 曹靖, 赫曉燕, 王海東, 董常生
    中國農業科學. 2013, 46(16):  3452-3459.  doi:10.3864/j.issn.0578-1752.2013.16.016
    摘要 ( 380 )   PDF (683KB) ( 616 )   收藏
    參考文獻 | 相關文章 | 多維度評價
    【目的】證明miR-137通過調控MITF而間接影響小鼠黑色素細胞TYRP-1和TYRP-2的表達,從而影響黑色素的生成。【方法】通過細胞轉染技術在細胞水平過量表達miR-137,對黑色素細胞中黑色素含量進行了測定,經RT-PCR以及western blot檢測轉染后細胞TYRP-1和TYRP-2在mRNA和蛋白水平的變化。【結果】黑色素含量明顯減少,在mRNA水平,TYRP1顯著降低至0.4倍,TYRP-2顯著降低至0.6倍。在蛋白水平,TYRP-1顯著降低至0.61倍,TYRP-2顯著降低至0.73倍。【結論】過量表達miR-137會通過調控MITF而使黑色素細胞TYRP-1和TYRP-2的表達量降低,從而揭示了miR-137通過調節TYRP-1和TYRP-2的表達間接調控了黑色素的生成。
    牛布魯氏菌毒力基因Virb8間接ELISA檢測方法的建立與應用
    張劍, 馬衛明, 張亮, 何洪彬, 丁家波, 楊宏軍
    中國農業科學. 2013, 46(16):  3460-3469.  doi:10.3864/j.issn.0578-1752.2013.16.017
    摘要 ( 310 )   PDF (702KB) ( 444 )   收藏
    參考文獻 | 相關文章 | 多維度評價
    【目的】布魯氏菌virb8蛋白是布魯氏菌的重要毒力因子,本研究擬構建含布魯氏菌Virb8基因的原核表達載體,利用純化蛋白作為包被抗原,建立檢測牛布魯氏菌血清抗體的間接ELISA方法(iELISA)。【方法】根據GenBank中的牛型布魯氏桿菌Virb8序列,設計一對引物,以布魯氏菌疫苗株S2全基因組DNA為模板擴增Virb8的基因,將目的基因克隆入PEASY-T3,經測序正確后,與載體pET-32a(+)連接,構建重組表達質粒pET-32a-Virb8,轉化E.coli BL21(DE3),誘導表達融合蛋白pET-32a-Virb8,經SDS-PAGE及Western-blot分析鑒定后,采用Ni-NTA Spin Kit純化目的蛋白,利用所建立的iELISA方法對235個臨床奶牛血清樣本進行檢測,并與虎紅平板凝集實驗進行比較。【結果】成功構建了含Virb8的表達載體,經多次對表達條件的優化,大量表達了目的蛋白,建立的iELISA方法具有穩定、靈敏的特點,與虎紅平板凝集試驗的符合率可達97.02%。【結論】所建立的iELISA方法是一種有效的牛布魯氏菌病血清學診斷的方法,為進一步研究其免疫原性和抗感染保護作用奠定了基礎。
    諾氟沙星ELISA試劑盒研制與性能鑒定
    邢廣旭12, 王國棟3, 胡驍飛2, 王方雨2, 鄧瑞廣2, 張改平2
    中國農業科學. 2013, 46(16):  3470-3477.  doi:10.3864/j.issn.0578-1752.2013.16.018
    摘要 ( 356 )   PDF (547KB) ( 554 )   收藏
    參考文獻 | 相關文章 | 多維度評價
    【目的】建立諾氟沙星(norfloxacin,Nor)免疫檢測試劑盒。【方法】基于所制備的諾氟沙星單克隆抗體,通過矩陣法篩選最佳抗體工作濃度和二抗工作濃度,建立諾氟沙星間接競爭ELISA試劑盒(Nor-kit),并對其性能進行了鑒定和確證。【結果】Nor-kit的平均IC50 為5.18 μg•L-1,靈敏度為0.31 μg•L-1,檢測限為1.00 μg•L-1。試劑盒除了和諾氟沙星反應外,還和同系物中的培氟沙星、氧氟沙星、環丙沙星、洛美沙星及惡喹酸有不同程度的交叉反應。奶樣中回收率平均為103.23%,變異系數(CV)為9.33%。3個不同批次試劑盒的測定結果中,批內變異系數小于10%,且批間變異系數也小于10%;在4℃保存條件下,試劑盒可以保存6個月而質量不變。奶樣添加回收試驗,試劑盒與LC-MS/MS測定結果沒有顯著差異(P≥0.05);而且檢測實際生產中鮮奶樣時,試劑盒與LC-MS/MS測定結果也無顯著差異(P≥0.05)。【結論】本研究成功研制出靈敏、特異、簡便的諾氟沙星殘留檢測ELISA試劑盒。
    研究簡報
    蕓薹屬物種(B. napus, B. oleracea, B. rapa) MAPK1家族的克隆、進化和表達特征
    陸俊杏, 盧坤, 朱斌, 彭茜, 陸奇豐, 曲存民, 殷家明, 李加納, 梁穎, 柴友榮
    中國農業科學. 2013, 46(16):  3478-3487.  doi:10.3864/j.issn.0578-1752.2013.16.019
    摘要 ( 379 )   PDF (720KB) ( 805 )   收藏
    參考文獻 | 相關文章 | 多維度評價
    【目的】克隆甘藍型油菜、甘藍和白菜MAPK1家族,分析3個物種MAPK1轉錄表達器官特異性。【方法】在電子克隆的基礎上,利用RACE(rapid amplification of cDNA ends)技術獲得3個物種MAPK1全長cDNA序列和gDNA序列。利用實時熒光定量PCR(qRT-PCR)分析3個物種MAPK1家族的器官特異性表達特征。【結果】從甘藍型油菜、甘藍和白菜中克隆了MAPK1家族共4個成員基因BnMAPK1-1、BnMAPK1-2、BoMAPK1和BrMAPK1,它們的gDNA長度為2 512—2 525 bp,均有3個外顯子和2個內含子,最長標準mRNA為1 599—1 620 bp,ORF均為1 100 bp。系統進化分析表明,甘藍型油菜MAPK1家族來自于甘藍和白菜MAPK1之和,其中,BnMAPK1-1對應于BoMAPK1,BnMAPK1-2則對應于BrMAPK1。qRT-PCR結果顯示3個物種MAPK1在所有檢測器官中均有表達,但器官特異性在種間差異顯著,暗示快速進化。【結論】克隆了甘藍型油菜、甘藍和白菜MAPK1的全長cDNA序列和gDNA序列,支持甘藍和白菜通過天然種間雜交形成異源四倍體物種甘藍型油菜的假說,蕓薹屬MAPK1基因和蛋白在序列和結構上非常保守,但轉錄表達的器官特異性上進化極快,近緣種間差異顯著。
    高效液相體積排阻色譜法測定稻米支鏈淀粉鏈長的相對分子質量分布
    楊小雨12, 劉正輝1, 李剛華1, 王強盛1, 王紹華1, 丁艷鋒1
    中國農業科學. 2013, 46(16):  3488-3495.  doi:10.3864/j.issn.0578-1752.2013.16.020
    摘要 ( 359 )   PDF (603KB) ( 773 )   收藏
    參考文獻 | 相關文章 | 多維度評價
    【目的】建立稻米支鏈淀粉鏈長相對分子質量分布的高效液相體積排阻色譜法(high performance size exclusion chromatography, HPSEC)的測定方法。【方法】先采用丁醇沉降法分離提純稻米支鏈淀粉,純化后的支鏈淀粉經異淀粉酶酶解切開分支糖苷鍵,然后運用HPSEC測定其相對分子質量分布。建立了稻米支鏈淀粉鏈長相對分子質量分布的HPSEC分析方法:Shodex SB-G、Shodex SB-803(1 000—100 000)、Shodex SB-802.5(300—10 000)3根凝膠色譜柱串連,柱溫40℃;流動相為0.1 mol•L-1 Tris+0.1 mol•L-1 NaCl,pH=7.40,流速0.5 mL•min-1;采用示差折光檢測器(Differential refractive index detector, RI),檢測器溫度為37℃;待測樣品濃度為5 mg•mL-1,進樣量20 μL。【結果】本法提純的稻米支鏈淀粉:淀粉含量為99.4%、蛋白殘余為0.02%、支鏈淀粉碘復合物最大吸收峰為517 nm,為高純度支鏈淀粉。供試大米樣品脫分支支鏈淀粉的平均聚合度(DP)分布在2—120,無雜峰干擾。【結論】試驗結果和方法驗證表明本方法數據可靠、重復性好、簡單易行。
    陜西省小麥禾谷孢囊線蟲病的新發生地區與田間侵染規律
    趙杰, 張管曲, 康振生
    中國農業科學. 2013, 46(16):  3496-3503.  doi:10.3864/j.issn.0578-1752.2013.16.021
    摘要 ( 283 )   PDF (377KB) ( 524 )   收藏
    參考文獻 | 相關文章 | 多維度評價
    【目的】明確陜西省渭北旱塬區和陜北地區小麥孢囊線蟲病(cereal cyst nematode,CCN)發生狀況及其田間侵染規律,為陜西省CCN的綜合防控提供決策依據。【方法】在小麥孕穗期至灌漿期,采用五點法隨機取樣、芬萘維克漂浮法(Fenwick)分離孢囊、利用形態學方法鑒定孢囊線蟲種類;定點定期取樣,利用次氯酸鈉-酸性品紅法對根系染色,顯微鏡檢查根內線蟲蟲態與數量。【結果】陜西省渭北旱塬區和陜北地區等24個縣(市)小麥的禾谷孢囊線蟲病的致病線蟲種類為禾谷孢囊線蟲(Heterodera avenae Wollenweber)。麟游縣的平均孢囊量最高,為32.0個/100 g土,永壽縣的平均孢囊量最低,為5.5個/100 g土。調查的陜北地區縣市沒有發現CCN。冬小麥秋播后,土壤中CCN孢囊孵化后的2齡幼蟲(J2)即可侵入根系內。翌年小麥返青,J2幼蟲開始侵染,高峰期為3月下旬至4月上旬,4月中旬開始出現3齡幼蟲(J3),4月下旬J3開始膨大,5月初在小麥根表可見白色孢囊。【結論】麟游縣、永壽縣、禮泉縣和武功縣為CCN 新發生地區;CCN在陜西省存在秋播后與返青后2個侵染階段,1年發生1個世代。
    基于高光譜的蘋果盛果期冠層葉綠素含量監測研究
    房賢一, 朱西存, 王凌, 趙庚星
    中國農業科學. 2013, 46(16):  3504-3513.  doi:10.3864/j.issn.0578-1752.2013.16.022
    摘要 ( 311 )   PDF (1448KB) ( 491 )   收藏
    參考文獻 | 相關文章 | 多維度評價
    【目的】建立蘋果冠層葉綠素含量及冠層光譜特征參量間的定量關系模型,以促進高光譜技術在蘋果樹精準施肥以及快速、無損長勢監測中的應用。【方法】以蒙陰縣果園的蘋果樹為試驗材料,連續2年分別測定了蘋果冠層光譜反射率和冠層葉綠素(Chl(a+b))含量,分析了冠層葉綠素含量與光譜反射率之間的相關關系,并計算了400—1 000 nm任意兩波段組合而成的RVI、DVI、NDVI和RDVI,分析了它們與冠層葉綠素含量的關系,以逐步回歸分析做比較,建立了蘋果冠層葉綠素含量監測模型。【結果】結果表明,以單變量估算葉綠素含量的最佳光譜指數為NDVI(975,742),相關系數為0.5093。利用多元逐步回歸建立的蘋果冠層葉綠素含量最佳監測模型為Y=-0.56(log1/R)771-0.48(log1/R)1978 +0.20(log1/R)2407 -0.10(log1/R)2440+4.749。【結論】用多元逐步回歸方法建立的模型來監測蘋果冠層葉綠素含量效果較好,為利用高光譜技術監測蘋果生長狀況提供了理論依據。
    葉用萵苣熱激蛋白90(LsHsp90)基因的克隆及其在熱激下的表達
    任月, 韓瑩琰, 李婷, 郝敬虹, 范雙喜
    中國農業科學. 2013, 46(16):  3514-3522.  doi:10.3864/j.issn.0578-1752.2013.16.023
    摘要 ( 278 )   PDF (1046KB) ( 474 )   收藏
    參考文獻 | 相關文章 | 多維度評價
    【目的】克隆葉用萵苣熱激蛋白Hsp90基因并探討其響應熱脅迫的相關機制,為揭示葉用萵苣抗熱分子機制奠定理論基礎。【方法】采用同源克隆和RACE 技術相結合,從葉用萵苣葉片總RNA 中克隆LsHsp90 cDNA 序列。通過實時熒光定量 PCR (qRT-PCR) 分析LsHsp90在葉用萵苣耐熱品種Z36和熱敏品種S106受37℃和42℃熱激后葉片的表達差異。【結果】該基因cDNA序列全長2 330 bp,開放閱讀框2 097 bp,編碼698個氨基酸,推導的蛋白質分子量約79.8 kD。蛋白質結構預測及同源比對分析表明,LsHsp90基因編碼蛋白含ATPase位點和Hsp90保守結構域,并與擬南芥(AY081302.1)、紫莖澤蘭(EU269070.1)等多種物種的熱激蛋白90高度同源;進化樹分析表明,LsHsp90與紫莖澤蘭Hsp90基因(EU269070.1)聚為一類。qRT-PCR分析表明,37℃熱脅迫下,該基因在耐熱品種和熱敏品種的葉片中均上調表達;42℃高溫脅迫下,熱敏品種S106 中下調表達,而耐熱品種Z36上調表達。【結論】成功從葉用萵苣葉片中分離克隆到LsHsp90,該基因具有已知物種Hsp90基因的特征,該基因在熱脅迫下有不同的表達特征,預示該基因其可能在抗高溫脅迫中起重要作用。
福利彩票3d开奖结果