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    2019年 第52卷 第9期 刊出日期:2019-05-01
      
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    中國農業科學. 2019, 52(9):  0. 
    摘要 ( 45 )   PDF (352KB) ( 44 )   收藏
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    作物遺傳育種·種質資源·分子遺傳學
    利用熒光SSR分析中國糜子的遺傳多樣性和群體遺傳結構
    寇淑君, 霍阿紅, 付國慶, 紀軍建, 王瑤, 左振興, 劉敏軒, 陸平
    中國農業科學. 2019, 52(9):  1475-1477.  doi:10.3864/j.issn.0578-1752.2019.09.001
    摘要 ( 168 )   HTML ( 32 )   PDF (1895KB) ( 172 )   收藏
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    【目的】利用熒光SSR研究中國糜子的遺傳多樣性與群體遺傳結構,為糜子品種改良、種質創新和資源利用提供依據。【方法】用不同地理來源且表型差異較大的6份糜子材料對SSR引物進行篩選,通過變性聚丙烯酰胺凝膠電泳獲得條帶清晰、穩定性好、多態性高的糜子SSR引物,對篩選出的引物5′末端進行6-FAM、HEX、ROX和TAMRA熒光標記,利用基因分析儀檢測不同等位變異的擴增片段大小,并以此來分析131份糜子材料的遺傳多樣性和群體結構。【結果】從202對SSR引物中共篩選出22對擴增穩定、多態性好的SSR引物,能同時適用于傳統變性PAGE膠電泳和熒光SSR標記-全自動分析檢測技術。22對SSR引物共檢測出128個主要等位變異,平均每個位點5.82個;基因多樣性指數變化范圍為0.3572—0.8132,平均0.6284;多態性信息含量為0.2934—0.8150,平均0.5874;Shannon多樣性指數為0.5427—1.7681,平均1.2062。不同生態區糜子種質間遺傳距離的變化范圍為0.0764—0.7251,平均0.3121,遺傳一致度的變化范圍為0.4843—0.9265,平均0.7465。其中,北方春糜子區和黃土高原春夏糜子區的遺傳距離最小,遺傳一致度最高,親緣關系較近。UPGMA聚類分析顯示,北方春糜子區和黃土高原春夏糜子區的材料聚為一類,個體間聚類,東北春糜子區的育成品種和農家種聚類結果一致,黃土高原春夏糜子區的育成品種在多個組群中都有出現。通過繪制K與△K的關系圖,K=4時,△K最大,據此將131份糜子材料劃分為4個類群,類群Ⅰ代表北方春糜子區;類群Ⅱ主要來自東北春糜子區;類群Ⅲ主要是北方春糜子區,群組Ⅳ主要是黃土高原春夏糜子區。各群體中大部分品種親緣關系單一,少數品種含有其他組群的遺傳成分。基于遺傳距離的聚類分析與群體遺傳結構分析結果基本一致,表明糜子的遺傳差異與地理來源相關。【結論】北方春糜子區和黃土高原春夏糜子區的遺傳多樣性比較豐富,東北春糜子區的育成品種主要以農家種為遺傳背景選育而來,黃土高原春夏糜子區在育種過程中引種資源廣泛,與其他生態區存在基因交流。

    陸地棉親本間遺傳距離與雜種優勢的相關性研究
    曲玉杰, 孫君靈, 耿曉麗, 王驍, ZareenSarfraz, 賈銀華, 潘兆娥, 何守樸, 龔文芳, 王立如, 龐保印, 杜雄明
    中國農業科學. 2019, 52(9):  1488-1501.  doi:10.3864/j.issn.0578-1752.2019.09.002
    摘要 ( 143 )   HTML ( 22 )   PDF (1470KB) ( 101 )   收藏
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    【目的】通過1 500個陸地棉雜交組合分析雜種優勢與其親本間數量性狀遺傳距離的相關性,探討能否利用大規模雜交組合親本間遺傳距離提高陸地棉雜種優勢預測效果,以期為棉花雜交育種和雜種優勢利用提供理論指導。【方法】選擇來自15個國家和中國23個省(市)的305份陸地棉核心種質為親本,采用L×T(Line×Tester)雜交設計配制1 500個雜交組合。2012—2013年,在中國南北方13個生態環境下考察其株高、單鈴重、衣分、纖維長度等10個產量和纖維品質相關性狀,分析F1雜種優勢、親本間遺傳距離和群體結構,并采用4種方式(Cor1—Cor4)計算遺傳距離與雜種優勢的相關性。【結果】10個性狀中親優勢(MPH)均值的變幅為1.70%—7.40%,平均為4.36%,按父本不同將F1分成5組(A,E),其MPH均值A>E>B>C>D;超親優勢(HB)均值的變幅為-4.17%—1.87%,平均為-0.17%,A、B和E組的HB均值皆為正。10個性狀在5組中除D、E組的馬克隆值之外,其他性狀普遍具有明顯的中親優勢,其中,單鈴重和纖維長度的中親優勢在5組中均以正優勢為主(達80%以上),最大值分別為34.01%和9.83%,對應的超親優勢分別為24.25%和5.80%。F1和親本差異顯著性分析表明單鈴重、株高、纖維長度、伸長率和整齊度指數整體表現出一定的超親優勢。父本(測試種)與300個母本之間的遺傳距離介于2.280—61.430,平均為21.550,5個測試種與母本間的平均遺傳距離D>C>E>A>B,其中,最近值為11.721,最遠值為33.271。按最小方差聚類,將305個陸地棉親本劃分為2個主群,包括5個亞群。4種遺傳距離與雜種優勢的相關性分析結果顯示,因樣本量、遺傳距離變幅和父本不同其結果有所差異,相關性隨樣本量的增大而有所增強。其中,Cor1是Cor2結果的整體體現;Cor3與Cor1和Cor2相比,部分性狀的中親優勢與遺傳距離的相關性有所不同;Cor4的相關性最弱。綜合來看,遺傳距離與衣分、斷裂比強度、整齊度指數和紡紗均勻性指數的中親優勢呈顯著正相關,遺傳距離與其他性狀的中親優勢的相關性因采用的分析方案不同,結果有所不同;在4種方案中,除整齊度指數外,遺傳距離與超親優勢的相關性整體表現負相關。其中,遺傳距離與馬克隆值、纖維長度和衣分的超親優勢相關性較強。【結論】陸地棉親本間數量性狀遺傳距離與雜種優勢有一定的線性關系,不同性狀的雜種優勢與遺傳距離的相關性存在正負和強弱差異,且樣本量越大相關性越強。說明基于大規模雜交組合研究陸地棉親本間遺傳距離與雜種優勢的關系效果顯著。

    耕作栽培·生理生化·農業信息技術
    播/收期對冬小麥-夏玉米一年兩熟模式周年 氣候資源分配與利用特征的影響
    周寶元, 馬瑋, 孫雪芳, 高卓晗, 丁在松, 李從鋒, 趙明
    中國農業科學. 2019, 52(9):  1501-1517.  doi:10.3864/j.issn.0578-1752.2019.09.003
    摘要 ( 158 )   HTML ( 13 )   PDF (479KB) ( 164 )   收藏
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    【目的】優化冬小麥-夏玉米一年兩熟模式周年氣候資源配置,探索兩季最佳的資源搭配模式,進一步挖掘當前氣候和生產條件下黃淮海地區周年產量潛力和資源利用效率。【方法】本研究通過10月上旬至12月上旬設置冬小麥不同播期和夏玉米不同收獲期,建立了5種冬小麥-夏玉米一年兩熟模式周年氣候資源分配方式,于2015—2017年在中國農業科學院河南新鄉試驗站進行田間試驗,對其產量、光溫水等氣候資源分配及利用特征進行研究。【結果】隨冬小麥播期及夏玉米收獲期推遲,兩作物生長季光溫水資源分配比例分別由處理Ⅰ的46%﹕54%、60%﹕40%、42%﹕58%調整至處理V的34%﹕66%、49%﹕51%、34%﹕66%范圍內,小麥季生長天數及其分配的光溫水資源量逐漸減少,將更多的資源分配到玉米季,從而導致小麥產量降低,但由于處理V的ZM66小麥品種維持了較高的穗數和穗粒數,因此與處理Ⅰ比產量降低不顯著。然而,處理V玉米季生理生長時間較處理Ⅰ延長約15 d,2016和2017年光溫水資源分配量分別增加143.8和120.7 MJ·m-2、290.5和281.6℃、12.4和25.7 mm,粒重分別增加13.1%和15.5%,周年產量兩年分別提高7.9%和6.7%;籽粒脫水時間增加約45d,光溫水資源分配量兩年分別增加322.5和336.3 MJ·m-2、509.6和497.8℃、56.7和14.1mm,籽粒含水量降至14.4%—17.3%,達到機械直接收獲標準。同時,由于處理V小麥季光溫水資源分配量顯著降低,特別是減少底墑水和越冬水灌溉約150mm,2016和2017年其光能、溫度和水分生產效率較處理Ⅰ分別提高12.5%和15.8%、10.9%和7.7%、39.6%和59.3%,玉米季雖然光能、溫度生產效率有所降低,但水分生產效率顯著提高,因此周年光能、溫度和水分生產效率兩年分別提高7.3%和9.1%、5.6%和5.1%、17.3%和29.3%。【結論】在不增加任何投入的前提下通過播/收期的調整(小麥12月上旬播種,玉米11月中旬收獲)優化冬小麥-夏玉米一年兩熟模式周年氣候資源配置,可進一步提升其周年產量和光溫水資源利用效率,對于促進黃淮海冬小麥-夏玉米種植模式可持續發展具有重要意義。

    倒伏脅迫下玉米抽雄期葉面積密度光譜診斷
    周龍飛, 顧曉鶴, 成樞, 楊貴軍, 孫乾, 束美艷
    中國農業科學. 2019, 52(9):  1518-1528.  doi:10.3864/j.issn.0578-1752.2019.09.004
    摘要 ( 113 )   HTML ( 5 )   PDF (1968KB) ( 87 )   收藏
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    【目的】葉面積密度(leaf area density,LAD)反映作物在垂直方向上體積內葉面積總量的差異,體現作物冠層內葉面積隨著高度變化的分布狀況。本文旨在探索玉米葉面積密度對于倒伏脅迫強度的表征能力及其光譜響應規律。【方法】以抽雄期倒伏夏玉米為研究對象,獲取倒伏后玉米多期LAD及冠層光譜數據,對倒伏玉米冠層光譜進行一階微分和小波變換處理,根據LAD與冠層光譜一階微分及小波分解系數的相關性分析,篩選LAD敏感波段和最佳小波分解尺度,采用偏最小二乘法構建倒伏玉米LAD光譜診斷模型,并利用實測樣本驗證模型精度。【結果】玉米LAD隨著倒伏脅迫程度的增強而增大,LAD可有效表征玉米倒伏脅迫強度及其自身恢復能力;玉米倒伏后冠層結構發生較大變化,倒伏玉米冠層光譜反射率較正常玉米整體增高,近紅外波段的增幅相比可見光波段更高,倒伏強度越強則光譜反射率越高;LAD敏感波段主要分布在藍光波段354—442、472—495 nm和紅光波段649—829 nm以及近紅外波段903—1 195 nm和1 564—1 581nm;同一階微分處理相比,基于連續小波變換的玉米倒伏LAD診斷模型的驗證R2提高6.08%—9.11%,RMSE降低23.08%—31.63%;小波分解尺度對LAD診斷精度有一定的影響,中低尺度模型精度優于高尺度模型,其中第5尺度構建的模型對LAD的擬合效果最優(R2=0.898,RMSE=1.016)。【結論】利用連續小波變換技術對玉米冠層高光譜解析,可有效診斷倒伏脅迫下的玉米葉面積密度,可以為玉米倒伏脅迫災情遙感監測提供必要的先驗知識。

    植物保護
    葡萄霜霉病菌實時熒光定量PCR檢測體系的建立和應用
    李文學, 肖瑞剛, 呂苗苗, 丁寧, 石華榮, 顧沛雯
    中國農業科學. 2019, 52(9):  1529-1540.  doi:10.3864/j.issn.0578-1752.2019.09.005
    摘要 ( 132 )   HTML ( 7 )   PDF (4438KB) ( 96 )   收藏
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    【目的】葡萄霜霉病是葡萄生產上重要的單年流行病害,研究旨在構建葡萄霜霉病菌(Plasmopara viticola)的實時熒光定量PCR(real-time PCR)檢測體系,為葡萄霜霉病的早期診斷和預測預報提供依據。【方法】依據GenBank中葡萄霜霉病菌cox2基因序列設計1對特異性引物(F-cox-Pv/R-Pv),建立并優化常規PCR和real-time PCR反應體系,利用葡萄霜霉病菌、葡萄炭疽病菌(Colletotrichum gloeosporioides)、葡萄白粉病菌(Uncinula necator)、葡萄灰霉病菌(Botrytis cinerea)、葡萄白腐病菌(Coniella diplodiella)、葡萄潰瘍病菌(Botryosphaeria dothidea)、白菜黑斑病菌(Alternaria brassicae)、辣椒炭疽病菌(C. capsica)、甘草根腐病菌(Fusarium solani)、西葫蘆白粉病菌(Sphaerotheca fuliginea)、番茄菌核病菌(Sclerotinia sclerotiorum)、馬鈴薯干腐病菌(F. equiseti)、西瓜枯萎病菌(F. oxysporum)、哈茨木霉(Trichoderma harzianum)等14種葡萄及其他作物病原菌和拮抗菌的菌絲DNA進行常規PCR和real-time PCR特異性檢測,并對靈敏度和可重復性進行評價。運用已構建的real-time PCR體系對人工接種葡萄霜霉病菌的潛育期葉片內病原菌DNA進行定量檢測,利用SPSS 19.0軟件分析接種時間與葉片內葡萄霜霉病菌潛伏侵染量的關系。【結果】研究設計的引物特異性高,常規PCR僅對葡萄霜霉病菌DNA有擴增條帶,為139 bp;real-time PCR檢測結果表明該對引物對葡萄霜霉病菌有唯一的產物吸收峰,對其他供試菌株均未檢測到產物吸收峰。常規PCR檢測的靈敏度為10 pg·μL -1,real-time PCR的靈敏度可達到0.1 pg·μL -1,是常規PCR檢測靈敏度的100倍。以攜帶目的基因片段的重組質粒為標準品,構建real-time PCR循環閾值(Ct)與模板濃度的線性關系,標準曲線y=42.27-3.36x,相關系數R 2=0.997,擴增效率為98.50%,線性范圍達7個數量級,在2.4×10 3—2.4×10 9 copies/μL呈現良好的線性關系。對人工接種葡萄霜霉病菌的潛育期葉片內病原菌DNA進行real-time PCR檢測,結果表明葉片內病原菌潛伏侵染量隨接種時間的變化呈指數關系增長,y=6.34×10 4·e 0.084 x,相關系數R 2=0.936。該real-time PCR檢測體系在接種6 h后就可以檢測到葡萄霜霉病菌DNA,檢測量為5.68×10 4 copies/μL病原菌DNA。 【結論】構建的葡萄霜霉病菌real-time PCR檢測體系的靈敏度遠高于常規PCR,且特異性強、重復性好,其Ct值與模板濃度呈較好的線性關系,擴增效率高,可用于定量檢測葡萄霜霉病菌的潛伏侵染量。

    不同Bt蛋白對捕食性天敵大草蛉的生態安全性評價
    趙曼, 湯金榮, 牛琳琳, 陳琳, 梁革梅
    中國農業科學. 2019, 52(9):  1541-1552.  doi:10.3864/j.issn.0578-1752.2019.09.006
    摘要 ( 89 )   HTML ( 8 )   PDF (433KB) ( 55 )   收藏
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    【目的】明確轉基因棉花中表達Cry1Ac、Cry1F和Cry2Ab蛋白對我國Bt棉田中主要捕食性天敵大草蛉(Chrysopa pallens)的潛在影響。【方法】通過在大草蛉人工飼料中添加高劑量Bt蛋白的方法,評價Cry1Ac、Cry1F和Cry2Ab蛋白對大草蛉重要生命表參數(4齡幼蟲體重、幼蟲發育歷期、化蛹率、蛹重、蛹發育歷期、羽化率、成蟲體重和產卵量)的影響,以不添加殺蟲物質的大草蛉純人工飼料作為陰性對照,以添加PA(砷酸二氫鉀,KH2AsO4)的大草蛉人工飼料作為陽性對照;同時,利用雙抗體夾心酶聯免疫吸附法(DAS-ELISA)測定取食Bt蛋白處理飼料后,大草蛉幼蟲、蛹以及成蟲體內的Bt蛋白濃度;利用ELISA法和敏感昆蟲生物測定法,檢測新鮮飼料和在試驗環境條件下暴露2 d的處理飼料中Bt蛋白的穩定性和生物活性;此外,利用酶活性測定的方法,比較取食空白對照飼料、Bt蛋白處理飼料或PA處理飼料后大草蛉體內主要消化酶(總蛋白酶、類胰蛋白酶、類凝乳蛋白酶和氨肽酶)、解毒酶(α-乙酸萘酯酯酶、羧酸酯酶、谷胱甘肽-S-轉移酶、乙酰膽堿酯酶、酸性磷酸酶和堿性磷酸酶)和保護酶(超氧化物歧化酶、過氧化物酶和過氧化氫酶)的活性。【結果】生命表評價結果表明,在大草蛉人工飼料中添加高濃度單獨Bt蛋白或Bt蛋白混合物,對大草蛉4齡幼蟲體重、幼蟲發育歷期、化蛹率、蛹重、蛹發育歷期、羽化率、成蟲體重和產卵量無顯著性不利影響,但飼料中添加PA卻能夠使大草蛉幼蟲和蛹發育歷期極顯著延長,4齡幼蟲體重、化蛹率、蛹重、羽化率、成蟲體重和產卵量極顯著降低;大草蛉體內Bt蛋白濃度測定結果顯示,大草蛉取食Bt蛋白處理飼料后,其幼蟲、蛹及成蟲體內均含有一定量的Bt蛋白;ELISA和敏感昆蟲生物測定結果表明,新鮮準備和在試驗環境條件下暴露2 d的Bt蛋白處理飼料,均含有高劑量且具有生物活性的Bt蛋白,因此,大草蛉在整個生物測定過程中接觸到的均為高濃度的、具有生物活性的Bt蛋白;此外,取食Bt蛋白處理飼料,對大草蛉幼蟲和成蟲體內主要消化酶、解毒酶和保護酶活性無顯著性影響,但取食PA處理飼料能使大草蛉幼蟲和成蟲體內氨肽酶活性極顯著降低,其他所測消化酶、解毒酶和保護酶活性顯著升高。【結論】大草蛉對3種供試Bt蛋白(Cry1Ac、Cry1F和Cry2Ab)不敏感,取食這3種Bt蛋白對大草蛉生長發育及其體內主要消化酶、解毒酶和保護酶活性沒有顯著不良影響,本研究所建立的生物評價體系還可用于評價其他新型轉基因抗蟲植物中表達殺蟲蛋白對大草蛉的生態安全性。

    土壤肥料·節水灌溉·農業生態環境
    添加玉米秸稈對旱作土壤團聚體及其有機碳含量的影響
    王碧勝,于維水,武雪萍,高麗麗,李景,李生平,宋霄君,劉彩彩,李倩,梁國鵬,蔡典雄,張繼宗
    中國農業科學. 2019, 52(9):  1553-1563.  doi:10.3864/j.issn.0578-1752.2019.09.007
    摘要 ( 129 )   HTML ( 32 )   PDF (430KB) ( 130 )   收藏
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    【目的】研究玉米秸稈還田對不同耕作處理下旱地土壤團聚體及其有機碳的影響,旨在探究長期傳統耕作土壤添加秸稈后團聚體及其有機碳的變化規律,并確定添加秸稈提高土壤有機碳的主要原因,為旱地農田固碳技術提供理論依據。【方法】采集大田長期試驗地的傳統耕作和免耕小區土樣進行室內培養試驗,設置4個處理,分別為傳統耕作土壤不加秸稈(CT)、免耕土壤不加秸稈(NT)、傳統耕作土壤加秸稈(CTS)和免耕土壤加秸稈(NTS),15次重復;秸稈為傳統耕作玉米植株地上部分,用量為5%烘干土質量,在25℃恒溫培養箱中通氣培養180 d,定期取樣進行團聚體組成和有機碳含量的測定。【結果】(1)不加秸稈處理團聚體以250—53 μm為主,占全部團聚體的52%—66%;添加秸稈處理以2 000—250 μm團聚體為主,占全部團聚體的41%—50%,CTS較CT提高230%—302%,NTS較NT提高92%—134%。(2)添加秸稈處理平均重量直徑(MWD)、幾何平均直徑(GMD)以及>0.25 mm團聚體百分比(R0.25)顯著提高,培養到180 d時,CTS較CT分別提高133%、130%和235%,NTS較NT分別提高53%、75%和87%。(3)培養至180 d時,CTS較CT分別提高250—53 μm和<53 μm團聚體有機碳70%和54%;NTS較NT分別提高250—53 μm和<53 μm團聚體有機碳30%和25%。(4)添加秸稈顯著提高2 000—250 μm團聚體有機碳對土壤有機碳的貢獻率,CTS和NTS分別為49%—61%和50%—60%,且受團聚體組成影響較大。【結論】添加秸稈能夠有效提高旱作土壤大團聚體(>250 μm)形成并增強其穩定性,提高大團聚體有機碳對土壤有機碳的貢獻率,且對傳統耕作處理土壤的促進效果更明顯。

    我國典型農田土壤中有機物料腐解特征及驅動因子
    馬想, 徐明崗, 趙惠麗, 段英華
    中國農業科學. 2019, 52(9):  1564-1573.  doi:10.3864/j.issn.0578-1752.2019.09.008
    摘要 ( 132 )   HTML ( 38 )   PDF (420KB) ( 128 )   收藏
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    【目的】研究不同有機物料在我國典型農田土壤中的腐解殘留率變化。結合氣候、土壤等環境因素,闡明秸稈和糞肥在我國農田土壤中的腐解特征及其主控因素,為因地制宜的合理利用有機資源和培肥土壤提供科學依據。【方法】在“國家土壤肥力肥效監測基地”中的黑土、潮土和紅壤實驗站,開展大田填埋試驗。有機物料烘干后過2 mm篩,置于48 μm孔徑尼龍網袋后填埋在土壤中。共4種供試有機物料:小麥秸稈(WS)、玉米秸稈(MS)、豬糞(PM)和牛糞(CM)。根據各地溫度差異,分別在填埋后49—360 d內采樣6次。通過分析腐解過程中有機碳含量的變化,整合土壤積溫與腐解殘留率的相關關系,采用VPA(方差分解分析)定量化氣候因子,有機物料性質及土壤養分對不同有機物料腐解的相對貢獻率。【結果】秸稈的腐殖化系數為11%—39%,糞肥的為50%—57%,秸稈腐解速率顯著高于糞肥,且南方紅壤上腐解速率高于北方黑土。地積溫方程可擬合有機物料腐解殘留率變化,由該方程可知,秸稈和糞肥易分解碳庫占比分別為76%和43%,穩定碳庫分別為17%和53%。但秸稈和糞肥易分解碳庫的分解速率常數(k)無顯著差異,其周轉積溫(1/k)約為1 400—2 000℃。物料性質是有機物料腐解的最主要影響因子,貢獻率為28%;其次是氣候,貢獻率為20%。秸稈腐解過程中主要影響因子為氣候因子、有機物料性質和土壤因子三者的交互作用,貢獻率達42.3%。糞肥腐解過程中主要影響因子為氣候因子,貢獻率為38.3%。【結論】秸稈腐解速率和其有機碳庫中易分解碳庫比例明顯高于糞肥,秸稈腐解受到氣候、土壤和物料性質協同作用影響,而糞肥則受氣候因子影響最大。在田間秸稈還田時需結合當地水熱條件確定還田時間和還田量,糞肥則建議在還田前進行堆腐,且注意施用時間。

    吡咯伯克霍爾德菌WY6-5的溶磷、抑菌與 促玉米生長作用研究
    宮安東, 朱梓鈺, 路亞南, 萬海燕, 吳楠楠, CheeloDimuna, 龔雙軍, 文淑婷, 侯曉
    中國農業科學. 2019, 52(9):  1574-1586.  doi:10.3864/j.issn.0578-1752.2019.09.009
    摘要 ( 138 )   HTML ( 4 )   PDF (2543KB) ( 79 )   收藏
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    【目的】篩選兼具高效溶磷和抑菌作用的微生物,檢測其溶磷效果和抑菌活性,鑒定抑菌代謝產物,并分析篩選微生物對植物生長的作用,為新型多功能抑菌微生物菌肥的研發提供材料。【方法】采集信陽毛尖茶車云山茶廠百年齡茶樹根際土壤,稀釋后涂布難溶性無機磷或難溶性有機磷培養基表面,培養后檢測溶磷活性,測定溶磷圈直徑,篩選具有高效溶磷作用的微生物,進行后續溶磷效果分析。高效溶磷菌WY6-5接種于培養液和土壤中,檢測不同培養時間下,可溶性磷含量的變化規律,分析菌株WY6-5的溶磷活性;玉米盆栽土壤中接種菌株WY6-5菌液,種植27 d后分析玉米植株長勢,檢測溶磷菌WY6-5對苗期玉米生長的影響;采用雙皿對扣培養法,驗證菌株WY6-5產揮發性物質的抑菌作用,檢測其對不同病原真菌的廣譜抑菌效果,氣相色譜串接質譜(GC-MS/MS)分析揮發性代謝物質,鑒定主效抑菌成分。【結果】篩選到3個兼具有降解難溶性無機磷和有機磷作用的微生物菌株,尤以菌株WY6-5溶磷效果最優。培養基培養條件下,對難溶性無機磷的溶解直徑達2.3 cm,溶磷圈直徑與菌落直徑比為4.6;對難溶性有機磷溶解直徑3.6 cm,溶磷圈直徑與菌落直徑比達7.2。表型觀察、生理生化鑒定和系統發育樹分析表明,菌株WY6-5為乳白色細菌,16S rRNA序列與Burkholderia pyrrocinia CIP 105874和Burkholderia stabilis CIP 106845兩個菌株的同源性最高,進化樹中聚成獨立一支。另外,WY6-5與Burkholderia pyrrocinia具有高度相同的生理生化反應結果。因此,本研究將WY6-5鑒定為吡咯伯克霍爾德菌(Burkholderia pyrrocinia)。WY6-5在液體培養和土壤中均具有較好的溶磷活性,20 d培養時間內,液體培養液中磷含量最高達520.4 mg·L -1,為對照組176倍;土壤試驗3—20 d期間,WY6-5處理組可溶性磷含量均高于對照組,且在盆栽試驗中,能高效促進苗期玉米植株的生長,處理組葉長、葉寬、葉片數、莖粗、株高、鮮重等指標顯著優于對照組;同時,菌株WY6-5還可產生揮發性抑菌物質,高效廣譜抑制8種重要病原真菌的生長,抑菌率最高達100%,經GC-MS/MS檢測發現,揮發性物質含有一種主效抑菌物,相對豐度達97%以上,鑒定為二甲基二硫。 【結論】吡咯伯克霍爾德菌(Burkholderia pyrrocinia)WY6-5分離自茶樹根際土壤,在培養基、培養液和土壤環境下,均具有高效的溶磷效果,將難溶性的無機磷轉化為植物可吸收的可溶性磷,并促進苗期玉米植株的生長;同時該菌還可產生揮發性抑菌物質二甲基二硫,高效抑制8種重要植物病原真菌的生長,抑制率最高達100%。菌株WY6-5兼具有提升土壤磷肥力、促進植物生長和和抑制真菌病害等多種重要作用,具有較好的生物學功能。

    園藝
    西瓜果實表皮蠟粉的化學成分與基因定位
    龔成勝, 趙勝杰, 路緒強, 何楠, 朱紅菊, 豆峻嶺, 袁平麗, 李兵兵, 劉文革
    中國農業科學. 2019, 52(9):  1587-1600.  doi:10.3864/j.issn.0578-1752.2019.09.010
    摘要 ( 99 )   HTML ( 7 )   PDF (4734KB) ( 49 )   收藏
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    【目的】蠟粉是植物抵御外界脅迫的第一層保護性屏障,對西瓜果實表皮蠟粉的結構、化學成分、遺傳規律進行研究,并預測控制該性狀的基因,以便全面了解性狀的生理生化作用,發掘候選基因。【方法】試驗選用無蠟粉的西瓜自交系‘美佳選黑’(P1)和有蠟粉的西瓜自交系‘FH’(P2)為雙親配制雜交組合,構建六世代群體(P1、P2、F1、F2、BC1P1、BC1P2),利用掃描電子顯微鏡(SEM)對雙親成熟期果實表皮結構進行觀察,通過氣相色譜-質譜聯用儀(GC-MS)對蠟粉的化學成分進行測定,以峰面積為指標,定量計算蠟粉化學成分的含量,采用BSA-seq對西瓜表皮蠟粉進行基因初定位,應用BLAST軟件將定位區間內的編碼基因與多個數據庫比對完成基因信息注釋,并通過詳細的基因注釋信息及突變位點分析,快速篩選候選基因。【結果】西瓜果實表皮蠟粉為灰白色,呈致密的板狀結構,長度約為5 μm;無蠟粉材料表皮較為光滑,無蠟粉層附著。GC-MS分析顯示,蠟粉中共檢測到24種脂肪族化學成分,分別屬于烴類、醇類、酯類、酸類、酚類和醛類。包括烴類物質10種,含量占表皮蠟粉有效化學提取物總含量的77.72%,鏈長變化范圍為C17—36,主要為C27、C28、C29、C32、C33、C34、C36的飽和正鏈烷烴;醇類物質5種,占12.60%;酯類物質5種,占0.43%;酸類物質2種,占0.53%;酚類1種,占0.80%;醛類1種,占3.99%;含量最高的5種化學成分依次為:正三十四烷、正二十九烷、1,30-三十烷二醇、正三十三烷、正二十八烷。在后代群體中,F1、BC1P2群體西瓜果實表皮全部有蠟粉,F2群體有蠟粉和無蠟粉西瓜果實的分離比符合3﹕1的孟德爾分離比例,BC1P1回交群體有蠟粉和無蠟粉分離比符合1﹕1的理論比,說明蠟粉的有無符合單基因顯性遺傳模式,有蠟粉對無蠟粉為顯性。對BSA-seq數據進行SNP和InDel關聯分析,關聯結果取交集得到1號染色體3.16—4.84 Mb的候選區域,該區域共含有144個基因。數據庫比對結果顯示,在關聯區域中,共138個基因有功能注釋,包括10個非同義突變,1個移碼突變。結合已有文獻報道,其中5個非同義突變基因可能與西瓜表皮蠟粉的生成有關:Cla002367為烯酰ACP-還原酶(ECR)類基因,該類基因是特長鏈脂肪酸合成所必須;Cla011514、Cla002337和Cla002342為細胞色素P450(CYP)家族基因,該家族部分編碼蛋白能夠通過烴基羥化等反應催化脂肪族化合物的生成;Cla002353的基因注釋信息為ABC轉運體,ABC轉運體與蠟質分子的轉運息息相關。【結論】西瓜果實表皮蠟粉為板狀結構,主要由特長鏈脂肪酸衍生成的脂肪族化合物組成。該性狀是單基因遺傳,有蠟粉為顯性性狀。BSA關聯分析得到1號染色體1.68 Mb的關聯區域,并預測關聯區域中Cla002367、Cla011514、Cla002337、Cla002342、Cla002353這5個非同義突變基因為調控西瓜果實表皮蠟粉性狀的候選基因。

    基于CAPS標記的甜瓜單果重相關性狀QTL分析
    劉相玉, 張裕舒, 劉柳, 劉識, 高鵬, 王迪, 王學征
    中國農業科學. 2019, 52(9):  1601-1613.  doi:10.3864/j.issn.0578-1752.2019.09.011
    摘要 ( 95 )   HTML ( 6 )   PDF (2272KB) ( 60 )   收藏
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    【目的】基于甜瓜全基因組重測序技術,挖掘SNP位點并開發CAPS標記,構建遺傳連鎖圖譜。初步為甜瓜單果重相關性狀進行QTL定位,為甜瓜單果重相關基因挖掘奠定理論基礎。【方法】選取栽培甜瓜品系M4-130為母本,野生甜瓜品系X207為父本,構建F2:3群體材料。對甜瓜果實單果重、果實長寬、果肉厚度、果形指數及可溶性固形物含量等性狀進行相關性分析。對親本材料進行20×深度重測序,利用BWA、SAMTools、VCFTools等軟件在全基因組范圍內挖掘雙親SNP位點,利用SNP2CAPS軟件結合甜瓜基因組上的限制性內切酶酶切位點開發CAPS標記,建立遺傳連鎖圖譜。最后采用復合區間作圖法對甜瓜果實單果重、果實長寬、果肉厚度、果形指數及可溶性固形物含量進行QTL分析。【結果】單果重與果實長度、果實寬度及果肉厚度呈顯著相關。開發得到可利用CAPS標記185個,構建一張包含12個連鎖群的遺傳連鎖圖譜,覆蓋總長度為1 600.45 cM,標記間的平均遺傳距離8.65 cM。定位發現與單果重相關QTL位點7個(FW3.1、FW4.1、FW5.1、FW6.1、FW8.1、FW8.2、FW11.1),與果實長度相關QTL位點7個(FL2.1、FL3.1、FL4.1、FL5.1、FL6.1、FL8.1、FL11.1),與果實寬度相關QTL位點5個(FWID3.1、FWID4.1、FWID8.1、FWID10.1、FWID11.1),與果肉厚度相關QTL位點2個(FT6.1、FT11.1),與果形指數相關QTL位點1個(FS2.1),與可溶性固形含量相關QTL位點2個(SS6.1、SS12.1)。【結論】獲得了24個QTL位點。確定了一個主效QTL位點FW8.1,貢獻率高達25.8774%,LOD值為16.8746。發現單果重與果實長度、果實寬度及果肉厚度密切相關,定位區間相同或相鄰,緊密集中在3、4、5、6、8、11染色體上。

    食品科學與工程
    酸性電解水對肉源性熒光假單胞菌的致死效應
    蔡林林, 胡海靜, 衣曉坤, 王虎虎, 徐幸蓮, 彭斌
    中國農業科學. 2019, 52(9):  1614-1623.  doi:10.3864/j.issn.0578-1752.2019.09.012
    摘要 ( 73 )   HTML ( 1 )   PDF (1073KB) ( 38 )   收藏
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    【目的】研究酸性電解水(AEW)能否有效控制肉源性熒光假單胞菌,探究處理后菌體變化,為新型殺菌劑的開發提供思路。【方法】使用不同有效氯濃度酸性電解水(20、40和60 mg?L -1)將肉源性熒光假單胞菌分別處理5、10、15、20、25和30 min后,通過平板計數檢測酸性電解水對肉源性熒光假單胞菌的致死效果;收集未處理及20、40和60 mg?L -1酸性電解水各處理5 min后菌液,利用掃描電子顯微鏡觀測酸性電解水對肉源性熒光假單胞菌細胞形態的影響;利用多種熒光探針檢測酸性電解水對肉源性熒光假單胞菌細胞膜完整性、胞內pH、胞內ATP濃度、膜電位的影響;提取胞外聚合物(EPS)探究酸性電解水與EPS的相互作用。 【結果】20、40和60 mg?L -1的酸性電解水均可在5 min內殺死10 7CFU/mL肉源性熒光假單胞菌,酸性電解水濃度大于40 mg·L -1時對肉源性熒光假單胞菌的殺菌效果沒有顯著影響(P>0.05),10 min處理后均已無活菌檢出。掃描電子顯微鏡結果表明3種濃度酸性電解水的處理均可使肉源性熒光假單胞菌菌體干癟皺縮,失去原本飽滿的細胞形態,60 mg·L -1電解水處理下破損程度最大。酸性電解水可顯著降低肉源性熒光假單胞菌的膜完整性、胞內pH、膜電位、胞內ATP濃度和EPS含量(P<0.05)。20、40和60 mg·L -1酸性電解水處理后菌體膜完整性分別降低到2.26%、1.87%和1.20%,膜電位分別消散40%、50%和50%,胞內pH由7.50分別降低到6.53、5.90和5.83,3種濃度處理后胞內ATP濃度已降至最低。殺菌效果顯著依賴于酸性電解水濃度的升高,當處理濃度高于40 mg?L -1時,胞內pH、膜電位和胞內ATP濃度的降低無顯著差異。酸性電解水處理下EPS中蛋白、總糖含量顯著降低,松散胞外聚合物 (L-EPS)中蛋白和總糖分別降低71.08%和62.23%,而緊密胞外聚合物(B-EPS)中蛋白和總糖分別降低99.32%和40.62%。當EPS反向添加到酸性電解水中時則可顯著降低酸性電解水氧化還原電位(ORP)(P<0.05),但對有效氯濃度(ACC)和pH沒有顯著影響(P>0.05)。 【結論】酸性電解水對肉源性熒光假單胞菌具有良好的殺菌效果,可破壞肉源性熒光假單胞菌細胞膜,同時EPS對酸性電解水殺菌效果具有一定的阻礙作用。

    畜牧·獸醫·資源昆蟲
    轉錄因子CEBPα和p53在豬卵巢顆粒細胞中 對Kiss1基因表達的調控
    辛曉萍, 王家迎, 張愛玲, 鐘玉宜, 何穎婷, 陳贊謀, 張哲, 張豪, 李加琪, 袁曉龍
    中國農業科學. 2019, 52(9):  1624-1634.  doi:10.3864/j.issn.0578-1752.2019.09.013
    摘要 ( 104 )   HTML ( 12 )   PDF (644KB) ( 53 )   收藏
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    【目的】預測母豬Kiss1(GenBank Gene ID: 100145896)上游區域潛在的轉錄因子結合位點,并驗證部分轉錄因子在豬卵巢顆粒細胞中對Kiss1基因的調控作用,為研究Kiss1基因在母豬卵巢顆粒細胞中的分子調控機制提供理論基礎。【方法】參考NCBI數據庫中Kiss1基因上游區域的序列,通過生物信息學網站預測的Kiss1基因上游區域潛在轉錄因子結合的位點,結合文獻閱讀與資料查詢,在轉錄因子CEBPα和p53與Kiss1基因上游區域潛在結合位點附近設計引物,利用染色質免疫共沉淀(ChIP)技術,驗證轉錄因子CEBPα和p53與Kiss1基因上游區域的結合情況;參照NCBI數據庫相關轉錄因子CEBPα和p53的mRNA序列,使用軟件Primer Premier 5設計引物,PCR分別擴增轉錄因子CEBPα(帶有Kpn I和Xho I限制性內切酶的酶切位點)和p53(帶有Kpn I和Hind III限制性內切酶的酶切位點)的CDS區序列,并進行測序鑒定,連接到真核表達載體pcDNA3.1(+)上,構建含有潛在轉錄因子CEBPα和p53 CDS區序列的真核表達載體,并獲得無內毒素質粒,分別命名為pcDNA3.1-CEBPα和pcDNA3.1-p53;化學合成目標轉錄因子CEBPα和p53的干擾siRNA片段。屠宰場采集豬的卵巢,快速分離并培養原代豬的卵巢顆粒細胞,陽離子脂質體轉染法分別將轉錄因子CEBPα和p53真核表達載體(pcDNA3.1-CEBPα和pcDNA3.1-p53)或siRNA片段(CEBPα-siRNA和p53-siRNA)轉染進母豬卵巢顆粒細胞,使用實時熒光定量PCR和Western Blot技術分別驗證預測的轉錄因子CEBPα和p53對Kiss1基因mRNA水平和蛋白水平的影響。【結果】生物信息學預測結果表明,Kiss1基因上游區域(-850—+221)存在p53(腫瘤抑制蛋白,tumor protein p53,p53)、CCAAT增強子結合蛋白(CCAAT/enhancer binding protein, CEBP)、信號傳導及轉錄活化家族Stat4(signal transducer and activator of transcription 4, Stat4)等轉錄因子的潛在結合位點,其中轉錄因子p53(GenBank Gene ID:397276,NM_213824.3)可能結合在Kiss1基因上游區域-533—-523 bp處,轉錄因子CEBPα(GenBank Gene ID:397307,XM_003127015.4)可能結合在Kiss1基因上游區域-744—-733 bp處;ChIP結果表明,轉錄因子p53和CEBPα可以特異性的結合在Kiss1基因上游區域-533—-523 bp和-744—-733 bp處;在母豬卵巢顆粒細胞中超表達轉錄因子p53或CEBPα后,Kiss1基因的mRNA的表達水平顯著下降(P<0.05),蛋白水平顯著下降(P<0.05);在母豬卵巢顆粒細胞中,干擾轉錄因子p53或CEBPα后,Kiss1基因的mRNA的表達水平顯著升高(P<0.05),蛋白水平顯著升高(P<0.05)。【結論】在豬卵巢顆粒細胞里,轉錄因子p53和CEBPα能結合到Kiss1基因的上游區域降低其啟動子轉錄活性,進而降低其mRNA和蛋白表達水平。

    生命周期評價在畜牧生產中的應用研究現狀及展望
    姜明紅, 劉欣超, 唐華俊, 辛曉平, 陳吉泉, 董剛, 吳汝群, 邵長亮
    中國農業科學. 2019, 52(9):  1635-1645.  doi:10.3864/j.issn.0578-1752.2019.09.014
    摘要 ( 164 )   HTML ( 23 )   PDF (508KB) ( 144 )   收藏
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    生命周期評價(life cycle assessment,LCA)作為一種全程評價產品總體環境影響和生產效率的方法,被廣泛應用于企業優化生產經營結構和政府政策制定等方面。近年來,出于糧食安全保障和生態環境保護的考慮,LCA在農牧生產中的應用越來越受到重視。但我國相關方面的研究和應用并不多見,特別是作為畜牧業重要產區的北方草原牧區,尚沒有開展針對當地畜牧生產體系的LCA研究。在這一背景下,本文圍繞主要環節和流程對國內外畜牧生產LCA方法框架和研究現狀進行了綜述,主要從LCA研究目的與范圍的確定、生命周期清單分析和影響評價三個方面展開。國內外文獻綜述表明,國外畜牧產業中LCA的應用已相當普遍,無論從方法上還是技術上都已經相當成熟和完備,對我國畜牧產業LCA科學研究和實際應用均有較強的借鑒意義。然而,由于國內外畜牧產業的具體情況差異,國外LCA經驗難以直接應用到國內。首先,在我國北方牧區,家庭牧場是當地畜牧生產的主要經營方式,具有季節性放牧與圈養舍飼結合、不同牲畜混養、牧民生活和生產經營界限不明確等特點,難以直接套用國外方法。此外,在我國開展畜牧生產LCA研究所需的數據收集非常困難,這是制約我國畜牧生產LCA應用的最大短板。最后,由于畜牧生產技術及經營方式的差距,相比于歐美澳等畜牧業發展成熟國家,我國北方牧區畜牧生產受降水等自然因素及市場供求價格因素影響年際間差異更大,這也是我國開展畜牧生產LCA研究必須考慮的問題。為了使 LCA 能夠精準且廣泛地應用于我國畜牧產業,應從以下幾個方面進行改進:首先,開展我國北方牧區不同規模畜牧生產經營系統物料投入和產出的調查和研究,為畜牧產業LCA研究收集必要數據;其次,根據我國畜牧產業的特征建立并完善適合國情的畜牧業LCA標準方法和數據庫,提升我國LCA結論的準確性;第三,在我國畜牧LCA研究中還應加大學科交叉力度,理清畜牧產業發展中的自然和社會驅動因素,為我國北方牧區畜牧產業的可持續發展提供數據參考和科技支撐。

    食品動物源耐甲氧西林金黃色葡萄球菌MLSB類 抗生素耐藥性調查
    李淑敏, 方亮星, 李亮, 趙孟, 陸肖, 古偉琪, 廖曉萍, 孫堅, 熊雁瓊, 劉雅紅
    中國農業科學. 2019, 52(9):  1646-1656.  doi:10.3864/j.issn.0578-1752.2019.09.015
    摘要 ( 75 )   HTML ( 11 )   PDF (462KB) ( 54 )   收藏
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    【目的】調查中國6個省食品動物源耐甲氧西林金黃色葡萄球菌(livestock-associated methicillin- resistant staphylococcus aureus,LA-MRSA)對大環內酯類-林可酰胺類-鏈陽菌素B類(macrolides, lincosamides and type B streptogramin, MLSB)抗生素的耐藥情況及MLSB耐藥基因的流行情況。【方法】從廣東、河南、河北、福建、山東以及湖南等6省采集的食品動物源(豬、雞以及鴨)樣品約6 500份,分離金黃色葡萄球菌,通過苯唑西林藥物敏感性測定和mecA,mecC基因檢測鑒定MRSA菌株。采用二倍瓊脂稀釋法和微量肉湯稀釋法測定LA-MRSA菌株對MLSB以及其他常見的10種抗菌藥物的敏感性,采用PCR方法檢測MLSB耐藥基因(ermA-CereA-B)以及其他16種常見耐藥基因。【結果】6 500份動物源樣品中分離出480株金黃色葡萄球菌,其中101株為LA-MRSA,LA-MRSA分離率為1.54%(101/6500),金黃色葡萄萄球菌中LA-MRSA檢出率達21.04%(101/480)。LA-MRSA菌株對MLSB類抗生素呈現高度耐藥的情況,耐藥率高達99.00%以上,對其他常見的抗菌藥物氟苯尼考、四環素、頭孢噻肟以及慶大霉素等抗菌藥物也均呈現高度耐藥,耐藥率為94.00%—99.00%。MLSB耐藥基因檢測結果顯示,ermC的檢出率最高,為100.00%;其次是ereB,為79.20%,接著是ermAereA,檢出率分別為45.54%和40.59%,而ermB的檢出率最低,為11.88%。其他耐藥基因的檢測結果顯示fexA、tetL、aadA1、aph(4’)-Ia的檢出率較高,分別是92.10%、97.02%、97.29%和83.17%;其次是tet(M),檢出率為71.29%;而aac(6’)-Ib、aac(3’)-Ic、 aph(3’)-II、aph(3’)-IV、optrA、tet(A)、tet(C)的檢出率相對較低,分別是49.50%、46.53%、39.60%、37.62%、33.67%、29.70%和20.79%;接著檢出率更低的是cfr、tet(K)、lnuA以及lnuF,分別為17.82%、14.85%、5.94%和3.96%。進一步分析LA-MRSA菌株中MLSB耐藥基因檢出個數與對受試抗菌藥物的耐藥數目之間的關系,發現隨著動物源MRSA菌株對受試抗菌藥物的耐藥數目增加時,菌株中MLSB耐藥基因檢出個數也在增加。【結論】動物源MRSA菌株對MLSB高度耐藥,其與菌株中ermC基因的高檢出率一致,并且LA-MRSA菌株多重耐藥情況嚴重,這與MLSB耐藥基因檢出個數以及其他耐藥基因的高檢出率密切相關。因此,養殖場中MLSB類藥物使用應規范使用,以減少動物源MRSA菌株的多重耐藥性。

    研究簡報
    紫蘇茉莉酸羥基甲基轉移酶基因PfJMT的克隆及表達分析
    白輝揚, 魯庚, 陸俊杏, 管麗, 唐鑫, 張濤
    中國農業科學. 2019, 52(9):  1657-1666.  doi:10.3864/j.issn.0578-1752.2019.09.016
    摘要 ( 136 )   HTML ( 18 )   PDF (2537KB) ( 118 )   收藏
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    【目的】茉莉酸羥基甲基轉移酶(jasmonic acid carboxyl methyltransferase,JMT)是植物茉莉酸甲酯生物合成的關鍵酶,通過克隆紫蘇JMT,并研究其在不同脅迫下和種子不同發育時期的表達模式,為研究JMT在植物防御和種子發育中的作用提供理論依據。【方法】根據紫蘇種子轉錄組測序結果設計引物,從紫蘇中克隆得到紫蘇茉莉酸羥基甲基轉移酶基因的DNA和cDNA序列,命名為PfJMT,通過生物信息學分析該基因的結構、穩定性、親水性、亞細胞定位及保守結構域等,利用系統進化樹分析PfJMT和其他物種JMT蛋白的進化關系。取開花期的紫蘇根、莖、葉、花等組織用于組織特異性表達分析。取開花后5、10、15、20、25和30 d的種子用于JMT在種子不同發育時期表達模式的研究。用25 μmol·L -1茉莉酸甲酯(methyl jasmonate,MeJA)和1 mmol·L -1水楊酸(salicylic acid,SA)噴灑處理具有4片真葉的紫蘇幼苗并澆灌根部,分別于處理0、2、4、8、16、24和48 h后取樣,研究JMT在不同脅迫下的表達模式。 【結果】PfJMT的ORF長1 050 bp,編碼349個氨基酸。生物信息學分析表明,PfJMT為不穩定的親水蛋白,亞細胞定位于細胞質,含有一個甲基轉移酶-7(Methyltransf-7)保守結構域。通過與其他物種的JMT蛋白多序列比對發現,紫蘇JMT和丹參JMT的序列一致度最高,為80.5%,和水稻的序列一致度最低,為36.8%。在對多種不同植物基于JMT蛋白構建系統進化樹的分析中發現紫蘇和擬南芥、丹參等雙子葉植物親緣關系較近,而與建蘭、水稻等單子葉植物親緣關系較遠,說明JMT在單子葉和雙子葉植物的進化過程中可能存在較大的差異。熒光定量PCR結果表明,PfJMT在紫蘇根和莖中的相對表達量最低,葉和花中的相對表達量比根和莖中略高,在開花后5d的種子中的表達量最高,并且隨著種子的發育表達逐漸下調,說明JMT在種子發育中起著重要作用。在使用外源MeJA和SA處理的紫蘇根、葉組織中,PfJMT表達均顯著下調,這一結果支持JMT可能不直接參與防御反應,而是通過調節JA水平間接參與植物防御的理論。【結論】成功克隆獲得PfJMT,隨著種子的發育PfJMT表達量逐漸下調,并在外源MeJA、SA脅迫下表達量顯著下調。

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